动物解剖及动物的形态结构观察技术施时迪

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实验一 组织、胚层、体腔的演化通过观察四大组织、腔肠动物（水螅）、扁形动物（涡虫）、环节动物（蚯蚓）的玻片标本，了解动物组织、胚层和体腔的演化过程。

第一部分动物的四类基本组织一、教学目的 了解动物体四类基本组织的形态结构及其功能。二、试剂与器材显微镜，四种组织的玻片标本（小肠、食道、膀胱、甲状腺、皮肤、心肌、骨骼肌、肌腱、疏松结缔组织、软骨、硬骨、脊髓、小脑皮质、大脑皮质等组织切片）。

三、步骤 （一）上皮组织观察 1．被覆上皮：（1）单层柱状上皮：小肠上皮由一层较高的棱柱形细胞并行排列组成，细胞核椭圆形，位于细胞基部。柱形细胞之间，可见细胞游离端染色很浅，细胞核位于基部的杯状细胞，且杯状细胞常因生理变化而有形态改变。小肠上皮细胞的游离端有明显的纹状缘。

（2）单层立方上皮 甲状腺切片标本在显微镜下观察，其滤泡上皮细胞，大致呈正方形，细胞核呈圆形，位于细胞中央，或略偏基部。

（3）复层扁平上皮 食道切片标本食道腔周围的细胞由数层组成，游离面的细胞为扁平状，中间部分呈多角形，底部细胞近短柱状。再取皮肤玻片标本观察，它与食道的复层扁平上皮又有何区别？

（4）变移上皮 膀胱玻片标本可见其表面的细胞体积大、呈扁平或梨形等多种形态，部分细胞有2个核。深层细胞多呈多角形，且较小，底层细胞呈矮柱状。这种上皮的细胞层数与细胞形态，可随膀胱的生理状态的改变而改变。

（二）结缔组织观察 结缔组织是动物体中种类多，结构复杂，分布最广的组织。 1．疏松结缔组织疏松结缔组织的铺片标本胶原纤维被染成浅红色，呈束状，且波纹状分散于基质内，交互排列; 弹性纤维混杂在胶原纤维之间，染成深紫色，不成束，彼此交叉的细纤维; 组织中还有细胞质着色很浅，细胞核染成兰色，形态难于区分的各类细胞: 成纤维细胞紧贴于胶原纤维束，细胞呈多突起，扁平状，细胞核大而卵圆形的细胞; 巨噬细胞或称组织细胞, 染色质颗粒较粗，着色较深，胞核较小的,这种细胞具有吞噬能力，因此有防卸功能。

2．致密结缔组织： 腱的纵切标本可见大量平行排列的胶原纤维束，成纤维细胞成行排列在纤维束之间，细胞体成长方形，细胞核近圆形。

3．软骨组织： 透明软骨玻片标本大部分的底质染成相同的均匀颜色，这是软骨的基质，基质中有许多圆形或卵圆形的陷窝，称为胞窝。常常可见2个或4个胞窝并列在一起，胞窝内有软骨细胞，胞核染色较深，呈椭圆形，细胞质染色浅。标本固定后，细胞收缩，胞窝可见到空隙。组成软骨的纤维是胶原纤维，但在基质中未见到，因为透明软骨的胶原纤维的折光率与基质相同，因而活体时透明，固定染色后不能看到。

4．骨组织 长骨横切磨片标本许多不规则圆形或椭圆形的同心环状结构——哈弗氏系统（Haversian system），中间的空腔——哈弗氏管（Haversian canal），为神经、血管的通道。在哈弗氏系统之间为不规则的骨间板（interstital lamellae）。哈弗氏管之间及内、外环骨板之间斜行的，没有骨板环绕的导管——浮克曼氏管（Volkmann’s canal），即横向的血管。哈弗氏系统骨板间的梭形裂隙为骨陷窝（lacuna），骨细胞存在其中。骨陷窝之间有大量的骨小管，多数的骨小管与骨板垂直。骨细胞，借着骨小管，与哈弗氏管内的血管进行营养物质和代谢产物的交换。

（三）肌肉组织观察 肌肉组织是由特殊的肌细胞（muscle cell）构成。肌细胞细而长，呈纤维状，故亦称肌纤维（muscle fiber）。根据肌纤维的形态和功能，可将肌肉组织分为：平滑肌（smooth muscle）、横纹肌（skeletal muscle）和心肌（cardiac muscle）。

1．平滑肌 小肠横切标本低倍镜：找到肌层（以苏木素‑‑‑‑伊红染色，肌层为深红色）。肌层由内环行和外纵行的平滑肌纤维组成。高倍镜：内层肌纤维呈长梭形，彼此镶嵌排列成环行。胞核兰紫色，呈椭圆或棒状。外层的纵肌，因平滑肌纤维是镶嵌排列的，所以在横切面上切到的肌纤维并不都在一个平面上，故有的有核，有的无核，且大小也各不相同。

2．骨骼肌骨骼肌玻片标本 低倍镜：骨骼肌的肌纤维集合成束，每束肌纤维由结缔组织膜分隔，这个膜称为肌束膜（perimysium）。如标本切得较完整，还可看见肌内膜（endomysium）和肌外膜（epimysium），前者为分隔每条肌纤维的结缔组织膜，后者是包围整个肌肉组织的结缔组织。高倍物镜：骨骼肌纤维呈长圆柱形，有许多核，位于肌纤维的周边，呈卵圆形。将视野光强度调暗些，可见每条纤维上有明暗相同的横纹，这就是明带（Light band）和暗带（dark band）。油镜：明带中有一条极细的黑线把明带均分为二，这就是Z盘（Z-band），在暗带中也有一条明暗的线条，这就是H盘（H-band）。

3.心肌 • 心肌的单位是单核与分支的纤维，在生理上的特点是具有节律性的收缩，而且这种收缩运动，不受意识控制，所以，心肌是不随意肌。 • 心肌纤维的胞核呈圆形或椭圆形，位于纤维中央，一般为1-2个。 • 肌原纤维较骨骼肌少，故肌质较多，因而纵纹较骨骼肌明显，而横纹较弱。 • 心肌纤维彼此衔接处，具有强折光性的阶梯状横线，称为闰盘（intercalated disk）它比明暗带宽得多。 • 取心肌的切片标本，在显微镜下详细观察，并比较心肌与骨骼肌和平滑肌在形态结构方面的异同点。

（四）神经组织 1.脊髓切片标本 • 低倍物镜：中央染色较深的部分是灰质（grey matter），蝴蝶状，中间的小孔是中央管（central canal）。蝴蝶形区域比较狭窄的突起为后角（posterior horn）（即背角），较宽的突起为前角（anterior horn）（即腹角）。包围在灰质周围，染色较浅的部分为白质（white matter）。 • 高倍镜：灰质前角可见形态不同，大小不一的神经细胞，有一个囊泡状的大核。胞体向外突的部分，为胞突。 • 如何分树突与轴突？

2.小脑切片标本 • 表面的皮质（灰质）、中间的髓质（白质）。 • 皮质部分明显分为三层：最表面一层为细胞少的分子层（molecular layer），中间为蒲金野氏细胞层（Purkingje’s cell layer），内层为颗粒层（grannular layer）。 • 蒲金野氏细胞层，由梨形的大细胞组成。其细胞有粗大的树突，分枝繁多，伸向分子层。在蒲金野氏细胞的底面有一条细胞的轴突，它经过颗粒层伸入髓质部。

3.大脑切片标本 • 大脑皮质部分着色最浅的一边。 • 皮质的细胞分为锥体细胞（pyramidal cell）、颗粒细胞（grannular cell）和梭形细胞三大类。 • 锥形细胞最多，分为大、中、小三型：在切片中，细胞体呈圆锥形（切面呈三角形）的细胞为锥形细胞，从胞体顶端伸出，向皮质表面伸展的为顶树突；胞体基部两侧伸出较细的树突，即基树突；胞体基底发出一条细而或长或短且伸向髓质的为轴突。

四、注意事项 • 观察标本时，应按照不同组织循序观察，并注意比较不同组织类型的差异； • 观察时，需注意辨别因标本染色、保存等环节造成的人为假象。

五、结果表述 • 对实验中所观察的每一种组织类型都需要掌握； • 观察时，结合课件中所提问题，进行认真思考，达到举一反三的效果； • 熟练使用显微镜观察不同形式、不同染色效果的标本，并达到良好的观察效果。

六、作业与思考题 1．绘一段小肠上皮。 2．总结四类基本组织的结构特点与主要功能。

第二部分水螅、涡虫、蚯蚓形态结构观察 一、教学目的通过观察腔肠动物、扁形动物、环节动物的代表种类的内部结构，从而了解动物胚层、体腔的演化过程。

二、试剂与器材 • 水螅带芽整体装片、水螅横切面和纵切面玻片标本、水螅过精巢和过卵巢横切面玻片标本； • 涡虫示神经系统整体装片和涡虫示生殖系统整体装片玻片标本、涡虫横切面玻片标本。 • 环毛蚓横切面玻片标本。

三、步骤 （一）水螅玻片标本的观察 1．水螅带芽整体装片、水螅具精巢和卵巢的整体装片的观察 • 低倍镜：芽体、精巢和卵巢在体壁上的生长位置。 • 水螅的无性生殖和有性生殖会同时进行吗？

2．水螅纵切片和横切片的观察 （1）外胚层（皮层） • 外皮肌细胞：体壁外侧见到的较大且细胞核清晰、数目最多的柱状细胞。 • 间细胞：在皮肌细胞之间靠近中胶层处，有些小型的且数个堆在一起的细胞。 ★它们有何功用？ • 刺细胞：中央包含有染色较深的圆形或椭圆形囊的细胞，其囊叫刺丝囊。 • 感觉细胞：它们与神经细胞相联。 • 神经细胞在外胚层基部，紧贴中胶层，因较为稀疏，需仔细寻找。

（2）中胶层 • 薄而透明，夹在内外胚层之间 • 是由内外胚层细胞分泌的一层非细胞结构的胶状物质。

（3）内胚层（胃层） • 内皮肌细胞：数目最多、细胞大、核清晰，细胞内常含有许多染色较深的食物泡。 • 腺细胞：数目较多的，散布在皮肌细胞间，长形，游离端常膨大并含有细小的深色分泌颗粒。 • 感觉细胞和间细胞：少数。

3．水螅过精巢和卵巢横切片的观察 • 成熟水螅精巢的横切片，切面上精巢近似圆锥形，由内向外依次是精母细胞、精细胞和成熟的精子。 • 成熟水螅卵巢的横切片观察，卵巢为卵圆形，成熟的卵巢里一般只有1个卵细胞，其余是营养细胞。 • 但处在不同发育期的精巢和卵巢，其内部生殖细胞发育程度亦有不同。 • ★精巢和卵巢是从哪个胚层分化出来的？

（二）涡虫整体装片玻片标本的观察 1．示神经系统的涡虫整体装片 • 低倍镜：可见体前端有1对神经节组成的“脑”，由此沿身体两侧后行有2条纵神经索，索间有许多横神经连接，似梯形，“脑”发出神经到眼、耳突各部。 • 涡虫神经系统和感觉器官比较集中和发达，与其生活方式及两侧对称体型有何相关性？

2．生殖系统 • 雌雄同体。 • 雌性生殖器官：虫体前端两眼点后方有1对卵巢，深色，圆形。两卵巢各有1条输卵管沿身体两侧向后行，在咽后方汇合通入生殖腔。生殖腔前方有一椭圆形的受精囊也通入生殖腔。两输卵管外侧还有许多颗粒状的卵黄腺。 • 雄性生殖器官：虫体两侧与输卵管平行有许多圆球形精巢，每精巢由一输精小管（不易看清）通入1对输精管，输精管在咽两侧膨大贮精囊；贮精囊在生殖腔前方汇合成阴茎，阴茎通入生殖腔。生殖腔有生殖孔通体外。 • 固定生殖腺和生殖导管的形成有何进化意义？

（三）涡虫横切面玻片标本的观察 • 涡虫横切面背面隆起，腹面扁平，为三胚层无体腔动物。 1．外胚层 • 为体壁最外一层排列紧密的柱状上皮细胞，其间夹有的色深、条状结构为杆状体，★杆状体有何功用？ • 还可看到一些向里层（中胚层）深入的囊状、含深色颗粒的单细胞腺及其通向体表的部分管道。 • 高倍镜：腹面表皮细胞具纤毛，表皮细胞的基底为一薄层基膜。

2．中胚层 • 中胚层形成肌肉组织和实质组织。镜下可见紧贴基膜内侧的环肌，环肌内侧为纵肌，它们与表皮共同构成体壁即皮肌囊。 • ★皮肌囊有何功能意义？ • 此外，在横切面的背腹体壁间还可见到背腹肌纤维。在体壁与消化管之间充满呈网状、含有许多黄色小泡的结构，为中胚层实质组织，无体腔。 • ★实质组织有何功能？中胚层的出现有何意义？

3．内胚层 • 切片中间可见到几个小空腔，即为肠腔； • 肠壁为单层柱状上皮细胞，是内胚层形成的消化管。 • ★根据横切面上所见到的肠断面的数目，能否确定所观察的涡虫横切面取材于身体的何部位？说明理由。

（四）环毛蚓横切面玻片标本的观察 1．体壁 • 体表为一薄层非细胞构造的角质膜，其内侧为表皮层，主要由单层柱状上皮细胞组成。 • 表皮之内是体壁肌肉层，可分为外层较薄的环肌和内层较厚的纵肌。 • 紧贴于纵肌层之内的是由扁平细胞构成的壁体腔膜。 • 有时可见到刚毛自体壁伸出体表。 • 蚯蚓身体能如何运动？为什么？

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