1.2 基因工程的基本操作程序

1.2 基因工程的基本操作程序

四个基本步骤： 1）目的基因的获取 2）基因表达载体的构建 3）将目的基因导入受体细胞 4）目的基因的检测与鉴定

一、目的基因的获取 编码蛋白质的基因 • 目的基因主要是指______________________ • 获取目的基因的常用方法 ①从基因文库中获取 ②利用PCR技术扩增目的基因 ③通过DNA合成仪用化学方法直接人工合成

（一）从基因文库中获得目的基因 1.基因文库的概念及分类将含有某种生物不同基因的许多DNA片段，导入到受体菌的群体中储存，各个受体菌分别含有这种生物的不同基因，称为基因文库。基因组文库基因文库部分基因文库（如:cDNA文库）

2.基因文库的构建方法 (1)基因组文库----含该生物的所有基因供体细胞中的DNA 目的基因限制酶分离产生特定性状许多DNA片段与载体连接受体细胞运载体导入

基因组文库的构建 IMN

(2)cDNA文库的构建（反转录DNA） 目的基因的mRNA 反转录酶杂交双链 (单链RNA/单链DNA) 核酸酶H 单链DNA DNA聚合酶双链DNA (目的基因)

（二）利用PCR技术扩增目的基因

（二）利用PCR技术扩增目的基因 ① 概念：PCR全称为_______________，是一项在生物____复制_____________的核酸合成技术多聚酶链式反应体外特定DNA片段 DNA复制 ②原理：__________ 四种脱氧核苷酸模板DNA ③条件：___________、 _______________、___________ 、 ___________ DNA聚合酶一对引物 ④方式：以_____方式扩增，即____（n为扩增循环的次数）指数 2n ⑤结果：使目的基因的片段在短时间内成百万倍地扩增

IMN 过程：变性、退火、延伸三步曲高温变性中温延伸低温退火

(三). 通过DNA合成仪用化学的方法直接人工合成 IMN 基因_____，核苷酸序列______ 。较小已知

1.2 基因工程的基本操作程序

1.2 基因工程的基本操作程序

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