Download
1 / 15
150 likes | 318 Views
Módszerek. Fényszórás (sztatikus és dinamikus) Ülepítés gravitációs erőtérben Centrifugálás (tájékoztatásul) Diffúzió mérése (tájékoztatásul) Ozmózisnyomás mérése. Gömb. Stokes. Ülepítés (frakcionálás). Kiváltó ok: sűrűség különbség ( Δρ ) gravitációs erőtérben. gyorsító erő (F gy ).
E N D
Módszerek • Fényszórás (sztatikus és dinamikus) • Ülepítés gravitációs erőtérben • Centrifugálás (tájékoztatásul) • Diffúzió mérése (tájékoztatásul) • Ozmózisnyomás mérése
Gömb Stokes Ülepítés (frakcionálás) Kiváltó ok: sűrűség különbség (Δρ) gravitációs erőtérben gyorsító erő (Fgy) lassító erő (Fl) (lamináris áramlás) súlyerő-felhajtó erő súrlódási tényező * sebsség Stacionárius sebesség alakul ki, azaz gyorsulás nincs, mert a két erő egyenlővé válik: r: gömbekvivalens sugár Kisebb részecskék (r<100nm): diffúzió (konc. grad) Egyensúlyi eloszlás
m t Méreteloszlás Tájékoztatásul Wiegner-féle ülepítő cső diszperziós közeg szuszpenzió Δρ sűrűség különbség Szedimentációs mérleg erőmérő aggregáció
Tájékoztatásul Andreasen készülék (pipettás módszer) 1. Mintavétel: homogenizálás után időközönként mérik a hmélységben még ki nem ülepedett mennyiséget (mindig azonos térfogatú mintában). 2. Számítják a mintavétel időpontjához rendelhető azon legkisebb részecskéknek a méretét (Stokes-egyenlet), amelyek már biztosan kiülepedtek a pipetta alja fölötti folyadékoszlopból (mintavételt követő magasság korrekció). 3. Meghatározzák egy adott r és annál nagyobb méretű részecskék relatív mennyiségét tükröző integrális méreteloszlás görbét. h Frakcionálás Schőne-féle készülék: folyadék ellenáramban ülepítenek (Állandó térfogati sebesség, különböző belső átmérőjű ülepítő hengerek sorozata)
Tájékoztatásul Ultracentrifuga „g” helyett „ω2x” (centrifugális gyorsulás) Néhány százezer g!!! x: távolság a forgástengelytől dx/dt = f(x,..) ω r (gömbekvivalens sugár) x: elvileg 1 db részecske; helyette: a konc. grad. maximuma Optikai leképzés: (dc/dx)max-t x(t) “Tridiszperz” rendszer x
A moltömeg (M) is meghatározható! Tájékoztatásul (alakfüggetlen!) Szedimentációs állandó (Svedberg) D és S meghatározása, c 0 M: „Z-átlag” Egyensúlyi centrifugálás: Idiff+Iül=0 D nélkül M
Tájékoztatásul Diffúzió Fick I. (diffúziós anyagáram) Fick II. Einstein-Stokes egyenlet r: gömbekvivalens sugár D meghatározása 1. Határfelület elmosódásának módszere (Fick II.) 2. Diafragma módszer (Fick I.)
Tájékoztatásul D meghatározása 1. Határfelület elmosódásának módszere (Fick II.) Mérjük: C(x,t) dc/dx (t) (Schlieren) +x t=0 c=0 x=0 c0 -x D 0 C0
Tájékoztatásul D meghatározása 2. Diafragma módszer (Fick I.) Koncentráció gradiens a diafragmára jut c1 d Mértjük c-t, majd számítjuk I-t. A & d független mérésből ismert c2 A D Diafragma módszer hátránya: • Levegő buborék • Adszorpció/tapadás • Kalibráció (A/d nem ugyanaz) Relatív módszer és pontatlanabb
Tájékoztatásul D=f(c, alak, szolvat., töltés) c1-c2 esetén : Dc Dc= D0(1+konst.*c) (GRALÉN) r : hidrodinamikai sugár A molekulatömeg (M) is számítható (pl. globuláris fehérjékre) Független M mérés: D0’ számítása D0’/D0: gömb alaktól való eltérés mértéke Tömeg szerinti átlag!
Ozmózis Kolligatív tulajdonság!!! • Feltételek: • Különböző koncentrációjú oldat v. diszperzió • Féligáteresztő hártya • Az oldószer (diszperziós közeg) kémia potenciáljának kiegyenlítődése. • Felhasználás: relatív molekulatömeg meghatározás • (makromolekulák) 104-106; érzékeny módszer! • Jóval érzékenyebb, mint a fagyáspont csökkenés, forráspont • emelkedés,vagy gőznyomás csökkenés.
Viriál egyenlet: Nem ideális ρ: tömegkoncentráció (g/l)
M: számátlag szolvatált Redukált ozmózis nyomás: jó rossz Θ oldószer B=0 Mérés: • meniszkusz mozgási sebesség (v) vs. ellennyomás (p) • (mert az egyensúly csak lassan áll be) Problémák: • „szabad” és „kötött” oldószer • membránpotenciál (ionok jelenléte)
