動物實驗相關討論

動物實驗相關討論 邵国青江苏省农科院兽医研究所210014 南京84391973@163.nethttp://www.piginfo.com

人们总是不习惯变化，但只有变化才能带来进步人们总是不习惯变化，但只有变化才能带来进步－－富兰克林

实验动物的选择和动物实验的准备

选择实验动物应注意的问题 • 年龄与体重 • 大多实验都选择成年实验动物 • 同一实验中动物体重尽可能一致 • 性别 • 雌性动物对药物的敏感性高于雄性 • 通常选择实验动物应雌雄各半。 • 健康状况 • 品系与等级 • 动物按遗传学控制和微生物控制的标准化条件

动物实验的准备 • 实验的准备 • 确定实验目的、实验规模、实验周期 • 动物实验设计 • 遵守临床实验设计三原则：随机化、重复、对照 • 有时最后采用双因素方差分析，用双盲法或采用双因素方差分析 • 提前1周说明需要提供的实验器械及有关实验条件 • 天实验设计 • 动物的购入 • 提前预约，普通动物实验提前3天，SPF级动物实验提前7天预约 • 消毒猪舍

HVT-013在被免疫鸡群和鸡群环境中的扩散试验计划HVT-013在被免疫鸡群和鸡群环境中的扩散试验计划 • 目的：检测HVT-013在被免疫鸡群和鸡群环境中的扩散情况 • 试验开始时间： 2006年03月10日 • 试验结束时间：2006年05月06日 • 试验结束地点：南京市江宁区华希家禽养殖场 • 饲养方式：地面垫料平养

1．试验准备工作 2006年03月10日前做好： • 1．1 鸡场鸡圈准备： • 1.1.1 隔离3个鸡圈，编号PEN1(圈1)、PEN2(圈2)、PEN3(圈3)。 • 1.1.2 消毒生石灰喷洒。试验鸡入圈前3天固体福尔马林熏蒸。 • 1.2 加温设备：木屑炉，装好排烟管道。 • 1.3 饮水设备：柏拉松饮水器 • 1.4 喂料设备：盘式塑料喂料器 • 1.5 保健药品：复合维生素，泰乐菌素等。 • 1.6 注射器： 2ml 连续注射器、2ml一次性注射器。 • 1.7 标记圈: 自制彩色标记圈。 • 1.8 垫料：木屑 • 1.9 饲料: 淮阴正大肉鸡颗粒饲料。 • 1.10 饮水: 自来水。 • 1.11 供试鸡: 安徽广德和威公司种鸡场提供一日龄马立克非免三黄肉鸡2000只，于2006年03月10日送到养殖场 • 1.12 供试药品 Three batches of VAXXITEK HVT IBD • 1.13 实验记录用表格

2．试验方法 • 2.1 分组将2000只1日龄鸡群作如下分组： • G1 & GC1: • G1: 500只，用于注射VAXXITEK HVT IBD-001 • GC1：150只不免疫，做好标记并混合到G1组中。 • G2 & GC2: • G2: 500只，用于注射VAXXITEK HVT IBD-002 • GC2：150只不免疫，做好标记并混合到G2组中。 • G3 & GC3: • G3: 500只，用于注射VAXXITEK HVT IBD-003 • GC3：150只不免疫，做好标记并混合到G3组中 • G4: 50 ，其中25只用于采集血清，另25只用于采集白细胞

2．试验方法 2.2免疫 • 2.2.1 疫苗稀释 • 疫苗VAXXITEKHVT IBD-001，002，003马立克稀释液各1支 • 注射 • 1日龄时，用连续注射器将稀释后疫苗进行如下注射 • 群组G1G2G3疫苗分别颈部皮下0．20ml • 入圈 • PEN1－－G1 & GC1；PEN2－－G2 & GC2；圈3－－G3 & GC3

饲养 56天全程饲养，不转群 • 温度 1日龄33度，以后每天降低0.5度。第四周后温度控制在21－24度。 • 湿度控制在50－70％范围 • 光照 23小时连续光照，1小时黑暗。 • 饲喂自由采食 • 保健 1－3日龄，饮水中加复合维生素、庆大霉素。除MD、IBD不免外，其他免疫按正常肉鸡饲养免疫程序进行（如8日龄饮水免疫ND+IB. 12日龄免疫H5N1灭活疫苗。） • 其他饲养事项按商品肉鸡饲养程序进行。 • 采样

鸡群观察 • 精神状况 • 神经症状 • 死亡率 • 拉稀现象（IBD症状） • 填好《日记录表》 • 样品处理和保存按《protocol-HVT-013 environmental release trial》要求进行

记录表格 • 饲料营养成分表 • 疫苗注射登记表 • 鸡只死亡登记表 • 死亡鸡解剖和取样登记表 • 鸡群日常记录表

MG Research plan 200606

实验描述 名称、背景、规格，饲养条件

1.实验动物名称 准确、规范描述实验动物的品种或品系名称避免使用通俗称谓，如SD大鼠不能写成SD大白鼠，更不能简写成大白鼠，KM小鼠不能写俗称小白鼠。

2. 动物背景资料 动物从何获得遗传学分类（近交系、远交系、突变系、封闭群、杂交群）中的哪一类属于微生物分级（普通级、清洁级、SPF级、无菌级）动物的合格证号及颁发合格证的单位。

动物规格：论文中应准确描述实验所用动物的数量、性别、体重、年龄等。动物规格：论文中应准确描述实验所用动物的数量、性别、体重、年龄等。

4．动物实验条件 动物饲养方式（饲料种类、营养成分、饲喂方式、饮水方式、饲养密度、笼具及垫料种类）实验观察环境（如温度、湿度、照度、噪音、环境洁净度、通风换气方式等）动物饲养环境级别，相应级别实验条件使用合格证号及颁布单位

5 . 处理方式： 使用麻醉剂的种类、剂量与方法，动物的处死方法等均应注明。

性别例：材料和方法实验动物：BALB/c（nu-nu）裸鼠20只，18-22g，雌雄各半，由四川大学实验动物中心提供。动物质量许可证：川实动管第01号。实验鼠在SPF条件下饲养，饲喂全价小鼠颗粒饲料，自由采食和饮水。实验方法：****************************************。实验第7天，颈椎脱臼处死动物，***。动物名称遗传背景动物数量和体重动物来源动物质量资料处死方法实验饲养条件

基本操作方法

编号标记 耳缘剪孔 • 上1下3 颜料涂染 • 常使用，方便，编号原则：先左后右，从上到下烙印法 • 用刺数钳在耳上刺号，黑墨涂抹号牌法 • 牌号固定于耳，大动物可系于颈上。 • 大动物有时只记录外表和毛色

给药途径和方法 （一）皮下注射（二）皮内注射（三）肌肉注射（四）腹腔注射（五）静脉注射（六）淋巴囊注射（七）经口给药（八）其它途径给药

采血方法 耳静脉割（剪）尾采血颈动脉采血颈静脉采血

处死急性大失血法化学致死法脊椎脱臼法断头法击打法

实验时，善待动物遵守实验规章制度抓取固定注意自身安全防护实验时，善待动物遵守实验规章制度抓取固定注意自身安全防护

实验养猪 • 最好的“药物”是营养平衡的饲料 • 把握温度，把握猪群 • 采购饲料的唯一准则：多花一分钱进好货 • 你不喜欢吃就不要给猪吃 Health must be “between the ears”and does not allow compromises

总结 • 动物实验变化：质量，硬件，管理，描述 • 试验设计：原理－－－目的 • 随机，重复，对照 • 标准化：试验动物平台－－国际接轨 • 动物福利：尊重每一个人 • 尊重动物 • 人与自然的和谐

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