微孢子虫生物研究

1. 微孢子虫生物研究

2. 一、研究对象 • 1、 HM1：从我所原蚕区四龄迟眠蚕体中分离，蚕体继代繁殖后备用。 • 2、 HM2：从桑园昆虫幼虫体中分离，蚕体继代繁殖后备用。 • 3、生物实验所用蚕种：由我所原种繁育室提供。

3. 二、研究目的 • 通过生物实验，对目前我省发现的两种微孢子虫HM1和HM2进行病原性研究及HM1胚种传染性研究，为有效控制我省微粒子病的发生与蔓延提供一定的参考。

4. 三、研究方法 • (一)病原性研究： • 1、HM1和HM2对家蚕的致病性调查： 分别取HM1和HM2按105、106、107三种浓度分别涂抹桑叶，对蚕种三龄起蚕添食，12小时后正常饲育，每个浓度设三个重复区，每区30条蚕，以添食地下井水为空白对照，调查其对家蚕的感染情况和致病性，结果见表1。

5. 表1 不同来源微孢子对家蚕的致病

6. （二）胚种传染性研究 • 1、胚种传染性调查 • 取HM1感染家蚕后母蛾镜检有毒的蚕种（镜检视野孢子浓度为106-107 )与蚕卵补正检查有毒的蚕种若干蛾（孢子浓度为1粒左右/视野），正常催青孵化，以蛾区为单位，以无毒种为对照区，饲育用叶经0.35％有效氯漂白粉液浸消。各蛾区1－3龄每龄分别抽取1/4数量的蚕逐头进行镜检，剩余1/4继续饲养至母蛾镜检，结果见表2

7. 表2 胚种传染性调查

8. 2、胚种传染力调查： • HM1感染家蚕后，对病蛾蚕卵进行催青处理，然后进行单蛾卵圈补正检毒，共计抽检200个样，最终捡出带毒卵圈3个，病卵率为1.5％。

9. 四、实验结果及分析 • (一)、对HM1的实验结果分析 • 1、HM1感染家蚕三龄起蚕后不出现症状，可继续发育直到发蛾制种，蚕期与蛹期都检不到微孢子虫，但蛾期能检到微孢子，且随着添食孢子液浓度的增高，母蛾镜检毒率不断增大。 • 2、对HM1进行胚种传染性调查，结果发现： • ① 感染HM1的病蛾所制蚕种做补正检毒，其病卵率仅为1.5％； • ② 对病蛾所制蚕种进行隔离饲养，在安全的饲料及外部环境条件下，能正常发育，未见异常，且其继代母蛾微粒子孢子检出率为0；

10. ③ 饲养蚁蚕检出有毒的蚕种，能正常发育自至发蛾；在表2所列的三个蛾区中，只有一个蛾区在三龄迟眠蚕预检时能检出微孢子，其余都未检出，最终也只有该蛾区的母蛾镜检带毒，毒率为9.1％，视野中微粒子孢子浓度比预检时增多。 • 以上说明HM1的胚种传染性极低，若饲养母蛾带毒（ HM1）蚕种，都能正常发育，即使饲养胚种带毒（ HM1）的蚕种，也能正常发育直至发蛾。

11. (二)、对HM2实验结果分析 • 添食HM2 107后第10天，有的区即发现死蚕并能检出微孢子。总的趋势是，添食HM2的各区比添食HM1的各区同期平均死亡率高，且病死蚕、蛹及弱小蚕镜检100%带毒，母蛾镜检孢子密度偏大。这说明HM2对家蚕具有很强的感染力，对蚕种生产潜在危害性大。

12. 我所蚕种生产防微主要措施 • 一、严格质检 • 1、补正检查 • 2、预知检查 • 3、母蛾检毒 • 4、成品卵检验 • 二、严格隔离 • 1、环境隔离 • 2、出入生产区隔离

13. 三、消毒防病 • 1、生产前的消毒 • 2、生产过程中的消毒防病 • 3、生产结束后的消毒 • 四、桑叶消毒与添食防微灵