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医学免疫学实验

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医学免疫学实验 - PowerPoint PPT Presentation


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医学免疫学实验. 实验二. (一)沉淀反应 1 、单向琼脂扩散试验(示教) 2 、双向琼脂扩散试验 3 、对流免疫电泳试验 (二)补体参与的免疫反应 1 、溶血反应 2 、补体结合试验(原理). (一) 沉淀反应. 一定条件. 可溶性 Ag + Ab 沉淀物 凝胶内沉淀反应 1 、单向琼脂扩散试验 (定量). Ag、Ab 比例合适. Ag 浓度. Ab. Ag. Ag. Ag. Ag. Ag. 沉淀环直径 2. (一) 2 、双向琼脂扩散试验 (定性或半定量). Ag. Ab.

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实验二
  • (一)沉淀反应

1、单向琼脂扩散试验(示教)

2、双向琼脂扩散试验

3、对流免疫电泳试验

  • (二)补体参与的免疫反应

1、溶血反应

2、补体结合试验(原理)

slide3

(一) 沉淀反应

一定条件

可溶性Ag + Ab 沉淀物

凝胶内沉淀反应

1、单向琼脂扩散试验 (定量)

Ag、Ab比例合适

Ag浓度

Ab

Ag

Ag

Ag

Ag

Ag

沉淀环直径2

slide5
(一)2、双向琼脂扩散试验 (定性或半定量)

Ag

Ab

(在Ag、Ab比例合适处形成沉淀线)

Ab

:标本中无Ag

Ab

Ag

Ag

Ab

:标本中有Ag

(相同抗原?)

标本

阳性对照

Ag

slide7

(fusion) (cross) (spur)

R1,2

αR1αR2

slide8

(一)2、双向琼脂扩散试验(定性)

(请按照实验指导讲义方法进行操作)

Ab

:标本中无Ag

Ab

Ag

Ag

Ab

:标本中有Ag

(相同抗原)

标本

阳性对照

Ag

slide9

1. Make a agar plate

(without Ab or Ag)

2. Punch wells

  • Add samples:
  • Anti-AFP
  • positive control (AFP)
  • Test sample (AFP?)

Ag

Ab

?

?

Ab

Ab

Ag

Ag

?

?

Ag

slide10

4. incubation and observe results

Result (1):

Ab

Ag

:no Ag(AFP) in sample serum

Ab

:same Ag(AFP) in sample serum

Ag

slide11

Result (2):

Ag

Ab

:no Ag(AFP) in sample serum

Ag

Ag

?

?

:same Ag(AFP) in sample serum

Ab

?

?

Ag

slide12

Result (3):

Ag

Ab

Anti-AFP

?

?

Ab

AFP, (positive control)

Ag

?

?

Ag

sample serum (AFP?)

Anti-AFP

sample serum (AFP?)

AFP, (positive control)

slide14
(一)3、对流免疫电泳原理图:

pH 8.6

Ab

Ag

电泳力:

电渗力:

合力:

运动方向:

slide16

对流免疫电泳检测方法:

Ab

阳性对照(Ag)

待测标本(?Ag)

(有沉淀线:有Ag;

无沉淀线:无Ag)

slide17

对流免疫电泳检测方法(加样图):

Ab(抗AFP)

阳性对照(Ag)

(阳性血清,含AFP)

待测标本(?Ag,?AFP)

(有沉淀线:有Ag,AFP;

无沉淀线:无Ag,无AFP)

slide18
(二)补体参与的免疫反应 1、溶血反应

补体

SRBC + Ab SRBC-Ab 溶血

(溶血素)

slide19

(二) 1、溶血反应

  • 请按照实验指导讲义方法进行操作
  • 2人/组
  • 注意观察溶血现象
  • 请分析:为何第3、4管不溶血,分别缺什么成分?
slide20
(二)2、补体结合试验(检测原理)

指示系统

反应系统(待测系统)

有Ag

溶血素

补体

不溶血

Ab

SRBC

(标本中有 Ag)

溶血素

无Ag

溶血

补体

(标本中无 Ag)

Ab

SRBC