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LDL动物调理实验

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LDL动物调理实验. 姓名:王洋 导师:韩润林. LDL:低密度脂蛋白 细菌:M41(A群链球菌的一种) 调理作用:调理作用(opsonization)又称调理素作用,是指抗体、补体与吞噬细胞表面结合,促进吞噬细胞吞噬细菌等颗粒性抗原的作用。 调理素:病理学中指一类能增强吞噬细胞吞噬功能的蛋白质,例如: 甘露糖结合凝集素、表面活性蛋白、免疫球蛋白等等 。. 本次实验室为了探究病原进入机体后,机体内的LDL能否增加单核巨噬细胞对病原的吞噬作用,以此来判定LDL是否具有调理作用。. 试验用小鼠:生长20天以上的SPF小鼠

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Presentation Transcript
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LDL动物调理实验

姓名:王洋

导师:韩润林

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LDL:低密度脂蛋白

细菌:M41(A群链球菌的一种)

调理作用:调理作用(opsonization)又称调理素作用,是指抗体、补体与吞噬细胞表面结合,促进吞噬细胞吞噬细菌等颗粒性抗原的作用。

调理素:病理学中指一类能增强吞噬细胞吞噬功能的蛋白质,例如:甘露糖结合凝集素、表面活性蛋白、免疫球蛋白等等。

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本次实验室为了探究病原进入机体后,机体内的LDL能否增加单核巨噬细胞对病原的吞噬作用,以此来判定LDL是否具有调理作用。本次实验室为了探究病原进入机体后,机体内的LDL能否增加单核巨噬细胞对病原的吞噬作用,以此来判定LDL是否具有调理作用。
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试验用小鼠:生长20天以上的SPF小鼠

菌注射方法:尾静脉注射法

取血方法:断头取血

试验用培养基: BHI琼脂平板 (活化)

THY液体培养基(培养)

实验结果:平板活菌计数

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实验目的:因为初次进行动物实验,所以实验的目的是确定注入小鼠体内的菌的数量。

要求30min和1h之后小鼠体内剩余的菌达到注入菌数的一半左右,才具有讨论价值

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实验过程

第一天下午4点将冻存的菌在BHI平板上放入二氧化碳培养箱中进行活化

第二天上午8点半将菌刮如THY培养基中进行培养,当菌液OD=0.58左右时进行试验

取1ml菌液离心,用预冷过的生理盐水洗一遍,用生理盐水稀释到需要的浓度

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取6只体重大体相同的小鼠,分为1组和2组,每组各三只。将100ul菌液在小鼠尾部注入,第一组30分钟后缺血涂板。第二组1h后取血液涂板。每100ul血液涂1块平板,每只小鼠平行涂板三个。(因为不采用抗凝剂进行抗凝,所以去血液后要立刻进行涂板。注射和采血的过程比较熬费时间,所以必须计划好操作时间,以免影响实验)
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将涂好的平板放入二氧化碳恒温培养箱中进行过夜培养,第二天数板,记录每组实验的数据。根据平板上的菌的数量可以推算出小鼠体内剩余的菌的数量。
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由于前几次实验经验不足,所以每次实验过后,平板上基本都没有剩下菌落,实验结果并不是很好,所以实验没有讨论的意义。再次进行实验时要继续增加注入的菌的数量。

数板时要注意菌落是不是链球菌,因为可能出现杂菌的污染,长出其他菌类的菌落,所以在经验判断的同时要做片子在显微镜下观察。

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实验存在的问题:

1 菌(M41)的致病机理需要进行了解。

2 小白鼠体内单核巨噬细胞所占的比例。

3 病原进入小鼠体内被单核巨噬细胞识别的过程和时间等等。