دانشگاه آزاد اسلامي واحد كرج

1. دانشگاه آزاد اسلامي واحد كرج

3. پایان نامه های دكتري حرفه اي

4. گروه : علوم پزشكي

5. رشته تحصيلي : دامپزشكي

6. تشخيص و شناسايي عفونت تک ياخته اي توکسوپلاسما گوانداي با استفاده از روشهاي مولکولي و بيواسي

7. نام و نام خانوادگي دانشجو : عليرضا ايماني ، شماره دانشجويي : 79151282811

8. به راهنمايي :غلامرضا حبيبي • چكيده: • توكسوپلاسما گوانداي انگلي تك ياخته مي باشد كه قادر است در طيف مختلفي از پستاندران ، پرندگان و انسان ايجاد آلودگي نمايد . عفونت با اين تك ياخته ممكن است باعث ايجاد سقط و يا ناهنجاري هاي مادرزادي در جنين گوسفند و بز گردد . روشهاي مختلفي جهت تشخيص عفونت تا توكسوپلاسما گونداي وجود دارند كه عبارتند از : روشهاي سرولوژي ، ايمونوهيستوشيمي ، هيستوپاتولوژي ، واكنش زنجيره اي آنزيم پليمراز ( PCR ) و بيواسي ، در اين پژوهش به مقايسه روشهاي nested-PCR و بيواسي جهت تشخيص و شناسايي عفونت با تك ياخته توكسوپلاسما گوانداي در موش هاي آزمايشگاهي و محيط هاي كشت سلول پرداخته ايم . سويه ( RH ) توكسوپلاسما گوانداي به عنوان كنترل مثبت بر روي لاين سلول هاي ورو ( VERO ) كشت گرديد . همچنين اين تك ياخته به صورت داخل صفاقي به موشهاي آزمايشگاهي ن‍ژاد NMRI تقليح شدند و با كمك روشهاي ميكروسكوپي و nested-PCR مورد ارزيابي قرار گرفتند . هجده نمونه جنين سقط شده از استان قزوين جمع آوري گرديد . نمونه هاي مغز جنين توسط دستگاه هومورژنايزر ، هوموژن گرديد و بصورت داخل صفاقي ( IP ) به موش هاي نژاد NMRI تزريق شدند و اين آزمايش تا پاساژ سوم ادامه يافت . همچنين نمونه هاي بافت مغز با کمک آزمايش nested-PCR مورد بررسي قرار گرفت . کشت توکسو پلاسما گوانداي در محيط آزمايشگاهي بطور موفقيت آميز صورت گرفت . آلودگي تجربي در حيوان آزمايشگاهي ( موش نژاد NMRI ) انجام شد و توسط تکنيک هاي انگل شناسي و مولکولي مورد تاييد قرار گرفت . تکنيک PCR با استفاده از پرايمرهاي اختصاصي براي ژن B1 راه اندازي گرديد و همچنين حساسيت و ويژگي آزمايش nested-PCR تعيين گشت . دوازده نمونه از هجده نمونه مغز جنين هاي سقط شده در بررسي با روش nested-PCR آلودگي با توکسوپلاسما گوانداي را نشان دادند . هر چند بررسي هاي هيستوپاتولوژي بر روي مغز موش هاي پاساژ سوم حاکي از حضور کيست هاي بافتي بود ، اما اشکال انگلي از مايع صفاتي جدا نگرديد .