医学遗传学实验

1. 医学遗传学实验 实验五 人类遗传性状分析

2. 实验原理 本实验通过调查已知的人类遗传性状，了解这些性状的遗传特性。 1、苯硫脲的味觉感受能力 人类味觉对苯硫脲（又称苯基硫代碳酰二胺，PTC）的敏感性由一对等位基因（T、t）控制，属不完全显性遗传。基因型不同的个体尝出含PTC溶液的浓度有明显的差异。为便于研究，将能尝出PTC浓度在1/50000以下苦味者称为尝味者，对PTC浓度在1/24000以上仍感觉无味者称为味盲者。

3. 实验原理 2、人类ABO血型系统的遗传 存在于人类红细胞表面的抗原性质是ABO血型划分的基础，这种抗原决定于9q34上的一对复等位基因：IA、IB和i，且IA和IB对i为显性，IA和IB为共显性。IA决定红细胞表面有抗原A，IB决定红细胞表面有抗原B，i决定红细胞表面无抗原A和B。根据红细胞表面是否含有抗原和所含抗原类型的不同，将人类的ABO血型系统分为A型、B型、AB型和O型四种。此外，在不同血型人的血清中所含抗体不同，即A型血清中含有抗B抗体，B型血清中含有抗A抗体，O型血清中同时含有两种抗体，而AB型血清中则不含有这两种抗体。由于在相应的抗原抗体之间会发生凝集反应，故在输血时对供血、受血者的血型有一定的限制，输血前一定要进行血型的配型。

4. 实验步骤 1、PTC尝味 1）取无菌棉签，分别蘸取不同浓度的PTC溶液，自低浓度向高浓度依次进行尝味。根据本人所感受到苦涩味的最低浓度，确定自己的表现型和基因型。 2）统计本实验室全体同学PTC尝味的表现型和基因型，将统计结果填入下表。 PTC尝味结果统计

5. 3）计算基因型频率和基因频率 由于PTC尝味性状为不完全显性遗传，表现型能直接反应出基因型。基因型和基因频率的计算公式如下： 基因型频率＝（某种基因型个体数/样本总人数）×100％ 基因频率计算：设T的频率为p，t的频率为q p=TT+Tt/2, q=tt+Tt/2或q=1-p

6. 2、ABO血型遗传分析 1）取冷冻的抗A和抗B血清，室温下化冻备用。 2）采血：用70％的酒精棉球消毒耳垂或无名指末端，再用三棱针快速刺破耳垂或无名指末端的皮肤。待血液流出时（可稍用力挤压），用吸管吸取后加一滴到盛有无菌生理盐水 的0.5ml小试管内，轻轻振荡，使其成为淡红色的血球悬液。 3）取清洁的双凹载玻片一张，在其两端分别用记号笔标记抗A和抗B字样，用滴管分别滴加抗A和抗B血清各一滴于相应的凹面内。

7. 4）用干净滴管吸取受检者血球悬液，分别向标明抗A和抗B的两个圆凹中各滴一滴（滴管末端不得触及标准血清），分别用牙签迅速搅拌使血球混悬，室温下静置10～15分钟。4）用干净滴管吸取受检者血球悬液，分别向标明抗A和抗B的两个圆凹中各滴一滴（滴管末端不得触及标准血清），分别用牙签迅速搅拌使血球混悬，室温下静置10～15分钟。 5）混悬的血球若逐渐由混浊变为透明，且出现了大小不等的红色颗粒，表明红细胞已凝集。如仍为淡红色混浊，不出现颗粒，则为无凝集现象。有时因比重不同血球下沉，貌似凝集，但只要稍加摇动，样本又恢复混浊状态，这种情况则不是真正的凝集。如果分辨有困难，可在低倍显微镜下观察（有时也可用生理盐水代替标准血清作对照）。 6）血型的判定：根据血型检验结果判定表确定血型。

8. 7）将本实验室全体同学的血型检查结果填入下表。7）将本实验室全体同学的血型检查结果填入下表。

9. 注意事项 1、进行PTC尝味，三种浓度溶液的顺序一定从低到高，不可颠倒！ 2、进行血型检测时，带血滴管的末端绝对不得触及标准血清！ 3、血型检测态度一定要严肃认真，一丝不苟，当检测结果不能确定时，必须重做。

10. 实验结果 1、计算PTC尝味和ABO血型的基因型频率和基因频率。 2、根据PTC尝味实验的结果，理解不完全显性遗传的特点。 3、掌握ABO血型系统的原理、检测方法、结果分析和血型判定。 4、理解ABO血型系统的配型原则及临床应用意义。