第十六章 人体组织的检验

1. 第十六章 人体组织的检验

2. 一、毛发检验 毛发结构：毛发是皮肤的一种特殊的附属器，是 皮肤毛囊细胞产生的一种富有弹性角质体。 毛尖-----是毛干的游离末端，毛干向毛尖逐渐 变细而尖 毛干-----是裸露于皮肤外部的部分，由角化上 皮细胞组成，中心向外可以分为： 毛小皮：人----毛小皮花纹通常为细小波浪状。 毛皮质：人----皮质发达， 毛髓质：人---髓质不发达、而且髓质不连续 毛根-----是埋在皮肤内的部分。 毛 球：毛根起始端膨大和球状的部分 毛 囊：包裹毛根的一管状结构，内层为上皮 根鞘、外层为纤维组织鞘 毛乳头：毛球和毛囊末端膨大，底面内凹，含 毛细血管和神经的结缔组

3. 法医意义： 1 毛发容易脱落，在凶杀、强奸、抢劫等 案件中均可遗留 2 毛发理化性质稳定，其主要成分为角蛋 白，不易腐蚀和毁坏，可长期保存 3 毛发可以进行个人识别 鉴定注意： 1 毛发容易丢失，检验时应该特别小心，最 好带口罩 2 选择合适的背景进行观察

4. 毛小皮 毛皮质 毛髓质 形态 边缘 宽度 色素 宽度 连续性 末端 人毛 细而不规则花形 细锯齿状 较宽2/3 均匀 较窄1/4~1/5 不连续 部分缺如 动物毛 形状多变 粗锯齿状 较窄1/2~1/3 不均匀 较宽》1/3 连续 直至毛尖 毛发与其他纤维的鉴别 肉眼观：毛尖、毛干、毛根 显微镜：毛小皮、毛皮质、毛髓质 燃烧法：毛发由特殊的臭味----角蛋白中含有 3%~5%的硫 人毛与其他动物毛的鉴别

5. 长度 直径 横断面 头发 ~2m 《0.1 圆形或椭圆形 胡须 ~30cm 0.15 钝的三角形 阴毛 3~6cm 0.1~0.2 长椭圆形 毛发部位的确定 毛发其他特征鉴别 5%~10%亚硝基铁氰化钠溶液 脱落----毛根完全角化，干燥萎缩，无根鞘附着， 根部色素少。染色不颜色反应 拔出----毛囊组织附着、毛球湿润，毛球下端开放 呈钩状，染色呈红色。 钝器损伤----钝器作用部位变宽扁平，皮质纤维分 离，部分或完全断裂 锐器损伤----断端平滑整齐、毛干不碎裂、皮质纤 维不分裂

6. 毛发的个人识别 形态学检查：长度--- 色泽---黑色、浅褐色、灰色、白色---色素：白色、黑色、红色 形态---直发、波状发、卷发 断端---剪切或切割、部分撕裂或完全撕裂 免疫学检查：ABO血型----解离试验 特征：1 血型物质含量少；2 毛小皮没有血型物质，只有皮质和髓质才有 方法：毛发洗净--乙醇脱色--充分压扁--加抗体吸收---涤、解离、RBC 注意：1 毛发压扁，原宽度地~4倍； 2 抗血清效价》128； 3吸收时间充分，过夜 4 毛发对照 生化学检查：有毛根和毛囊的毛发可以检测ESD、GLOI、PGM1、ORM等 分子生物学：带毛囊---DNA提取用chelex-100，STR基因座分析，性别基因鉴定 毛 干---线粒体DNA多态性分析 化学 分 析：微量元素的检测 应用：可以推测可能的生活环境、从事的职业、判断是否中毒 方法：原子发射光谱析、原子吸收分光光度、中子活性、气相色谱、质谱

7. 二、软组织检验 1 种类鉴别 肉眼观察适合于组织块比较大的检材的识别 组织切片HE染色后，在显微镜下观察，鉴别 ***如果干燥组织可以用5%醋酸浸软组织以 恢复正常形态 皮肤----复层鳞状上皮细胞的表层结构+真皮层的 毛囊和皮脂腺，及皮下脂肪 脑组织----神经细胞和神经胶质细胞 肝 脏----肝细胞及胆管构成发肝小叶结构 肾 脏----肾小球、肾小管、 消化道----粘膜层、粘膜下层、肌层、外膜

8. 2 种属鉴定 免疫学方法：抗人血清---沉淀反应、凝集反应、酶免疫分析 **法医检验中的组织经常受各种因素的影响，变性或分解， 易产生误判。 分子生物学： Alu序列 含有AluI酶切位点 散在重复序列，由300bp重复单位，该序列为人类和灵长类特有-----种属特异性 PCR-AFLP：人类130bp的扩增产物 28srRNA rRNA=60s（28s+5.8s+5s+50多种多肽）+40 保守区中的可变区进化较快，种属之间差异很大 人类108、104、101、99bp，不同动物的扩增产物长度不同 细胞色素b基因 位于线粒体上的具有种属差异的遗传标记 人和哺乳类动物区别 AluI酶切位点--酶切片断的长度不同 人和鸟类的动物区别—NcoI酶切位点---人类不含有该酶切位点 SON基因

9. 3 个人识别 检验基础：正常情况下，同一个体不同组织的血型、酶型、DNA分型结果相同 例外：癌变的组织；腐败组织----获得性B物质 影响因素：环境因素，干燥能保存，潮湿易破坏 温度、酸碱 烧熟（但未焦）的组织可以检出， 自溶和腐败 使组织的血型物质及其他的遗传标记更容易被破坏 送检注意：1 尽快送检--- 2 妥善保存---所有检材不宜用甲醛固定 3 合理选材---肝脏和脾脏中核酸分解酶丰富，蛋白质和DNA降解快，不宜首选，肌肉和脑是提取DNA较理想的检材

10. 血型： ABO血型ABH抗原不仅分布于人类红细胞 上，也存在于人体各种上皮细胞、血管与淋巴管的内皮细胞、心内膜及神经组织的神经细胞及突触。 有些组织的ABH抗原发育较红细胞早 方法：吸收试验---凝集抑制试验 解离试验---热解离试验 混合凝集---红细胞粘连试验 免疫组化---酶标抗体的应用 基因分型---PASA、PCR-RFLP、ASO-PCR 酶 型测定检材处理：组织制成匀浆， DNA分析DNA提取：冷冻组织---常规有机溶剂，量少用Chelex-100 DNA分析STR或HLA基因分型

11. 三、其他组织检验 1 指甲检验—由表皮细胞角化而成，由多层连接牢固的角化细胞构成，细胞内充满角质蛋白。 ABO血型 特点：ABH为水溶性血型物质，但不受分泌型的影响，存在于所有的个体。成人和新生儿指甲中的ABH含量无明显的差异。 方法：洗净---用肥皂水充分的洗涤，再用蒸馏水冲洗数次 软化---生理盐水中2小时，晾干 脱脂---丙酮或乙醇脱脂 压碎---加大抗血清接触的面积 mtDNA检测 测定mtDNA多态性的灵敏度比检测核DNA的多态性高 2 骨及牙检验-----人体最坚硬的组织，抵抗腐败，长期保存 检材处理：用手术刀刮净骨表面和牙齿表面的污垢物，用蒸馏水冲洗2次，紫外线照射1小时后，用锤子将牙齿砸碎成粉末，或用电钻取出骨粉 ABO血型：骨粉经乙醇脱脂后，分别粘在透明胶布上-----解离试验 DNA分析：常规提取以后，可以再用DNAclean-up纯化备用。