第二节棒状杆菌属 -- 白喉棒状杆菌

第二节棒状杆菌属--白喉棒状杆菌 （Corynebacterium diphtheriae）

一、生物学性状 1. 形态与染色 (1)革兰染色阳性 (2)菌体粗细不一,常一端或两端膨大呈棒状, 排列不规则,呈栅栏状, 无荚膜,无鞭毛,无芽胞。

※（3）异染颗粒 美蓝短时间染色菌体着色不均匀,出现深染颗粒。用 Neisser 或Albert 等法染色 ,这些颗粒与菌体着色不同,称异染颗粒,可用于鉴定。

2. 培养特性 在普通培养基虽能生长,但菌体形态不典型。接种吕氏血清斜面培养基可长出灰白色小菌落； ※在0.03%-0.04%亚碲酸钾血琼脂平板上生长时, 因能利用碲盐并使其还原成为金属碲,故形成黑色菌落,具有鉴别意义。

二、致病性及免疫性 ( 一 ) 致病物质 1．白喉外毒素 (diphtherotoxin) 2. 索状因子 3. K 抗原

※ 1．白喉外毒素 (diphtherotoxin) 白喉棒状杆菌的主要致病物质是白喉外毒素，有A和B两个亚单位： B 亚单位--能与宿主靶细胞表面的特异受体结合,介导 A 亚单位进入靶细胞。

A 亚单位--具有毒性,能抑制靶细胞蛋白质的合成;白喉外毒素 A 片段进入细胞后 , 使延伸因子 2 (EF-2) 失活 , 抑制氨基酸转移至肽链,阻断宿主细胞蛋白质的合成,从而引起组织坏死和病变。

白喉毒素具有强烈的细胞毒作用,能抑制细胞蛋白质的合成,从而破坏细胞的正常生理功能,引起组织细胞的变性、坏死。白喉毒素具有强烈的细胞毒作用,能抑制细胞蛋白质的合成,从而破坏细胞的正常生理功能,引起组织细胞的变性、坏死。

β棒状杆菌噬菌体白喉棒状杆菌───→ 获得白喉毒素

免疫毒素 tumor Ab DT

2.索状因子 细菌表面的一种毒性糖脂, 能破坏细胞的线粒体,影响细胞的呼吸与磷酸化。

3.K 抗原 （1）细胞壁外面的一种不耐热糖蛋白 ,具有抗吞噬的作用。（2）有利于细菌在粘膜表面定植。

( 二 ) 所致疾病 白喉随飞沫经呼吸道侵入机体或污染物品直接接触传播。

局部由于细菌和外毒素的作用,粘膜上皮细胞产生炎性渗出与坏死。渗出物中纤维蛋白将炎性细胞、粘膜坏死组织和白喉棒状杆菌凝固在一起,形成灰白色点状或片状假膜(pseudomembrane), 假膜与粘膜下组织粘连,不易拭去。咽、喉和气管粘膜水肿及假膜脱落,可引起呼吸道阻塞,甚至窒息死亡。

所致疾病：白喉 局部细菌和毒素的作用鼻咽喉气管飞沫、污染物品白喉棒状杆菌灰白色假膜（鼻咽腔） 2-7天潜伏期外毒素入血粘膜水肿及假膜脱落，引起呼吸道阻塞，甚至窒息死亡。毒血症心肌肾上腺外周神经肝软腭麻痹声嘶心肌炎内脏出血肾上腺功能障碍

白喉假膜

( 三 ) 免疫性 白喉病后可获牢固体液免疫,主要是抗毒素中和外毒素。抗毒素可阻止B片段与敏感细胞结合,使A片段不能进入细胞。

锡克试验 (Schick test) • 原理：毒素抗毒素中和反应 • 结果：有红肿阳性反应无免疫力无红肿阴性反应有免疫力 • 应用：检查机体对白喉的免疫力

三、微生物学检查法 • 标本 • 直接涂片镜检—形态，异染颗粒， • 分离培养--吕氏血清斜面，亚碲酸钾血琼脂平板 • 毒力鉴定

四、防治原则 （一）预防 1.人工主动免疫注射白喉类毒素。目前国内应用白喉类毒素、百日咳菌苗、破伤风类毒素的混合制剂 (DPT 混合疫苗，又称白百破三联疫苗) 。

2.人工被动免疫 与白喉病人密切接触的易感儿童应肌肉注射白喉抗毒素进行紧急预防。

（二）治疗 1.抗生素的应用青霉素、红霉素,不仅能抑制白喉棒状杆菌的感染，也能预防恢复期带菌者的出现。

2.抗毒素 应尽早注射足量白喉抗毒素, 注射前作皮肤试验，阳性者进行脱敏治疗。

第三节嗜肺军团菌 （Legionella pneumophila）

一、生物学性状 1.G-杆菌, 有鞭毛 , 有菌毛 ,有微荚膜，无芽胞。

2.专性需氧 ※BCYE ( buffered charcoal-yeast extract) 培养基— 含缓冲活性炭酵母浸出液 ,加上铁、 L -半胱氨酸和α-酮戊二酸。

在BCYE培养基中加入 0.01 % 溴甲酚紫和 0.001% 溴酚蓝,可以鉴定军团菌科的细菌 ,在这种培养基上生长的嗜肺军团菌菌落平坦,呈浅绿色,非典型军团菌的菌落呈亮绿色。

二、致病性 引起军团病夏秋季流行主要通过呼吸道吸入带菌飞沫、气溶胶污染的尘埃而感染。

临床类型 1.流感型表现为发热 , 全身不适 ,头痛及肌肉疼痛等 ,预后良好 ; 2.肺炎型发病急 ,寒战高热、咳嗽、胸痛、出现以肺部感染为主的多器官损伤,最后发展为呼吸衰竭 ;

3.肺外感染型 继发性感染引起菌血症

三、防治原则 无有效的预防方法,无可用的军团菌疫苗。预防措施中，特别强调水源管理,加强室内空调系统和饮水系统的卫生管理, 加强对人工管道系统的消毒处理。

治疗 首选红霉素,对治疗反应迟缓的患者可合用利福平等其他药物。军团菌病、肺炎支原体肺炎、肺炎衣原体肺炎、沙眼衣原体结膜炎、厌氧菌所致口腔感染、空肠弯曲菌肠炎、百日咳等。适应症：

第四节百日咳鲍特菌 (Bordetellapertussis)

1.生物学性状 革兰染色阴性短小杆菌,两端浓染单个或成对、短链排列光滑型菌株有荚膜无芽胞

专性需氧 营养要求较高 , 血琼脂和巧克力色琼脂平板上均不能生长

※ 鲍-金 ( Bordet-Gengou, B-G) 培养基，内含血液、甘油和马铃薯。菌落特征：3-5天，形成细小、光滑、隆起、有珠光色泽的菌落，周围有不明显的溶血环。

Ⅰ相菌有毒力，新分离的菌株有荚膜和菌毛，为光滑型,称为Ⅰ相菌。Ⅰ相菌有毒力，新分离的菌株有荚膜和菌毛，为光滑型,称为Ⅰ相菌。传代培养后能发生变异 Ⅱ相、Ⅲ相为过渡相 Ⅳ相为粗糙型菌落的无毒株。

2. 致病性 （1）致病物质致病物质有荚膜、菌毛、内毒素以及一些生物学活性物质。

本菌的生物活性物质有 : ①百日咳毒素 ( pertussistoxin) 系外毒素, 与附着纤毛上皮和阵发性咳嗽有关。 ②腺苷酸环化酶毒素 (adenylate cyclase toxin) 催化真核细胞内 ATP 转化为 cAMP, 抑制白细胞的趋化,吞噬及杀伤作用;抑制巨噬细胞的氧化活性,抑制 NK 细胞的杀细胞作用。

③气管细胞毒素 (tracheal cytotoxin)对气管纤毛上皮细胞有特殊亲和力,低浓度抑制纤毛的活动,高浓度使其坏死。 ④丝状红细胞凝集毒素 (filamentous hemoagglutinin) 具有促进细菌对纤毛上皮细胞粘附的作用。

（2）所致疾病 • 传染源--患者或带菌者。 • 传播途径--主要经飞沫传播。病原菌经呼吸道进入易感儿童体内,粘附于呼吸道纤毛上皮细胞,产生活性致病物质引起的百日咳病。

病程 • ①卡他期类似普通感冒,症状主要是微热、轻度咳嗽等。此期传染性强,随飞沫排出大量细菌。 • ②痉咳期阵发性痉挛性咳嗽伴有特殊的高音调鸡鸣样吼声,呼吸道有大量粘稠分泌物,排出困难。 • ③恢复期咳嗽逐渐减轻,鸡鸣音消失。

3.免疫性 愈后及接种疫苗均可获持久且较强的免疫力 , 再次感染本菌的病例少见。

4.微生物学检查法 取鼻咽拭子或咳碟法接种鲍-金培养基，菌落特征：3-5天，形成细小、光滑、隆起、有珠光色泽的菌落，周围有不明显的溶血环。取可疑菌落做染色镜检、生化反应、荧光抗体检查等。

5.防治原则 • 我国使用“白百破”三联疫苗 (DPT) 对儿童主动免疫效果好。 “白百破” 三联疫苗系选用 I 相百日咳鲍特菌死疫苗与精制白喉类毒素,精制破伤风类毒素混合。 • 治疗首选红霉素、氨苄青霉素等。

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