1 / 66

URINPROTEINFRAKTIONER

URINPROTEINFRAKTIONER. Sammanställning av jämförelse mellan elfores /biuret och immunkemi /totalprotein 1 april – 1 juni, 331 prover. Bakgrund.

helia
Download Presentation

URINPROTEINFRAKTIONER

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. URINPROTEINFRAKTIONER Sammanställning av jämförelse mellan elfores/biuret ochimmunkemi/totalprotein 1 april – 1 juni, 331 prover

  2. Bakgrund • I Falun bedöms storleken på Bence Jones/Urin-M-komponenter med hjälp av visuell uppskattning av bandet på en vanlig elektrofores tillsammans med koncentrationsbestämning av U-Albumin och relativt manuell mätning av U-totalprotein (biuretmetoden). • Med biuret kan man mäta protein från 200 mg/L och uppåt.

  3. Bakgrund…i kappsäckenManuell metod vs Immunkemi

  4. Hålla rätt fokus Vi får inte glömma av varför vi håller på med elforeser. Det är för patienternas skull!

  5. Man född 1929 • Bor hemma utan hemtjänst. Vårdar och tar om hand om sin dementa hustru. • Normocytär anemi, mild trombocytopeni, kreatininökning, trög mage, eventuellt svart avföring, ont i ett revben • M-komponent i PLASMA, IgG 25 g/L

  6. Man född 1929 • Bor hemma utan hemtjänst. Vårdar och tar om hand om sin dementa hustru. • Normocytär anemi, mild trombocytopeni, kreatininökning, trög mage, eventuellt svart avföring, ont i ett revben • M-komponent i PLASMA, IgG 25 g/L • Efter ett par dagar urinelfores…10,9 g/L lambdakedjor. • Inga skelettdestruktioner

  7. Velcade dexametason Velcade dexametason MP-kur

  8. Teori för projektet • Urinelektroforesesanalysen kan tas bort eftersom urin-M-komponenter (Bence Jones)kan upptäckas och följas upp med mätning av U-Kappa, U-Lambda samt kvoten mellan dessa. • Den manuella biuretmetoden (totalprotein) kan läggas ner för storleksuppskattningen av Bence Jones • Eventuellt måste man mäta U-totalprotein för att upptäcka fall av hookeffekt, men detta U-protein kan mätas på kemiinstrument.

  9. Teoretiska vinster med metodbytet • Inga U-elforeser, endast U-immunfixation • Bence Jones kan beräknas automatiskt i det datoriserade beslutstödet, dvs tolkningen av U-Proteinfraktioner blir automatisk. • Bättre standardisering av Bence Jones-mätningen.

  10. Teoretiska förutsättningar • U-Kappa och U-Lambda mäter endast ner till 10 mg/L. • Kappa/Lambda-kvoten hos friska är mellan 1 och 3. • Reagenserna för immunkemimätningarna är relativt dyra. Immunfixation är relativt dyrt. • Ett eventuellt byte från U-elforeser till immunkemimätningar måste kunna fungera logistiskt och rationellt (en annan sektion på Kemlab i Falun utför proteinanalyserna).

  11. Den manuella biuretmetoden fungerar lika bra som de på kemiinstrumentet

  12. U-Protein fungerar utmärkt för att uppskatta proteinuri

  13. Slutsats 1 • U-totalproteinmetoden fungerar utmärkt på kemiinstrumentet

  14. 6 st M-komp har 1,0 i kappa/lambda-kvot 2/6 av dessa syns ”tydligt” på elforesen. 5 st M-komp har mellan 1-3 i kvot 3/5 syns ”tydligt” på elforesen

  15. Slutsats 2 • Kappa/Lambda-kvot mellan 1 och 3, som enda sållningsmekanism, ger för dålig känslighet.

  16. Men..

  17. Mätning av kappa och lambda ger en bra uppskattning av M-komponentens storlek

  18. Slutsats 3 • Kappa och Lambda fungerar utmärkt på att följa upp M-komponenter med.

  19. Uppdaterad teori • Genom att kombinera kappa/lambda-kvoten med de uppmätta koncentrationerna av kappa resp. lambda samt U-totalprotein kan man finna beslutsgränser för när man skall göra immunfixation. • ”Onödiga” immunfixationer bör minimeras. • ”M-komponenten kan endast anas” kanske är onödigt noggrant.

  20. Begrepp som förekommer • Restprotein • U-totalprotein minus U-Albumin • Bence Jones gammal • Enligt nuvarande metod, i mg • ”5or” ( 5 mg/L) är sådana M-komponenter som på plattan ”endast kan anas”/”spår av M-komponent”

  21. Begrepp som förekommer • Falskt negativa • De som har normal K/L-kvot, kedjor (K eller L) och restprotein, men som eg är patologiska (enl Bence Jones gammal) • Sant negativa • De som har normal K/L-kvot, kedjor (K eller L) och restprotein, och som är friska (enl Bence Jones gammal)

  22. Begrepp som förekommer • Sant positiva • De som faller utanför normalgränserna på en eller flera av K/L-kvot, kedjor, restprotein och som är patologiska (enl Bence Jones gammal) • Falskt positiva • De som faller utanför normalgränserna på en eller flera av K/L-kvot, kedjor, restprotein men som eg är friska (enl Bence Jones gammal)

  23. Normalgränser:K/L-kvot 1-3Kedjor (K eller L) <20Restprotein <70 Normalgränser (ändrad restproteingräns):K/L-kvot 1-3Kedjor (K eller L) <20Restprotein <75 Sensitivitet B/(A+B) 98 % Specificitet C/(C+D) 54 % Sensitivitet B/(A+B) 98 % Specificitet C/(C+D) 56 % Sensitivitet B/(A+B) 99 % Specificitet C/(C+D) 51 % Sensitivitet B/(A+B) 99 % Specificitet C/(C+D) 53 %

  24. Normalgränser (ändrad restproteingräns):K/L-kvot 1-3Kedjor (K eller L) <20Restprotein <75 Normalgränser:K/L-kvot 1-3Kedjor (K eller L) <20Restprotein <70 Sensitivitet B/(A+B) 98 % Specificitet C/(C+D) 54 % Sensitivitet B/(A+B) 98 % Specificitet C/(C+D) 56 % Sensitivitet B/(A+B) 99 % Specificitet C/(C+D) 51 % Sensitivitet B/(A+B) 99 % Specificitet C/(C+D) 53 %

  25. Normalgränser:K/L-kvot 1-3Kedjor (K eller L) <20Restprotein <70 Normalgränser (ändrad restproteingräns):K/L-kvot 1-3Kedjor (K eller L) <20Restprotein <75 Sensitivitet B/(A+B) 98 % Specificitet C/(C+D) 54 % Sensitivitet B/(A+B) 98 % Specificitet C/(C+D) 56 % Sensitivitet B/(A+B) 99 % Specificitet C/(C+D) 51 % Sensitivitet B/(A+B) 99 % Specificitet C/(C+D) 53 %

  26. Normalgränser:K/L-kvot 1-3Kedjor (K eller L) <20Restprotein <70 Normalgränser (ändrad restproteingräns):K/L-kvot 1-3Kedjor (K eller L) <20Restprotein <75 Sensitivitet B/(A+B) 98 % Specificitet C/(C+D) 54 % Sensitivitet B/(A+B) 98 % Specificitet C/(C+D) 56 % Sensitivitet B/(A+B) 99 % Specificitet C/(C+D) 51 % Sensitivitet B/(A+B) 99 % Specificitet C/(C+D) 53 %

  27. 109 respektive 113 av 331 patienter blev ”falskt positva”, dvs att ungefär 30 % av alla U-elforeser skulle immunfixas om vi använde dessa sållningsregler. • Det skulle innebära 660 immunfixar om året. • Med vår nuvarande rutin gjordes 16 immunfixar på urin under projekttiden.

  28. Så…… • Slutsats 4: Totalprotein kan inte användas i screening efter M-komponent. • Slutsats 5: Något måste göras åt kappa/lambda-kvoten

  29. RESTPROTEIN BORTRÄKNATNormalgränser (ändrad kvot-gräns):K/L-kvot 1-1,75Kedjor (K eller L) <20 RESTPROTEIN BORTRÄKNATNormalgränser:K/L-kvot 1-3Kedjor (K eller L) <20 Sensitivitet B/(A+B) 92 % Specificitet C/(C+D) 79 % Sensitivitet B/(A+B) 89 % Specificitet C/(C+D) 81 % Sensitivitet B/(A+B) 97 % Specificitet C/(C+D) 78 % Sensitivitet B/(A+B) 94 % Specificitet C/(C+D) 79 %

  30. RESTPROTEIN BORTRÄKNATNormalgränser (ändrad kvot-gräns):K/L-kvot 1-1,75Kedjor (K eller L) <20 RESTPROTEIN BORTRÄKNATNormalgränser:K/L-kvot 1-3Kedjor (K eller L) <20 Sensitivitet B/(A+B) 92 % Specificitet C/(C+D) 79 % Sensitivitet B/(A+B) 89 % Specificitet C/(C+D) 81 % Sensitivitet B/(A+B) 97 % Specificitet C/(C+D) 78 % Sensitivitet B/(A+B) 94 % Specificitet C/(C+D) 79 %

  31. RESTPROTEIN BORTRÄKNATNormalgränser (ändrad kvot-gräns):K/L-kvot 1-1,75Kedjor (K eller L) <20 RESTPROTEIN BORTRÄKNATNormalgränser:K/L-kvot 1-3Kedjor (K eller L) <20 Sensitivitet B/(A+B) 92 % Specificitet C/(C+D) 79 % Sensitivitet B/(A+B) 89 % Specificitet C/(C+D) 81 % Sensitivitet B/(A+B) 97 % Specificitet C/(C+D) 78 % Sensitivitet B/(A+B) 94 % Specificitet C/(C+D) 79 %

  32. RESTPROTEIN BORTRÄKNATNormalgränser (ändrad kvot-gräns):K/L-kvot 1-1,75Kedjor (K eller L) <20 RESTPROTEIN BORTRÄKNATNormalgränser:K/L-kvot 1-3Kedjor (K eller L) <20 Sensitivitet B/(A+B) 92 % Specificitet C/(C+D) 79 % Sensitivitet B/(A+B) 89 % Specificitet C/(C+D) 81 % Sensitivitet B/(A+B) 97 % Specificitet C/(C+D) 78 % Sensitivitet B/(A+B) 94 % Specificitet C/(C+D) 79 %

  33. Hur ser elforeserna man missar med kappa/lambda ut?

  34. Man f. -34, lambda • U-Alb 126 mg/L • U-protein 231 mg/L • U-kappa <10 • U-lambda <10 • U-kappa/lambda: går ej att beräkna, alt 1,0 • U-Kreatinin 10 589

  35. Man f. -34, lambda

  36. <10 U-Alb 126 mg/L

  37. Man f. -31, lambda • U-Alb 96 mg/L • U-protein 204 mg/L • U-kappa 17,7 • U-lambda <10 • U-kappa/lambda: går ej att beräkna, alt 1,77 • U-Kreatinin 10 990

  38. Man f. -31, lambda

  39. <10 U-Alb 96 mg/L

  40. Man f. -32 • U-Alb 8 mg/L • U-protein <68 mg/L • U-kappa <10 • U-lambda <10 • U-kappa/lambda: går ej att beräkna, alt 1,0 • U-Kreatinin 4 764

  41. Man f. -32

  42. <10 U-Alb 8 mg/L

  43. Slutsats 6: • Vi ser små M-komponenter i urinen som inte når upp till detektionsgränsen, 10 mg/L, vid immunkemimätningen.

  44. Kan man modifiera ”ingen M-komponent”? M-komponent/Bence Jones < 10 mg/L Ingen signifikant M-komponent/Bence Jones Ingen M-komponent (immunfixation utförd)

  45. Möjliga lösningar • Screening efter Bence Jones med U-elfores, efterbeställning av immunkemi (och immunfix vid nyupptäckta). • Screening med immunkemi och efterbeställning av immunfixation (ca 350 st per år i Falun). • ”Screening” efter Bence Jones med hjälp av tidigare elforeser på samma patient.

  46. Hur många av 331 var uppföljningspatienter? 8 st på två månader är nyupptäckta Urin-M-komponenter/Bence Jones.

  47. Alla de tre små M-komponenterna i urinen där vi mätte < 10 mg/L hade M-komponent i plasma också.

  48. Slutsats 7: Om vi immunfixerar urinen på alla nyupptäckta M-komponenter i plasma missar vi inte någon Bence Jones på dessa patienter Redan idag immunfixerar vi ju plasman på alla som har nyupptäckt Bence Jones i urinen..

  49. Sammanfattning • Screening med U-kappa och U-lambda duger gott för att hitta och är bra på att följa Bence Jones proteinuri. • Förutsättningen för att få tillräcklig känslighet är dels att man hittar en lämplig cut-off för K/L-kvoten samt att man även gör immunfix på de patienter som har stor risk att ha Bence Jones, t ex de med M-komponent i plasma.

  50. Amyloidos.. • Alltid immunfix? • Fria lätta kedjor i serum?

More Related