Download
1 / 26
320 likes | 682 Views
เทคโนโลยีชีวภาพในการปรับปรุงพันธุ์สัตว์. รศ.ดร.มนต์ชัย ดวงจินดา ภาควิชาสัตวศาสตร์ มหาวิทยาลัยขอนแก่น. ที่อยู่ของ DNA. 5’ 3’. 3’ 5’. tRNA, rRNA. mRNA. exon1. exon2. exon3. exon4. Protein. intron1. intron2. intron3. mRNA. Subunit enzyme (Protein). Gene ทำงานอย่างไร. ผิวหนัง.
E N D
เทคโนโลยีชีวภาพในการปรับปรุงพันธุ์สัตว์เทคโนโลยีชีวภาพในการปรับปรุงพันธุ์สัตว์ รศ.ดร.มนต์ชัย ดวงจินดาภาควิชาสัตวศาสตร์ มหาวิทยาลัยขอนแก่น
5’ 3’ 3’ 5’ tRNA, rRNA mRNA exon1 exon2 exon3 exon4 Protein intron1 intron2 intron3 mRNA Subunit enzyme (Protein) Gene ทำงานอย่างไร
ผิวหนัง เด็ก ผู้ใหญ่ การแสดงออกของยีน • WHERE / WHEN / HOW MUCH ตับ
Artificial Insemination (A.I.) เพื่มความก้าวหน้าทางพันธุกรรม(G) ผ่านทางพ่อพันธุ์เป็นหลัก
ตัวให้ X ตัวรับ Multiple Ovulation and Embryo Transfer (MOET)
AI + MOET Increase level of genetic progress G AI only Generation
Sex Control • Sexing sperm • flow cytometer • Sexing embryo • PCR
Genetic Markers • Marker Assisted Selection (MAS) • การใช้เครื่องหมายพันธุกรรมช่วยในการคัดเลือก ให้สัตว์มีพันธุกรรมตามที่ต้องการ
เทคนิค PCR • เป็นเทคนิคการเพิ่มชิ้นยีน(หรือดีเอ็นเอ) ที่ต้องการด้วยเครื่องมือเฉพาะเรียกThermal cycler (นิยมเรียกง่ายๆว่าเครื่อง PCR)
Reverse Primer Forward Primer ชิ้นยีนที่ต้องการ 5’ 3’ 3’ 5’
PCR-RFLP • ขั้นตอนที่ 1 ตรวจหายีนที่ต้องการจาก DNA ของสัตว์ด้วยวิธี PCR • ขั้นตอนที่ 2 นำยีนที่ได้มาตัดด้วยเอ็นไซม์ สัตว์ปกติ/ไม่ปกติ จะได้รูปแบบต่างกัน
การวิเคราะห์ยีนต้านทานโรคเต้านมอักเสบการวิเคราะห์ยีนต้านทานโรคเต้านมอักเสบ • ยีน BoLA เป็นยีนสร้างโปรตีนบนผิวเซลล์เม็ดเลือดขาว ซึ่งช่วยในการจับกับสิ่งแปลกปลอม • โคแต่ละตัวจะมีโปรตีน BoLA นี้แตกต่างกันออกไป เรียกชื่อเป็น DRB3 รูปแบบ 1, 2, 3, …. • ปัจจุบันพบว่า DRB3 ที่สร้างโปรตีนรูปแบบ 51 มีความต้านทานต่อโรคเต้านมอักเสบมาก • และยังพบว่าต้านทานต่อโรคไข้เห็บจากเชื้อ Anaplasma ด้วย
Genomic DNA MgCl2 10X buffer dNTPs Primers (HLO30,HLO32) ddH2O PCR - RFLP Step I. ตรวจหายีน DRB3 ด้วยวิธี PCR 94 oC for 30 s, 64 oC for 45 s, 72 oC for 45 s Taq DNA polymerase PCR-Products
M 1 2 3 4 5 300 bp 280 bp PCR - RFLP การเพิ่มชิ้นยีน BoLA-DRB3 ด้วยวิธี PCR
, 3 ชม. 37 oC , 3 ชม. 60 oC PCR - RFLP Step II. ตัดด้วยเอ็นไซม์ Rsa I Hae III PCR-Products BstY I
PCR - RFLP Step III. ตรวจหารูปแบบ 51 ซึ่งต้านทานโรคเต้านมอักเสบและไข้เห็บ
มียีนเครียดแฝงอยู่ ปกติ เครียดง่าย ตรวจสอบยีนต้านทานโรค/ความผิดปกติทางพันธุกรรม ยีนเครียดในสุกร สัตว์ปกติ/เครียดง่าย เมื่อใช้เอ็นไซม์ตัดแล้วจะได้รูปแบบต่างกัน N = ปกติ n = เครียดง่าย 600bp 400bp 200bp Nn NN Nn Nn nn nn NN NN Nn NN Nn nn nn nn Nn nn
ยีนที่มีการศึกษาและทดสอบแล้วยีนที่มีการศึกษาและทดสอบแล้ว • HAL Halothane gene (ยีนเครียดในสุกร) • IGF2(%เนื้อแดง) • Estrogen Receptor (ยีนลูกดกในสุกร) • MC4R (%ซากสุกร) • Napole (นุ่มเนื้อในสุกร) • BoLA(ยีนต้านทานโรคเต้านมอักเสบ) • Kappa casein gene (ยีนโปรตีนและน้ำนม)
ยีนที่มีการศึกษาและทดสอบแล้วยีนที่มีการศึกษาและทดสอบแล้ว • DGAT (ยีน marbling ในโคขุน) • Myostatin (%เนื้อแดงในโคขุน) • Calpain(ความนุ่มเนื้อ) • Boorula (ยีนลูกดกใหแพะแกะ)
1% Chr.w QTL linked marker SSC1 MARBLING Line-Cross QTL position 4.5 4.0 3.5 -logP 3.0 2.5 2.0 1.5 1.0 0.5 0.0 cM 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 120 130 marker ที่ควรนำไปใช้ ในการคัดเลือก = gene marker
3 DNA ผู้ต้องสงสัย 7 DNA จากเหยื่อ S1, S2, S3 ใครเป็นคนร้าย ?
1 2 3 4 วิเคราะห์พันธุ์ประวัติ(Pedigree analysis) ลองหาความสัมพันธุ์ของ 1,2,3 and4
monchai@kku.ac.th http://agserver.kku.ac.th/monchai Tel. 081-8724207
