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实验 十一 肝 功能测定

实验 十一 肝 功能测定. 教学要求. （一）掌握肝脏疾病生化实验诊断指标的应用及肝功能实验项目的选择。 （二）熟悉肝脏疾病的临床诊断。. 教学内容. （一） 肝脏疾病生物化学实验诊断指 标的检测。 （二） 肝脏疾病生物化学实验诊断指 标检测结果分析。. 一、肝功能物质代谢性指标. 二、主要肝胆疾病的指标. 反映肝实质细胞损伤的酶： ALT 、 AST 、 LDH 等 。 反映胆汁郁积的酶： ALP 、 GGT 、 5 ‘ -NT 等。 反映肝合成功能： CHE 、 PA 、 ALB 、 LCAT 等

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实验 十一 肝 功能测定

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Presentation Transcript

  1. 实验十一 肝功能测定

  2. 教学要求 （一）掌握肝脏疾病生化实验诊断指标的应用及肝功能实验项目的选择。 （二）熟悉肝脏疾病的临床诊断。

  3. 教学内容 （一） 肝脏疾病生物化学实验诊断指 标的检测。 （二） 肝脏疾病生物化学实验诊断指 标检测结果分析。

  4. 一、肝功能物质代谢性指标

  5. 二、主要肝胆疾病的指标 • 反映肝实质细胞损伤的酶：ALT、AST、LDH等。 • 反映胆汁郁积的酶：ALP、GGT、5‘-NT等。 • 反映肝合成功能：CHE、PA、ALB、LCAT等 • 反映肝纤维化的酶：MAO、B-PH等。 • 反映肝胆清除排泄功能 ：TBil、DBil、TAB等。 • 反映肝占位性病变：甲胎蛋白、癌胚抗原

  6. 三、实验项目的合理组合与筛选 1. 肝细胞损伤：AST、ALT、DBIL等。 2. 肝细胞合成：CHE、ALB等。 3.辅助判断肿瘤：甲胎蛋白、癌胚抗原。 4. 排泄功能： TBil、DBil、TAB等 5.胆道：GGT、ALP等。

  7. 本次实验项目 • 丙氨酸氨基转移酶（ALT) • 总胆红素(TBil) • 直接胆红素(DBil)

  8. 疾病类型 ALT TBil DBil ALP TP ALB 急性肝炎 ↑↑ ↑↑ ↑↑ ↑ N N 慢性肝病 ↑ ↑ ↑ N↑ N N 肝硬化 N ↑ ↑N ↑ N↑ 肝肿瘤 ↑ ↑ ↑↑ ↑ 胆汁郁积 ↑ N N ↑ N N 肝病时血清检测指标的改变 注：N表示正常　 ↑表示升高

  9. 四、肝功能实验的评价 合理解释肝功能结果很重要！ 　 要注意肝功能实验的： 1.非特异性 2.局限性 3.实验结果的不灵敏性 4.实验结果的不准确性

  10. 五、实验方法与步骤

  11. 一、丙氨酸氨基转移酶（ALT）测定 化学法（赖氏法、金氏法） 卫生部临检中心推荐 （不加磷酸吡哆醛） 连续监测法 AACC、IFCC推荐（加磷酸吡哆醛）

  12. ALT L-丙氨酸＋α-酮戊二酸 丙酮酸＋L－谷氨酸 LDH 丙酮酸＋NADH ＋H+ L-乳酸＋NAD+＋H2O 在340nm处连续监测NADH的消耗量，OD下降速率与血清中ALT活力成正比。 （一）测定原理

  13. （二）试剂组成 R1：Tris缓冲液(PH8.5) 0.1M NADH 0.30mM LDH ≥5.0KU/L L-丙氨酸 1020mM R2：ａ-酮戊二酸 36mM

  14. （三）操作方法 1.操作参数： 波长：340nm 温度：37℃ 测定模式：连续监测法 延迟时间1min，测定时间1min K值：-4984 2.工作液的制备：R1与R2以2：1混合

  15. 样本管 蒸馏水 50ul 血清50ul 3.具体步骤： 空白管 工作液 1.5ml

  16. △A∕分钟×VT ×1000 ALT(U∕L)= 6.22×1.0×VS =△A∕分钟×4984 4.计算：

  17. （四）注意事项 1.试剂空白在340nm处吸光度＞1.1A。 2. 高L-乳酸影响反应平衡，故不可溶血。 3.也不采用草酸盐，EDTA抗凝血浆。 4. 精密度：CV1.6％，准确度：ｒ=0.997， y=1.02X＋0.97，线性可达到1000U/L。

  18. （五）临床意义 1.参考范围8～40U/L 2. ALT测定的医学决定水平： (1)ALT＜20U/L，可排除肝细胞损害 (2)ALT在51-300U/L，待诊值。 (3)ALT＞300U/L,即肯定有肝细胞损害。 3.肝癌、肝硬化、病毒性肝炎、酒精肝、 脂肪肝等均可增高。

  19. DBIL、TBIL测定步骤（空白、标准、测定）

  20. 下次课内容 肾功能测定（尿素、肌酐）

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