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染色体的核型分析. 实验目的. 1 、了解染色体组型分析的原理及各项参数意义。 2 、学习染色体组型分析的方法。. 原理. 染色体组 : 一个二倍体生物中配子所含有的全套染色体。 染色体组型: 染色体组在细胞分裂中期的表型。 染色体组型分析: 根据其分裂中期的形态特征把染色体一对对地排列起来,以分辨出来自不同物种或产生了染色体结构变异的染色体。. 原理. 核型模式图: 将染色体组的全部染色体逐个按其特征绘制下来,再按长短,形态等特征排列起来的图像。 标本片要求: 分裂相多,染色体分散,互不重叠,能清楚显示着丝点位置。. 原理.
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实验目的 1、了解染色体组型分析的原理及各项参数意义。 2、学习染色体组型分析的方法。
原理 • 染色体组:一个二倍体生物中配子所含有的全套染色体。 • 染色体组型:染色体组在细胞分裂中期的表型。 • 染色体组型分析:根据其分裂中期的形态特征把染色体一对对地排列起来,以分辨出来自不同物种或产生了染色体结构变异的染色体。
原理 • 核型模式图:将染色体组的全部染色体逐个按其特征绘制下来,再按长短,形态等特征排列起来的图像。 • 标本片要求:分裂相多,染色体分散,互不重叠,能清楚显示着丝点位置。
原理 对分散良好的染色体显微摄影,测量放大照片上的每个染色体,根据染色体的长度和其形态特征,依次配对排列、编号,并对各染色体的形态特征作出描绘。
实验用品 • 材料: 芍药(2n=10)的染色体照片,眼科剪刀,测量工具,胶水等。
实验步骤 • 1、染色体组型分析指标: • (1)染色体数目:至少统计5-10个个体,30个以上细胞的染色体数目,显微镜下选出10个中期分裂相的细胞,进行显微照相。 • (2)绝对长度:测微尺直接测量的实际长度(μm),或经显微摄影后在放大照片上的换算长度。 绝对长度(μm)=(放大的染色体长度(mm)/放大倍数)×1000
实验步骤 • (3)相对长度:指单个染色体的长度占单套染色体组(性染色体除外)总长度的百分数。 相对长度(%)=(单个染色体长度/单套染色体组全长)×100% • (4)臂比值:臂比是反映着丝点在染色体上的位置。 臂比值=长臂/短臂(精确到0.01)
实验步骤 (5)着丝点位置:根据臂比值将染色体分成以下几种情况: 臂比 染色体类型 1.00 正中部着丝点(Media point) M 1.01~1.70 中部着丝点区(media region) m l.71~3.00 近中部着丝点区(submedia region) sm 3.01~7.00 近端部着丝点区 (subterminal region) st 7.01以上 端部着丝点区(terminal region) t ∞ 端部着丝点(terminal point) T
实验步骤 • 2、实验步骤 (1)剪贴:沿染色体边缘剪下每条染色体。 (2)配对:目测进行同源染色体配对。 (3)排列:按一定顺序将一个细胞内的染色体进行排队、编号。 排列方式:从大到小排列;相同长度的染色体,短臂长的在前;无特殊标记的染色体(如随体)排列在前,有特殊标记的染色体(如随体)排列在后;性染色体单独另排或放在最后。
实验步骤 • (4)粘贴:把已经排列的同源染色体按先后顺序粘贴在绘图纸上。 着丝点处同一水平线,长臂向下,短臂向上,垂直粘贴。 • (5)测量:染色体、长臂和短臂的长度,随体不计入。 每对同源染色体相对长度: 染色体相对长度=每对同源染色体绝对长度/染色体总长度 臂比: 臂比=染色体长臂/染色体短臂 • (6)校正:根据测量数据校正目测配对和排列顺序是否正确,再重新排列。
实验步骤 • (7)分类:依据臂比,将染色体分类。 • (8)核型公式:根据染色体类型,可以将一种生物的染色体核型书写成一定公式。 如:芍药核型为:K(2n)=2X=10=xm+xSm+xSt(SAT)。 K:基本核型;SAT:具随体染色体;符号前的数字x:该类染色体数目。 • (9)核型模式图的绘制: 横轴:染色体序号; 纵轴:相对长度值(%); 零点:绘在纵轴的中部,并与各染色体的着丝点相对应。
实验作业 1、将测量结果填入下表 染色体测量数据: 注意:芍药的染色体序号为1-5。 2、绘制核型模式图 3、写出组型公式