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DNA 粗萃取. 3/18 高子晴老師. DNA 位在染色體上。那這麼神奇的東西,你看的見嗎?讓我們也來試試看把生命抽取出來!. 注意!!. 加扣卡說明:於 3/20 (五)前拿實踐卡找老師。 加卡標準 -- 學習單完成加 1 卡,實驗成功加 3 卡。 扣卡標準 -- 毀損器具及嬉鬧者扣 5 卡, 器具需照價賠償。. 注意安全!. 【 目的 】 利用簡單操作過程來分離出 遺傳物質 DNA. 【 實驗原理 】
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DNA粗萃取 3/18 高子晴老師
注意!! • 加扣卡說明:於3/20(五)前拿實踐卡找老師。 加卡標準--學習單完成加1卡,實驗成功加3卡。 扣卡標準--毀損器具及嬉鬧者扣5卡, 器具需照價賠償。 注意安全!
【目的】利用簡單操作過程來分離出 遺傳物質DNA 【實驗原理】 • 1. DNA在食鹽水溶液中的溶解度,是隨著食鹽水的濃度的變化而改變的。利用這一原理,可以使溶解在食鹽水溶液中的DNA析出。 • 2. DNA不溶於酒精溶液,但是細胞中的某些物質則可以溶於酒精溶液。利用這一原理,可以進一步提取出含雜質較少的DNA。
實驗器材 • 洋蔥1/4顆或菠菜1株、鳳梨數片、蒸餾水、 5M食鹽水5毫升(4℃)、洗碗精3毫升、 試管2支、燒杯1個、研缽、漏斗、濾紙、 玻棒、滴管各一。95%酒精5毫升(4℃)、
步驟一 • 將1/4顆洋蔥或1株菠菜切碎並置於缽中,加入20毫升蒸餾水,研磨攪拌5分鐘。 (目的為:)。 破壞細胞壁、細胞膜
步驟二 • 以試管取3毫升的洗碗精,分次將3毫升的洗碗精加入研缽中,繼續溫和攪拌5分鐘,避免產生泡沫 (目的為:)。 破壞成分為脂質的細胞膜
步驟三 • 加入5 ml的5 M濃食鹽水(配製方法是100 ml的水加29.4克的食鹽溶解即為5 M的濃食鹽水)並用筷子攪拌均勻。 (目的為:)。 溶 解 D N A
步驟四 • 加入數塊鳳梨,研磨出果汁,並持續攪拌至少五分鐘。 (目的為:)。 分解蛋白質、DNA。 鳳梨汁有蛋白酶
步驟五 • 以漏斗和濾紙將磨碎的汁液過濾至燒杯中。 請問:此時DNA位於 □濾液內 □果肉殘渣中
步驟六 • 將過濾液分裝至試管中約1/3滿(樣本試管)。 步驟七 • 另取一試管倒入冰酒精(95%)約1/3滿(酒精試管)。
步驟八 • 手持樣本試管傾斜45度,另一手持酒精試管,將酒精沿樣本試管壁緩慢倒入(越慢越好),樣本試管出現明顯兩層(上層為酒精層;下層為樣本層)。 (目的為:)。 使DNA逐漸析出。 DNA不溶於酒精。
最後的步驟—大功告成! 9. 靜置於試管架上,會在上下兩層交界面慢慢出現呈黏稠狀物,並飄浮至酒精層。此階段請保持靜置。(切記!不可攪拌) 10.你所看到的DNA為白色棉絮絲狀,可用玻棒將它輕拉到酒精層。 11.若想保存DNA,可以在玻璃罐加入70%的酒精,再利用吸管把DNA放進去。
動動腦 • 如果實驗材料更換其他植物或水果是否也可以得到DNA?你的理由是? • 動物體內的材料是否也可以得到DNA?你的理由是? • 除了生物體可取得DNA,其他無生物是否也可取得DNA?你的看法是?