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请选择内容. 第一节 高效液相色谱绪论 第二节 高效液相色谱法的特点与仪器 第三节 影响分离的因素与操作条件选择 第四节 色谱定性和定量的方法. 复习. 色谱法的分类. 复　习. 柱色谱法 （柱层析） 纸色谱法 （纸层析） 薄层色谱法 （薄板层析） 高效液相色谱法（本次学） 气相色谱法（预）. 液相色谱. 气相色谱. 返回目录. 第一节 高效液相色谱绪论. 一、 色谱法的历史与展望 二、 什么是高效液相色谱 三、 高效液相色谱分类 四、 高效液相色谱的应用. 一、历史： 30 年代 茨维特分离绿叶色素 ( Tswett 实验 )

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Presentation Transcript

  1. 请选择内容 第一节 高效液相色谱绪论 第二节高效液相色谱法的特点与仪器 第三节影响分离的因素与操作条件选择 第四节色谱定性和定量的方法 复习 广东化工制药职业技术学院化妆品系　高瑞英

  2. 色谱法的分类 广东化工制药职业技术学院化妆品系　高瑞英

  3. 复　习 • 柱色谱法（柱层析） • 纸色谱法（纸层析） • 薄层色谱法（薄板层析） • 高效液相色谱法（本次学） • 气相色谱法（预） 液相色谱 气相色谱 返回目录 广东化工制药职业技术学院化妆品系　高瑞英

  4. 第一节 高效液相色谱绪论 一、色谱法的历史与展望 二、什么是高效液相色谱 三、高效液相色谱分类 四、高效液相色谱的应用 广东化工制药职业技术学院化妆品系　高瑞英

  5. 一、历史： 30年代 茨维特分离绿叶色素(Tswett实验) 40年代 TLC，纸色谱 50年代 GC出现使色谱具备分离和在线分析功能 60年代末 HPLC出现，使色谱分析范围进一步扩大 二、展望： 1．新型固定相和检测器 2．联用仪器：GC-MS，HPLC-MS 3．智能化发展 一、色谱法的历史与展望 广东化工制药职业技术学院化妆品系　高瑞英

  6. 色谱法简介(复习) 广东化工制药职业技术学院化妆品系　高瑞英

  7. 色谱法溯源(复习) Tswett实验 广东化工制药职业技术学院化妆品系　高瑞英

  8. 茨维特的实验（图示） 下页观看动画 广东化工制药职业技术学院化妆品系　高瑞英

  9. 色谱三要素： • 固定相； • 流动相； • 待分离物质。 Tswett实验 广东化工制药职业技术学院化妆品系　高瑞英

  10. 经典液相色谱法(复习) 柱层析 返回 广东化工制药职业技术学院化妆品系　高瑞英

  11. 二、什么是HPLC 返回 广东化工制药职业技术学院化妆品系　高瑞英

  12. 三、高效液相色谱法的应用 1、在生物化学和生物工程中的应用 2、在药物质量检验中的应用 3、食品分析 4、环境分析 5、精细化工 广东化工制药职业技术学院化妆品系　高瑞英

  13. 第二节高效液相色谱的特点与仪器 • 一、高效液相色谱仪 • 二、高效液相色谱法的特点 • 三、流程及主要部件 广东化工制药职业技术学院化妆品系　高瑞英

  14. HPLC常见机型 • Waters LC-600 • Waters LC-2690 • 岛津LC－10A • HP1050 • Agilent 1100系列 广东化工制药职业技术学院化妆品系　高瑞英

  15. 液相色谱仪（1） 广东化工制药职业技术学院化妆品系　高瑞英

  16. 液相色谱仪(2) 广东化工制药职业技术学院化妆品系　高瑞英

  17. 液相色谱仪（3） 广东化工制药职业技术学院化妆品系　高瑞英

  18. 液相色谱仪（4） 广东化工制药职业技术学院化妆品系　高瑞英

  19. 液相色谱仪（5） Agilent 1100系列 返回目录 广东化工制药职业技术学院化妆品系　高瑞英

  20. 二、高效液相色谱法的特点 特点：高压、高效、高速 高沸点、热不稳定有机及生化试样的高效分离分析方法。 二者比较 广东化工制药职业技术学院化妆品系　高瑞英

  21. 色谱法的特点 灵敏度好 分析速度快 应用范围广 分离效率高 Success factors 优点 不足： 被分离组分的定性较为困难。 Back 广东化工制药职业技术学院化妆品系　高瑞英

  22. 主要区别：固定相差别，输液设备和检测手段 1．经典LC：仅做为一种分离手段 柱内径1~3cm，固定相粒径>100μm 且不均匀 常压输送流动相 柱效低（H↑，n↓） 分析周期长 无法在线检测 2．HPLC：分离和分析 柱内径2~6mm，固定相粒径<10μm（球形，匀浆装柱） 高压输送流动相 柱效高（H↓，n↑） 分析时间大大缩短 可以在线检测 HPLC与经典LC区别 广东化工制药职业技术学院化妆品系　高瑞英

  23. 相同：兼具分离和分析功能，均可以在线检测 主要差别：分析对象的差别和流动相的差别 1.分析对象： GC：能气化、热稳定性好、且沸点较低的样品，高沸点、挥发性差、热稳定性差、离子型及高聚物的样品不可检测， 占有机物的20% HPLC：溶解后能制成溶液的样品，不受样品挥发性和热稳定性的限制，分子量大、难气化、热稳定性差及高分子 和离子型样品均可检测，用途广泛，占有机物的80%。 2.操作条件： GC：加温操作 HPLC：室温；高压（液体粘度大，峰展宽小） 3.流动相 HPLC与GC差别 广东化工制药职业技术学院化妆品系　高瑞英

  24. 高效液相色谱法与其他分离方法的比较 高效液相色谱法与其他分离方法的比较 广东化工制药职业技术学院化妆品系　高瑞英

  25. 1.流程 三、流程及主要部件 2.主要部件 广东化工制药职业技术学院化妆品系　高瑞英

  26. 1.流　程 广东化工制药职业技术学院化妆品系　高瑞英

  27. 高效液相色谱简单动画 广东化工制药职业技术学院化妆品系　高瑞英

  28. 广东化工制药职业技术学院化妆品系　高瑞英

  29. 典型的仪器配置 Back 广东化工制药职业技术学院化妆品系　高瑞英

  30. 归纳HPLC的组成 输液系统 进样系统 数据处理 色谱柱 检测系统 广东化工制药职业技术学院化妆品系　高瑞英

  31. 2.HPLC的主要部件 • 1.泵 • 2.梯度淋洗装置 • 3.进样装置 • 4.色谱柱 • 5.检测器 • 6.数据处理 下一节 广东化工制药职业技术学院化妆品系　高瑞英

  32. Aglient1100 HPLC 结构图 广东化工制药职业技术学院化妆品系　高瑞英

  33. 2.主要部件 • 高效分离柱 • 各种色谱柱 • 填充柱与毛细管柱的比较 • 填充柱的填装 • 机械振动产生空隙 • 高压输液泵 • 单活塞往复泵 • 隔膜型往复泵 • 双活塞往复泵 • 梯度淋洗装置 • 高压梯度 • 低压梯度 • 进样装置 • 六通阀进样器 • 正确进样方式 • 自动进样器 广东化工制药职业技术学院化妆品系　高瑞英

  34. （1）高压输液泵 广东化工制药职业技术学院化妆品系　高瑞英

  35. （1）高压输液泵 • 单活塞往复泵 • 隔膜型单活塞往复泵 • 双活塞往复泵 （见液相色谱真机演示） 广东化工制药职业技术学院化妆品系　高瑞英

  36. 单活塞往复泵结构示意（动画） 广东化工制药职业技术学院化妆品系　高瑞英

  37. 下一页

  38. 隔膜型往复泵的结构（动画） 广东化工制药职业技术学院化妆品系　高瑞英

  39. 双活塞往复泵的构造（图示） 返回目录 广东化工制药职业技术学院化妆品系　高瑞英

  40. (2)梯度淋洗装置 广东化工制药职业技术学院化妆品系　高瑞英

  41. (2)梯度淋洗装置 如不用梯度，分离效果不理想 广东化工制药职业技术学院化妆品系　高瑞英

  42. 如不用梯度：分离不理想 返回目录 广东化工制药职业技术学院化妆品系　高瑞英

  43. (3) 进样装置 广东化工制药职业技术学院化妆品系　高瑞英

  44. 六通阀进样器 通常使用耐高压的六通阀进样装置，如图所示： 广东化工制药职业技术学院化妆品系　高瑞英

  45. 六通阀进样原理 转动手柄 （见液相色谱真机演示） 广东化工制药职业技术学院化妆品系　高瑞英

  46. 六通阀的使用原理（动画） 广东化工制药职业技术学院化妆品系　高瑞英

  47. 正确的手动进样方式 广东化工制药职业技术学院化妆品系　高瑞英

  48. 手动进样器 广东化工制药职业技术学院化妆品系　高瑞英

  49. 手动进样器结构 广东化工制药职业技术学院化妆品系　高瑞英

  50. 自动进样器 广东化工制药职业技术学院化妆品系　高瑞英

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