1 / 24

А.М. Попов , Т.Ю. Вержбицкая, Г.А. Цаур, Е.В. Шориков, С.В. Цвиренко, Л.И. Савельев, Л.Г. Фечина

А.М. Попов , Т.Ю. Вержбицкая, Г.А. Цаур, Е.В. Шориков, С.В. Цвиренко, Л.И. Савельев, Л.Г. Фечина. Изменения иммунофенотипа опухолевых клеток при В-линейном остром лимфобластном лейкозе у детей во время индукционной терапии по протоколу ALL-MB-2008.

jamil
Download Presentation

А.М. Попов , Т.Ю. Вержбицкая, Г.А. Цаур, Е.В. Шориков, С.В. Цвиренко, Л.И. Савельев, Л.Г. Фечина

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. А.М. Попов, Т.Ю. Вержбицкая, Г.А. Цаур, Е.В. Шориков, С.В. Цвиренко, Л.И. Савельев, Л.Г. Фечина Изменения иммунофенотипа опухолевых клеток при В-линейном остром лимфобластном лейкозе у детей во время индукционной терапии по протоколу ALL-MB-2008 Областная детская клиническая больница №1, Екатеринбург Институт медицинских клеточных технологий, Екатеринбург Уральская государственная медицинская академия, Екатеринбург «Национальные дни лабораторной медицины России», 4-6 октября 2011, Москва

  2. Минимальнаяостаточная болезнь(minimalresidual disease,MRD)– состояние, обусловливающее развитие рецидива и связанное с сохранением опухолевыхклеток в крайне низких концентрациях,ниже предела чувствительности морфологических методов

  3. 1 10-1 Предельная чувствительность цитологического исследования 10-2 10-3 Относительное количество опухолевых клеток 10-4 10-5 Предельная чувствительность проточной цитометрии и ПЦР 10-6 10-7 0 0 1 2 3 4 5 Терапия Время наблюдения (годы)

  4. Основные методы мониторинга MRD Количественная полимеразная цепная реакция Определение химерного гена Определение химерного транскрипта Определение клональных перестроек генов тяжелых цепей ИГ и ТкР Многоцветная проточная цитометрия

  5. Применение проточной цитометрии для мониторинга MRD • Определение лейкоз-ассоциированного иммунофенотипа (LAIP)

  6. Изменения иммунофенотипа опухолевых клеток во время терапии • G. Gaipa et al, Leukemia, 2005 • A.J. van der Sluijs-Gelling et al, Leukemia, 2005 • G. Gaipa et al, Leukemia, 2005 • M. Borowitz et al, Cytometry B, 2005 • G. Gaipa et al, Cytometry B, 2008 • M.N. Dworzak et al, Blood, 2008 • M.N. Dworzak et al, Cytometry B, 2010

  7. Цель исследования–оценить изменения экспрессии опухолевыми клетками CD10, CD34, CD19, CD20, CD45 и CD58 на 15-й день терапии по протоколу ALL-MB-2008 и значимость этих изменений для мониторинга MRD

  8. Пациенты и методы исследования • 22 пациента с CD10(+)BCP-ALL и величиной MRD на 15-й день терапии> 0,01% • 9-цветная проточная цитометрия (FACS Aria, BD): • CD58 (AICD58-FITC, BC) • CD11a (LFA-1-PE, BD) • CD34 (581-PE-TexasRed, BC) • CD38 (HIT2-PerCP-Cy5.5, BD) • CD10 (HI10a-PE-Cy7, BD) • CD19 (SJ25C1-APC, BD) • CD20 (L27-APC-Cy7, BD) • CD45 (2D1-AmCyan, BD) • Syto 41 (Invitrogen) • Оценивали: • Среднюю интенсивность флюоресценции (MFI) • Коэффициент вариации (CV) • Долю позитивных клеток (%)

  9. Выделение опухолевых клеток SSC CD10 Опухолевые клетки Syto 41 CD45 Обратное гейтирование Ядросодержащие клетки SSC SSC CD19 FSC CD19(+)-клетки

  10. Нормальное созревание В-лимфоцитов BCP 1 CD34 CD20 CD45 BCP 2 CD10 BCP 3 CD99 CD38 TdT Зрелые В-лимфоциты CD44 CD11a CD58

  11. Изменения иммунофенотипа(опухолевые клетки) CD10 CD20 CD34 p = 0,0030 p = 0,0273 p = 0,0007 CD19 CD45 CD58 p = 0,0033 p = 0,0001 p = 0,0017

  12. Изменения иммунофенотипа(В-лимфоциты) CD20 CD19 p = 0,0013 p = 0,1060 CD45 CD58 p = 0,0130 p = 0,0067

  13. Изменения иммунофенотипа(опухолевые клетки) Диагноз CD45 CD34 CD58 CD10 15-й день

  14. Изменения иммунофенотипа(опухолевые клетки) Диагноз CD20 CD19 CD45 CD10 15-й день

  15. Изменения иммунофенотипа(опухолевые клетки) изменения распределения клеток p = 0,1913 CD20 CD10 CD34 p = 0,0364 p = 0,0008 CD45 CD58 p = 0,0003 p = 0,3443

  16. Изменения иммунофенотипа(опухолевые клетки) изменения распределения клеток Диагноз 15-й день CD10 CD34 CD45

  17. Изменения иммунофенотипа(опухолевые клетки) изменения доли позитивных клеток CD20 CD34 CD45 p = 0,0002 p = 0,0015 p = 0,0003

  18. Изменения иммунофенотипа(опухолевые клетки) изменения доли позитивных клеток Диагноз CD10 15-й день CD45 CD34 CD20

  19. Изменения иммунофенотипаопухолевых клеток во время индукционной терапии CD10 CD20 CD34 p = 0,0069 p = 0,0071 p = 0,0001 CD19 CD45 CD58 p = 0,0001 p = 0, 2117 p = 0,0005

  20. Michael N. Dworzak, Angela Schumich, Dieter Printz, Ulrike Pötschger, Zvenyslava Husak, Andishe Attarbaschi, Giuseppe Basso, Giuseppe Gaipa, Richard Ratei, Georg Mann and Helmut Gadner CD20 up-regulation in pediatric B-cell precursor acute lymphoblastic leukemia during induction treatment: setting the stage for anti-CD20 directed immunotherapy Blood, 2008, Vol. 112, p. 3982-3988

  21. Пациент Б. (14 лет) День 0 День 15 День 36 перед HRI CD10 перед HRV перед HRIV перед HRIII перед HRII CD20

  22. Пациент С. (11 месяцев) День 36 День 0 День 15 CD10 День 85 День 43 CD20

  23. Выводы На 15-й день терапии по протоколу ALL-MB-2008 происходят существенные изменения иммунофенотипа опухолевых клеток Основными тенденциями изменения иммунофенотипа опухолевых клеток являются снижение экспрессии CD10, CD34, CD58 и повышение экспрессии CD19, CD20, CD45 Изменения иммунофенотипа усложняют мониторинг МОБ, так как уменьшают различия между нормальными и опухолевыми клетками

  24. Благодарю за внимание!

More Related