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Biblioteca de gDNA

Biblioteca de gDNA. Catarina Martins, LCB GENÉTICA MOLECULAR E HUMANA. Biblioteca gDNA. conjunto de clones de DNA que contêm coletivamente o genoma inteiro PREPARAÇÃO: isolar DNA digerir DNA com endonucleases de restrição

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Presentation Transcript

  1. Biblioteca de gDNA Catarina Martins, LCBGENÉTICA MOLECULAR E HUMANA

  2. Biblioteca gDNA • conjunto de clones de DNA que contêm coletivamente o genoma inteiro • PREPARAÇÃO: isolar DNA • digerir DNA com endonucleases de restrição • Inserir os fragmentos de restrição num DNA vetor de clonagem

  3. Se a enzima de restrição faz cortes desencontrados (pontas unifilamentares) → Fragmentos de restrição são ligados diretamente ao DNA vetor (com a mesma enzima)

  4. A E.Coli deve ser tornada permeável ao DNA (químicos ou pulsos de eletricidade) • As células transformadas são selecionadas mediante cultivo em condições em que o gene marcador selecionável do vetor é essencial para o crescimento.

  5. Aplicações… • De sequenciamentos. Papel importante em toda a sequenciação do genoma de vários organismos, incluindo o genoma humano e vários organismos modelo.

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