Грамотная трактовка спермограммы – залог успеха преодоления мужской инфертильности

1. Грамотная трактовка спермограммы – залог успеха преодоления мужской инфертильности Василевская С.Е.

2. Фертильность – (лат. фертилис – плодородный, плодоносный) – способность организма воспроизводить потомство, репродуктивная способность Реймерс Н.Ф. , 1991

3. Частота бесплодия супружеских пар детородного возраста 15% - 17%

4. Доля «мужской инфертильности» как причина бесплодного брака составляет 50%, несколько десятилетий назад она составляла 15% - 25% Кузьмичев Л.Н.,2005

5. Изменения показателей спермограммы Кузьмичев Л.Н.,2005

6. «Скорость» падения концентрации сперматозоидов в сперме мужчин Европы составляет примерно 2% в год Irvine S. et al, 1996

7. Концентрация спермиев: как изменились ориентиры в ХХ веке

8. Факторы препятствующие зачатию - мужской - трубноперитонеальный - эндокринный - инфекционный - иммунологический

9. Эякулят или сперма – (греч. Sperma –семя) – смесь выделяемых во время эякуляции продуктов секреции мужских половых органов: яичек и их придатков, предстательной железы, семенных пузырьков, куперовых желез, уретры.

10. Что мы оцениваем в нативном препарате эякулята? • Оценка наличия спермиев • Оценка подвижности спермиев • Однородность препарата • Агглютинация и аггрегация • Предварительная оценка воспаления • Наличие лецитиновых зерен • Кристаллы Бетхера

11. Сравнение показателей спермограмм клиник города и ОВРТ Мариинской больницы

12. Современные рекомендации по анализу эякулята для клинико - диагностических лабораторий Объем 2-5 мл. Концентрация 20 млн./мл. Подвижность более 60% Нормальное строение более 60% Карманный справочник по диагностическим тестам. В.С.Камышникова, 2004 г.

13. Нормальные показатели эякулятаОбъем эякулята 2 – 6 мл. Концентрация сперматозоидов 20 – 119 млн./мл. Подвижность 25% А или 50% А+В Морфология более 14% ВОЗ 2002

14. Характеристики эякулята, новые стандарты Объем эякулята 1,5 мл. (1,4-1,7) Концентрация сперматозоидов 15 млн./мл.(12-16) Подвижность: прогрессивноподвижных форм 32% (31-34) подвижных форм 40% (38-42) Морфологически нормальных форм 4% (3-4) Human Reproduction Update , 2009

15. Заключения спермограммОлигозооспермия - снижение конценрации сперматозоидов в эякуляте менее 20 млн./мл.Криптозооспермия – обнаруживаются единичные сперматозоиды в осадке. Концентрацию подсчитать невозможно.Полиспермия – концентрация сперматлозоидов превышает 200 млн./мл.Астенозооспермия – активноподвижных форм категории А менее 25% или А+В менее 50%Тератозооспермия – нормальных морфологических форм менее 14%Азооспермия – отсутствие сперматозоидов при анализе всего осадка после центрифугированияАспермия – отсутствие эякулята (аспермия)

16. Есть ли сперматозоиды? - Исследование центрифугата посторгазменной мочи. Появились спермии? Алгоритм исследования нативного препарата Центрифугирование эякулята, исследование осадка. Появились спермии? - + + Исследование концентрации спермиев в камере Горяева без разведения Подвижные они? - - Исследование окрашенного мазка эякулята. Клетки сперматогенеза найдены? + + + Тест с эозином. Живые есть? - + - Ретроградная эякуляция Стандартная спермограмма Аспермия Некроспермия Азооспермия

17. Изменения концентрации спермиев у одного индивида

18. Репродуктивная группа ВОЗ различает • а). Сперматозоиды с активно поступательным движением • b). Сперматозоиды с поступательным движением • c). Сперматозоиды без поступательного движения • d) Неподвижныесперматозоиды • Отличия • наличие поступательного движения • скорость спермия 25-50мкм/с • наличие поступательного движения • скорость спермия < 25мкм/с • Феноменкачания • Манежныеспермии • скорость спермия < 3мкм/с • d) Отсутствиелюбойподвижности • Нормы: • а > 25% • а + b > 50% • c < 3% • d) нетсвоейнормы Типы подвижности спермиев

20. МАР - тест. Микроскопия

21. Спермий человека

22. «Строгие критерии» морфологии по T. Kruger • Шейка • толщина менее 1 мкм • длина 1,5 длины головки • прикреплена к головке вдоль оси • Цитоплазматические капли не более 1/2 размера головки • Головка • длина 4,0-5,5 мкм • ширина 2,5-3,5 • длина/ширина = 1,50-1,75 • Площадь акросомы = 40-70% площади головки • Хвост • прямой • не закрученный • одинаковой толщины на всем протяжении • уже шейки • длиной около 45мкм

23. Микроскопия мазка

24. Зависимость оплодотворения ооцитов in vitro от показателей морфологической нормы сперматозоидов. N морф. меньше 4% - оплодотворялось 7,6% ооцитов N морф. от4-14% - оплодотворялось 63,9% ооцитов N морф. более14% - оплодотворялось 85-88% ооцитов, при этом 99% эмбрионов имплантиравалось.

25. Генетические патологии Генные Хромосомные Нарушение компактизациихроматина ядра Фрагментация хроматина ядра

27. Показания к анализу фрагментации ДНК • бесплодие неясной этиологии • привычное невынашивание • варикоцеле • половые инфекции • возраст более 45 лет, курение, токсические агенты • перенесенные воспалительные заболевания • отбор доноров спермы

28. Методы определения фрагментации ДНК Tunel( terminal deoxynucleotidyetransferase (tdt) mediated dUTP nick end labeling) – выявляет дефекты и разрывы в ДНК с помощью уридина на 3 он конце. SCSA(sperm chromatin structure assay) – выявляет ssиds ДНК с помощью акридинового оранжевого и позволяет определить индекс фрагментации Comet – электрофорез фрагментов ДНК, полученных в нейтральных условиях ( ds разрывы ДНК) и с помощью алкалина ( ss разрывы ДНК).

29. набор Halosperm Компания Halotech DNA • денатурация ДНК, с удалением ядерных белков (кислотная обработка и лизис с DTT и Triton X100) • петли ДНК формируют ореол дисперсии хроматина - ядра сперматозоидов с фрагментированной ДНК не развивает ореол дисперсии или ореол минимален

30. ВЫВОДЫ В отсутствии национального стандарта оценки эякулята , необходимо пользоваться стандартами ВОЗ В выборе тактики лечения, по данным спермограммы , необходимо взаимодействие с клиниками ВРТ (урологами – андрологами,клиническими эмбриологами) Своевременно принимать решения о переходе к методикам IVF – ICSI - IMSI

31. СПАСИБО ЗА ВНИМАНИЕ