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医学免疫学实验

医学免疫学实验. 实验二. (一)沉淀反应 1 、单向琼脂扩散试验(示教) 2 、双向琼脂扩散试验 3 、对流免疫电泳试验 (二)补体参与的免疫反应 1 、溶血反应 2 、补体结合试验(原理). (一) 沉淀反应. 一定条件. 可溶性 Ag + Ab 沉淀物 凝胶内沉淀反应 1 、单向琼脂扩散试验 (定量). Ag、Ab 比例合适. Ag 浓度. Ab. Ag. Ag. Ag. Ag. Ag. 沉淀环直径 2. (一) 2 、双向琼脂扩散试验 (定性或半定量). Ag. Ab.

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Presentation Transcript


  1. 医学免疫学实验

  2. 实验二 • (一)沉淀反应 1、单向琼脂扩散试验(示教) 2、双向琼脂扩散试验 3、对流免疫电泳试验 • (二)补体参与的免疫反应 1、溶血反应 2、补体结合试验(原理)

  3. (一) 沉淀反应 一定条件 可溶性Ag + Ab 沉淀物 凝胶内沉淀反应 1、单向琼脂扩散试验 (定量) Ag、Ab比例合适 Ag浓度 Ab Ag Ag Ag Ag Ag 沉淀环直径2

  4. (一)2、双向琼脂扩散试验 (定性或半定量) Ag Ab (在Ag、Ab比例合适处形成沉淀线) Ab :标本中无Ag Ab ? Ag ? Ag Ab :标本中有Ag (相同抗原?) 标本 阳性对照 ? Ag

  5. (fusion) (cross) (spur) R1,2 αR1αR2

  6. (一)2、双向琼脂扩散试验(定性) (请按照实验指导讲义方法进行操作) Ab :标本中无Ag Ab ? Ag ? Ag Ab :标本中有Ag (相同抗原) 标本 阳性对照 ? Ag

  7. 1. Make a agar plate (without Ab or Ag) 2. Punch wells • Add samples: • Anti-AFP • positive control (AFP) • Test sample (AFP?) Ag Ab ? ? Ab Ab Ag ? Ag ? ? ? Ag

  8. 4. incubation and observe results Result (1): Ab ? Ag :no Ag(AFP) in sample serum Ab :same Ag(AFP) in sample serum ? Ag

  9. Result (2): Ag Ab :no Ag(AFP) in sample serum Ag Ag ? ? :same Ag(AFP) in sample serum Ab ? ? Ag

  10. Result (3): Ag Ab Anti-AFP ? ? Ab AFP, (positive control) ? Ag ? ? Ag sample serum (AFP?) Anti-AFP sample serum (AFP?) AFP, (positive control)

  11. 明天下午看结果,

  12. (一)3、对流免疫电泳原理图: + - pH 8.6 Ab Ag 电泳力: 电渗力: 合力: 运动方向:

  13. 对流免疫电泳检测方法: Ab - + ? 阳性对照(Ag) 待测标本(?Ag) (有沉淀线:有Ag; 无沉淀线:无Ag)

  14. 对流免疫电泳检测方法(加样图): Ab(抗AFP) - + ? 阳性对照(Ag) (阳性血清,含AFP) 待测标本(?Ag,?AFP) (有沉淀线:有Ag,AFP; 无沉淀线:无Ag,无AFP)

  15. (二)补体参与的免疫反应 1、溶血反应 补体 SRBC + Ab SRBC-Ab 溶血 (溶血素)

  16. (二) 1、溶血反应 • 请按照实验指导讲义方法进行操作 • 2人/组 • 注意观察溶血现象 • 请分析:为何第3、4管不溶血,分别缺什么成分?

  17. (二)2、补体结合试验(检测原理) 指示系统 反应系统(待测系统) ? 有Ag 溶血素 补体 不溶血 Ab SRBC (标本中有 Ag) ? 溶血素 无Ag 溶血 补体 (标本中无 Ag) Ab SRBC

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