کاربرد تکنیک نجات جنین در تلاقی های بین گونه ای و درون گونه ای

2. کاربرد تکنیک نجات جنین در تلاقی های بین گونه ای و درون گونه ای

3. مطالب مورد بحث • معرفی تکنیک نجات جنین • اهمیت آن در اصلاح نباتات • نمونه ای از استفاده این تکنیک در تلاقی های ناسازگار

4. معرفینجات جنین • ایجاد گیاهی با قابلیت زنده ماندن از یک جنین نابالغ یا ضعیف • امکان قرار گرفتن جنین، تخمک کامل یا تخمدان در محیط کشت • محیط کشت غذائی مصنوعی جایگزینی برای اندوسپرم • مرحله نموی جنین و ترکیب محیط کشت، عوامل تولید موفق گیاه از جنین های کشت شده

5. کاربرد در اصلاح نباتات • اصلاح گیاهان از طریق هیبریداسیون و انتخاب • توسعه هیبرید از تلاقی های ناسازگار • تولید گیاه از جنین هایی با ضعف ذاتی • به دست آوردن گیاهان هاپلوئید • کوتاه کردن دوره های اصلاحی

6. بررسی اثر سن تخمک روی کشت برشی از تخمدان و کشت تخمک در تلاقی های بین گونه ای و درون گونه ای در Tulipa gesneriana L.

7. امکان توسعه واریته های T.gesnerianaبه وسیله معرفی صفاتی چون مقاومت به بیماری و دوره گلدهی کوتاهتر • نفوذ لوله گرده به تخمک در تلاقی بین T.gesnerianaو دیگر گونه های لاله • تشکیل جنین پس از نفوذ لوله گرده • مرگ ناگهانی جنین ها و یا نمو کند آنها همراه با اختلال در اندوسپرم • عدم تشکیل هیبرید به علت محدودیت های پس از لقاح

8. استفاده از کشت تخمدان، کشت برشی از تخمدان، کشت تخمک و کشت جنین به منظور نجات جنین • تاثیر مرحله نموی جنین و تکنیک به کار رفته بر تعداد جنین های بازیابی شده • افزایش تعداد جنین های بازیابی شده از کشت تخمک در یک مرحله نموی زودتر نسبت به کشت جنین

9. اهداف • ارائه نتایج آزمایشاتی با تکنیک کشت برشی از تخمدان و کشت تخمک در لاله • مقایسه راندمان کشت مستقیم تخمک و کشت برشی از تخمدان در تاریخ های متفاوت کشت پس از گرده افشانی • انجام تلاقی های داخل گونه ای و بین گونه ای با استفاده از T.gesnerianaبه عنوان ژنوتیپ مادری

10. مواد گیاهی و روش گرده افشانی • T.gesneriana: Christmas Marvel, Leen van der Mark • T. Praestans • T.agenensis • T. kaufmanniana • T. altaica

11. کاشت پیاز گل ها در سپتامبر-اکتبر در سطحی هموار • ذخیره سازی در دمای 9-5 درجه به مدت 18-15 هفته • قرار دادن گیاهان در گلخانه در ژانویه-مارس در دمای 17-15 درجه • گلدهی پس از دو تا سه هفته • اخته کردن گل ها حدود دو روز قبل از شکفتن • آمادگی کلاله 2-1 روز پس از شکفتن و گرده افشانی با گرده تازه

12. Christmas Marvel Leen van der Mark

13. آزمایشات

14. T.gensneriana T.agenensis T. Praestans T. altaica T. kaufmanniana

15. مطالعه 4 تلاقی بین گونه ای با استفاده از T.gensneriana به عنوان ژنوتیپ مادری • آغاز کشت برشی از تخمدان در 3 و 5 WAP • آغاز کشت تخمک 6 یا 4 هفته بعد(9 WAP) • کشت مستقیم تخمک در 5،3 و 7WAP در تلاقی با T.agenensis

16. تیمارهای گیاهی • جمع آوری تخمدان ها در 9-2 WAPو قرار دادن آنها در اتانول 75 % به مدت یک دقیقه • شستشو به مدت 20 دقیقه با سفید کننده حاوی 2% کلرین و سپس شستشو با آب مقطر استریل • برش تخمدان ها به صورت اریب به 8 بخش جهت کشت برشی از تخمدان

17. قرار گیری 4 برش تخمدان در هر پتری دیش • قرار گیری 50 تخمک در هر پتری دیش • قرار دادن کشت ها در دمای 15 درجه تا 17-16WAP • قرار دادن در 5 درجه برای القاء جوانه زنی • انتقال پتری دیش ها به 15 درجه در 29-28 WAP • انکوبه شدن کشت ها در تاریکی

18. ترکیب محیط کشت ترکیبات آلی و غیر آلی ½ MS + ویتامین ها و میواینوزیتول MS

19. کشت تخمک در برابر کشت برشی از تخمدان همراه با کشت تخمک

20. تلاقی های بین گونه ای

21. نمو جنین در یک تلاقی سازگار

22. نتایج • تشابه یا برتری نتایج کشت برشی از تخمدان نسبت به کشت مستقیم تخمک • افزایش درصد جوانه زنی جنین ها در پی افزایش سن جنین در آغاز کشت برای تلاقی های سازگار • تعداد کم جنین های بازیابی شده در تاریخ های کشت زود به علت نرخ بالای سقط جنین