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奈瑟菌属

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奈瑟菌属

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  1. 奈瑟菌属 • 共同点: • 革兰阴性球菌、单个或成双排列、无芽孢、无鞭毛、有菌毛 触酶试验(+) 氧化酶试验(+) • 种类:脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌等9种 • 致病菌:脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌

  2. 脑膜炎奈瑟菌 • 是引起流行性脑脊髓膜炎的病原菌

  3. 脑膜炎奈瑟菌电镜图

  4. 形态染色 • 革兰阴性、肾形、成双排列 • 新分离菌株有菌毛和荚膜 • 在患者脑脊液中位于中性粒细胞内

  5. 培养特性--生长条件 • 营养要求高、在血液、血清培养基中才能生长 • 专性需氧、初次分离需5%CO2 • 最适温度35℃,<30℃或>40℃不生长 • 可产生自溶酶

  6. 常用培养基及生长现象 • 巧克力色血平板:属营养培养基,菌落无色、光滑湿润、边缘整齐、有光泽,似露水珠,易乳化 • 卵黄双抗平板(EPV):属选择平板,用于含杂菌的鼻咽拭标本的分离培养,菌落无色、光滑湿润、较大、扁平

  7. 生化反应 • 氧化酶试验阳性 • 分解葡萄糖、麦芽糖、不分解蔗糖

  8. 抗原构造与分型 • 菌体抗原 无特异性 • 核蛋白抗原 无特异性,与细菌毒力有关 • 表面荚膜多糖抗原 具有群特异性 根据此抗原,将该菌分为13个血清群 我国以A群为主,占95%,

  9. 抵抗力 • 抵抗力弱 • 对寒冷、湿热、干燥、消毒剂、紫外线均敏感 • 能产生自溶酶

  10. 临床意义 • 传染源:病人、带菌者 • 传染途径:呼吸道飞沫传染 • 致病物质:内毒素、荚膜、菌毛 • 所致疾病:流行性脑脊髓膜炎 • 临床表现:上呼吸道症状:鼻咽炎等全身感染症状:高热、出血点或瘀血点 脑膜炎症状:头痛、呕吐、颈项强直 • 特异性预防:接种脑膜炎奈瑟菌荚膜多糖疫苗

  11. 微生物检验

  12. 标本采集 • 流脑病人:血液、脑脊液、瘀血点 • 带菌者检查:鼻咽拭

  13. 血液 脑脊液、瘀血点 鼻咽拭子 分离培养 (卵黄双抗平板) 直接涂片染色 增菌培养 分离培养 (巧克力色平板) 初步报告 可疑菌落、盐水自凝 自凝、色素 无自凝 报告阴性 血清学分群 涂片染色 生化反应 生长特性

  14. 直接涂片镜检 • 脑脊液沉淀物、瘀血点涂片革兰染色镜检: 若发现中性粒细胞内、外有革兰阴性双球菌、呈肾形,可作初步诊断

  15. 培养检查 • 增菌培养:血液、脑脊液接种增菌液,5%CO2培养。 • 分离培养:将增菌培养物转种巧克力色平板,置5%CO2环境,35℃培养18~24小时 • 可疑菌落:观察菌落特征,取可疑菌落涂片染色镜检,作盐水自凝试验,盐水中无自凝。

  16. 鉴定试验 • 形态染色:革兰阴性、肾形、成双排列 • 氧化酶(+) • 触酶(+) • 糖代谢试验:发酵葡萄糖、麦芽糖 • 生长特性试验:生长温度、营养需求 • 血清学鉴定与分群:可与相应诊断血清发生凝集

  17. 快速鉴定试验 • 荧光抗体法 荧光素-流脑抗体 +待检物--荧光 (直接法) 流脑抗体 +待检物 +羊抗兔荧光抗体--荧光 (间接法) • 间接血凝试验 流脑多糖抗原致敏红细胞 +待检血清 • 反向血凝试验 流脑抗体致敏红细胞 +标本中可溶性流脑抗原

  18. 鉴定依据 • 形态染色:革兰阴性球菌成双排列 • 菌落典型:光滑型,易乳化,盐水中无自凝 • 生化反应: • 氧化酶+、触酶- • 发酵葡萄糖、麦芽糖 • 生长条件:普通培养基不生长、 • 血清学:与相应分群血清凝集

  19. 与卡他布兰汉菌鉴别 • 形态与奈瑟菌相似 • 18~24℃环境能生长 • 普通培养基中可以生长 • 具有DNA酶

  20. 淋病奈瑟菌

  21. 形态染色 • 革兰阴性肾形、成双排列 • 有荚膜、菌毛 • 淋球菌多侵犯尿道粘膜,急性期常位于中性粒细胞内,急性期多位于中性粒细胞内,慢性期则多在细胞外 • 根据菌毛分型:T1~T5 T1、T2有菌毛 T3、T4、T5无菌毛

  22. 淋球菌革兰染色图

  23. 生长条件 • 营养要求高 • 专性需氧 • 5~10%CO2 • <30℃或>36.5 ℃不生长

  24. 常用培养基和菌落特征 • 巧克力色培养基 • TM培养基(含万古霉素、多粘菌素、制霉菌素) • MTM培养基(改良的TM) • 菌落特征:圆形、光滑、湿润、灰白色、易乳化

  25. 生化反应 • 氧化酶、触酶:+ • 葡萄糖、麦芽糖、蔗糖:+-- • 30%H2O2试验:+

  26. 抵抗力 • 抵抗力极弱 • 对温度变化敏感 • 对干燥敏感 • 对消毒剂敏感 • 易形成耐药性

  27. 临床意义 • 致病物质:菌毛、IgA蛋白酶 • 所致疾病: • 性接触--引起淋病 • 产道感染--引起新生儿淋病性眼结膜炎

  28. 标本采集 • 正确取材 女性病人标本:取宫颈内膜分泌物 男性病人标本:取尿道口脓性分泌物

  29. 分泌物 直接涂片染色 分离培养 初步报告 可疑菌落 涂片染色 生化反应 生长特性

  30. 直接涂片 • 分泌物涂片,做革兰染色 • 急性炎症期中性粒细胞内可见革兰阴性双球菌。 • 阳性率男性90%、女性50%~60%。 • 无症状淋病或轻症患者,尤其是女性,检出率低,只做涂片可漏诊40%以上,

  31. 培养检查 • 取材部位准确 • 培养基预温 • 立即接种 • 最好床边接种 • 合适的培养基 • CO2培养 • 取氧化酶阳性菌落做下一步鉴定

  32. 鉴定试验 • 氧化酶试验 • 糖分解试验(葡萄糖、麦芽糖、蔗糖) • 30%过氧化氢试验

  33. 药敏试验

  34. 鉴定依据 • 形态染色典型:革兰阴性球菌 • 培养特性:光滑、湿润、易乳化菌落 • 生化反应:氧化酶阳性、仅分解葡萄糖