三聚氰胺的检测

1. 三聚氰胺的检测 组员:张杰 朱建炎 PPT:裘艳群

2. 三聚氰胺是一种合成有机含氮杂环化合物，含氮量很高（66%）。不法生产商为了降低生产成本，提高经济效益而添加这种化工原料。三聚氰胺是一种合成有机含氮杂环化合物，含氮量很高（66%）。不法生产商为了降低生产成本，提高经济效益而添加这种化工原料。

3. 检测方法 1、酶联免疫法检测 2、胶体金免疫层析法检测

4. 酶联免疫法检测 酶联免疫的测定是将抗原-抗体反应的特异性与酶催化作用的高效性相结合，借助酶作用于底物的显色反应判定结果，用酶标仪做定性或定量分析。 优点：敏感性高，特异性强，可定量、定性。

5. 竞争性酶联免疫 样品中的抗原和已标记的抗原一起加入已固定的已知抗体中，两种抗原竞争性的结合在抗体上。样品中抗原越多，则样品中的抗原与抗体结合上的就越多；反之，则越少。

6. 洗脱液

7. 实验的一般流程 标准品、样品、工作液 编号 加试剂 洗板 测定 显色 加酸，终止反应

8. 用竞争性酶联免疫法检测三聚氰胺 • 首先将三聚氰胺HRP标记物、标准样及测试样提取液加人到已经标记且包被有三聚氰胺抗体的微孔中进行反应。 • 在反应过程中，样品中的三聚氰胺与三聚氰胺H R P标记物竞争结合微孔中的三聚氰胺抗体。 • 反应达到平衡后洗去微孔内多余的未结合的三聚氰胺和三聚氰胺H R P标记物。 • 再加人酶的底物，底物被酶催化成为有色产物。 • 加酸终止反应。 • 用酶标仪读取450nm下的吸光值。

9. 检测结果分析 有色产物的量与样品中三聚氰胺的量直接相关，样品中三聚氰胺的含量与样品吸光值成负相关。 即： 样品与标样混合加入孔中，一定量的抗体只能结合一定量的抗原。若样品中三聚氰胺的含量少，即标样中三聚氰胺的含量相对较多，结合上去的就较多，则有色产物更多，即吸光值A就越大。

10. 胶体金免疫层析法检测 （GICA） 是近年来发展迅速的一项免疫标记技术。它以抗原抗体特异性结合为基础、 大孔径微孔滤膜为载体、 胶体金为固相标记物来定性检测样本中的待测物质。 因快速、 便捷， 逐渐广泛应用于食品中有害物质的残留检测中。

11. 胶体金检测原理 抗金标抗体（抗IgG） 包被抗体 阳性 阴性 无效 金标抗体（免疫金） 毛细作用 抗原

12. 用GICA来检测牛奶中的三聚氰胺 采用胶体金免疫层析法对牛奶中的三聚氰胺残留进行检测， 灵敏度较高；特异性强， 与牛奶中常见的其他抗生素不发生交叉反应； 准确度高， 检测结果与液相色谱-串联质谱法基本一致； 操作简单， 牛奶样品无需前处理， 可直接检测， 缩短了检测周期， 提高了检测效率 。