1 / 21

DNA Parmak İzi Prosedürü

DNA Parmak İzi Prosedürü. Her grup için tüpler. Şüpheli 1 – 5 Her tüp 10 µl DNA örneği içerir. 70 µl Enzim Karışımı. 10 µl Suçlu DNA Öreneği. 0,24 g Agaroz. 80 µl Boyayıcı. 10 µl Marker. 1. Restriksiyonun Hazırlanmansı. Dikkat !.

flower
Download Presentation

DNA Parmak İzi Prosedürü

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. DNA Parmak İzi Prosedürü DNA Parmak İzi

  2. Her grup için tüpler DNA Parmak İzi

  3. Şüpheli 1 – 5 Her tüp 10 µl DNA örneği içerir 70 µl Enzim Karışımı 10 µl Suçlu DNA Öreneği 0,24 g Agaroz 80 µl Boyayıcı 10 µl Marker DNA Parmak İzi

  4. 1. Restriksiyonun Hazırlanmansı DNA Parmak İzi

  5. Dikkat! • Deneydeki kirliliği ve bozulmayı önleyebilmek için pipet uçlarını yalnızca bir kez kullanın. • Tüpleri karışmaları için en az 30 saniye boyunca döndürün. DNA Parmak İzi

  6. 1. DNA Örneği İçeren Tüpler CS S 1 S 2 S 3 S 4 S 5 DNA 10µl 10µl 10µl 10µl 10µl 10µl DNA-Fingerprint

  7. 1.1 Her tüpe pipet ile 10 µl enzim karışımı ekleyin CS S 1 S 2 S 3 S 4 S 5 DNA 10µl 10µl 10µl 10µl 10µl 10µl Enzim- 10µl 10µl 10µl 10µl 10µl 10µl Karışımı(ENZ) DNA Parmak İzi

  8. 2. Restriksiyon Sindirim Test tüpleri inkübatöre yerleştirin ve su banyosu içerisinde 37°C’de 20 dakika bekletin. DNA Parmak İzi

  9. 3. Elektroforez’in Hazırlanması DNA Parmak İzi

  10. 3.1 Elektroforez Odacığının Hazırlanması Tarak Metal Levha Kızak Kızak, metal levha ve tarağı elektroforez odacığının içerisine yerleştirin. DNA Parmak İzi

  11. 3.2Agaroz Jelin Hazırlanması(0,8%) • 250 ml erlenmayerin içerisine 0,24 g agaroz + 30 ml TAE-boyayıcısı koyun. • Kısa bir süre erlenmayeri mikrodalga fırında kaynatın, karıştırın ve tekrar kaynatın. DNA Parmak İzi

  12. 3.3 Jelin Dökülmesi 55 °C’de jeli jel kutusunun içerisine dökün. Dikkat: • Test Sıcaklığı elinizin üstü ile kontrol edin. • Jel katılaşana kadar hareket ettirmeyin. DNA Parmak İzi

  13. 3.4 Odacığın Hazırlanması • Jel katılaştıktan sonra elektroforez odacığının metal plakasını sökün. • Odacığı 27F ml TAE boyayıcısı ile jelin üzerini kaplayacak şekilde doldurun. • Tarağı çekin. DNA Parmak İzi

  14. 4. DNA Markerının Hazırlanması • Pipet ile 10 µl tamponu (LB) 10 µl marker’a (M) ekleyin. DNA Parmak İzi

  15. 5. 10 µl Tamponun Eklenmesi 10 µl tamponu CS ve S1-S5’e pipet ile ekleyin. 10 µl 10 µl 10 µl DNA Parmak İzi

  16. 6. Kuyuların Doldurulması Sol kuyu boş kalmalı. Her örnekten 20 µl ve 20 µl marker’ı kuyulara doldurun. Sırayı Unutmayın! Kuyular: sağdan sola doğru doldurun DNA Parmak İzi

  17. 6. Kuyuların Doldurulması Dikkat: Jel kuyuları delik olmamalıdır. DNA Parmak İzi

  18. 7. Jel Elektroforezi (120 V ca. 30 dakika) Mavi bantlar jelin sonuna ulaşmadan 1 cm önce elektroforezi durdurun. DNA Parmak İzi

  19. 8. DNA’nın Renklendirilmesi • Jeli reklendirici çanağa aktarın ve 60 ml renklendirici çözelti 2 dakika ile kaplayın. • Renklendirici çözeltiyi erlenmayerin içerisine dökün. DNA Parmak İzi

  20. CSS1S2S3S4S5 M 9. Jeli Analiz Edin. Süphelilerden hangisi suçlu? DNA Parmak İzi

  21. 9. Sonuç DNA Parmak İzi

More Related