手足口病实验室相关工作规范及要求

1. 手足口病实验室相关工作规范及要求

2. 手足口病（Hand, foot and mouth disease, HFMD）是由肠道病毒引起的传染病，多发生于婴幼儿，可引起手、足、口腔等部位的疱疹，个别患者可引起心肌炎、肺水肿、无菌性脑膜脑炎等并发症。

3. 病程初期，患儿首发症状多为低热，常伴有饮食减退，全身不适，咽喉痛。病程初期，患儿首发症状多为低热，常伴有饮食减退，全身不适，咽喉痛。 • 口腔黏膜溃疡出现于发热后1-2天，初起为红斑，随后出现水疱并进展为溃疡。患儿常因疼痛而拒食。 • 皮疹也于1-2天后开始出现，初为斑丘疹，随后转为疱疹。皮疹不伴有发痒，多位于手掌和足底，也可出现于臀部。 • HFMD患者也只可表现为皮疹或口腔溃疡。

4. HFMD典型粘膜疹、皮疹

6. 病原学 • 引发手足口病的肠道病毒有20多种，柯萨奇病毒A组的16、4、5、9、10型，B组的2、5型，以及肠道病毒71型均为手足口病较常见的病原体，其中以Cox A16和EV 71最为常见。

7. 实验室确诊依据 • 临床诊断病例符合下列条件之一，即为实验室诊断病例 • 病毒分离：自咽拭子或咽喉洗液、粪便或肛拭子、脑脊液或疱疹液、以及脑、肺、脾、淋巴结等组织标本中分离到肠道病毒 • 核酸检验：自病人血清、脑脊液、咽拭子或咽喉洗液、粪便或肛拭子、脑脊液或疱疹液以及脑、肺、脾、淋巴结等组织标本等标本中检测到病原核酸 • 血清学检验：病人血清中特异性IgM抗体阳性，或急性期与恢复期血清IgG抗体有4倍以上的升高。

8. 采集合适的标本，选择合适的细胞系进行病毒分离，或直接从临床标本中检测病毒核酸来诊断。采集合适的标本，选择合适的细胞系进行病毒分离，或直接从临床标本中检测病毒核酸来诊断。 若没有采集到合适的临床标本，或无法进行病毒分离，可通过血清学检测中和抗体水平变化。

9. 标本检测流程图

10. 检测结果的评价 如果从脑脊液、疱疹液中分离到病毒，那么很可能该病毒就是病因病原； 由于肠道病毒隐性感染情况的存在，咽拭子和粪便中分离到病毒，则应结合其它信息进行判定。 当无法进行病毒分离或未分离到病毒时，血清学诊断方法可作为病毒感染的间接证据。

11. 传染源的排毒情况 • 患者和隐性感染者是主要传染源，该病潜伏期为3－7天，潜伏期即有传染性，通常发病一周内传染性最强 • 患者疱疹液中含大量病毒，破溃时病毒即溢出，咽部分泌物的排毒时间可持续1－2周，粪便约3－5周 • 患者发病约7天左右排毒逐渐减少

12. 采样检测目的和对象 • 采样监测的目的 • 定性诊断、明确疫情 • 病原学监测 • 采样对象 • 重症或死亡病例 • 聚集性病例 • 辖区内首次调查和采样病例

13. 采样标准及要求 粪便标本：发病7日内采集 咽拭子标本：发病4日内采集 疱疹液 脑脊液：出现神经系统症状后3日内采集 血清标本：急性期（发病0-3天）和恢复期（14-30天）

14. 采样标准及要求 • 重症或死亡病例的标本采集 • 重症病例 • 有手足口病的临床表现的患者，同时伴有肌阵挛，或脑炎、急性迟缓性麻痹、心肺衰竭、肺水肿等 • 手足口病流行地区的婴幼儿虽无手足口病典型表现，但有发热伴肌阵挛，或脑炎、急性迟缓性麻痹、心肺衰竭、肺水肿等 • 要求：每例均采集 • 标本：咽拭子、疱疹液、粪便、脑脊液、血液，死亡病例按照需要可能加采组织标本等

15. 采样标准及要求 • 聚集性病例 • 在1周内在一个单位或一定区域内出现多例手足口病例； • 要求：采集2－5例，急性期、症状典型 • 标本：咽拭子、疱疹液、粪便

16. 采样标准及要求 • 辖区内首次调查和采样病例 • 2008年5月2日起县级或县级以上的行政区划首次调查和采样的手足口病例； • 要求：采集2－5例，急性期、症状典型 • 标本：咽拭子、疱疹液、粪便

17. 采样标准及要求 • 咽拭子、疱疹液 • 专用绵签 • 病毒运输液 （Hanks液或细胞生长液，不含双抗） • 螺口采样管 • 粪便 • 重量不少于3克，不超过8克 • 专用采便盒

18. 采样标准及要求 • 脑脊液 • 不少于1ml • 无菌管 • 血清 • 2ml以上 • 无菌管

19. 标本或运输要求 • 专人运送 • 咽拭子、疱疹液、粪便、血清等运输需加冰排用冷藏包冷藏运输，在24小时内送至实验室 • 运输过程中要避免反复冻融，标本要冷冻运输

20. 谢谢！