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수혈 검사시약과 혈액형 검사법. DB. LEE. 1. 수혈검사 시약. 가 . ABO 혈청형 검사용 A 1 , B, O cells 1) A 1 , B cells * A1 형과 B 형 혈액을 0.85% 생리식염수로 각각 2-5% 혈구 부유액 제조 * 규칙항체인 항 -A, 항 -B 의 유무를 확인 2) O cell * O 형 혈액을 0.85% 생리식염수로 2-5% 혈구 부유액 제조 * 혈청 ( 혈장 ) 내 불규칙항체의 유무 확인. 1. 수혈검사 시약.

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Presentation Transcript

  1. 수혈 검사시약과 혈액형 검사법 DB. LEE

  2. 1. 수혈검사 시약 가. ABO 혈청형 검사용 A1, B, O cells 1) A1, B cells * A1형과 B형 혈액을 0.85% 생리식염수로 각각 2-5% 혈구 부유액 제조 * 규칙항체인 항-A, 항-B의 유무를 확인 2) O cell * O형 혈액을 0.85% 생리식염수로 2-5% 혈구 부유액 제조 * 혈청(혈장) 내 불규칙항체의 유무 확인

  3. 1. 수혈검사 시약 나. ABO 혈액형 검사용 항-A, -B, -A,B, -A1, -H 1) anti-A, anti-B * 고역가를 지니고 있는 사람의 혈청이나 동물(mouse)을 면역시켜얻은혈청으로 부터 제조 * anti-A는 trypan blue(청색)를, anti-B는 acriflavine(황색) 을 넣어 특유의 시약색상으로 나타남

  4. 나. ABO 혈액형 검사용 항-A, -B, -A,B, -A1, -H 2) anti-A1 lectine *아형 A1과 A2형을 구별하기 위해서 사용하는 시약 * Dolichos biflorus라는 식물의 씨앗에서 추출(식물응집소) 3) anti-H lectin * A형의 아형(A2, A3, Ax, Am, Ael), B형 아형과 강하고 규칙적인 반응을 보임⇒ 혈액형 아형 구별 * Ulex europeus라는식물의 씨앗에서 추출한 렉틴

  5. IgM항체에 의한 적혈구 응집 IgG항체에 의한 적혈구 응집 Rho, Kell, Kidd, Duffy, Diego, Ss A, B, H, I, P, MN, lewis

  6. ◈ 직접 쿰스법

  7. ◈ 간접 쿰스법

  8. 다. Rh혈액형 항혈청, 항인글로불린 시약 1) anti-D, -C, -c, -E, -e * 적혈구 세포막의 Rh-Hr 계열 항원의 유무를 감별하는 시약 * clone 항체를 EB virus형질 전환법 또는 세포융합법 기술에 의해 생산 * 일반적으로 D항원 검출용으로 monoclonal anti-D (IgM monoclonal 항체 + IgG polyclonal human항체)를 사용 2) 항인글로불린시약(anti-human globulin) * 토끼에 사람의 면역글로불린을 주입하여 생성된 항체 * polyspecific anti-IgG, C3d가 주로 사용

  9. 라. 항원.항체 반응의 증강제 1)IgG 항체가 피복(감작)된 적혈구의 응집을 증강시킴 2) albumin, polyethlene glycol(PEG), polybrene, pyrrollidone(PVP)

  10. 2. ABO혈액형 검사 가. ABO 혈액형검사 1) slide(plate)법 * 검체의 혈구농도 40-50% + anti-A, anti-B, anti-D ⇒ 응집유무 *

  11. 2) tube 법 가) 혈구형 검사 * 환자의 2-5% 혈구부유액 + anti-A, anti-B, anti-D ⇒ 3,400rpm 15초 또는 1,000rpm 1분 원심 ⇒응집유무 * 혈구형 검사의 판정

  12. 2) tube 법 나) 혈청형 검사 * 환자의 혈청(혈장)+ 2-5% A, B, O cell ⇒ 3,400rpm 15초 또는 1,000rpm 1분 원심 ⇒응집유무 * 혈청형 검사의 판정

  13. 3. Rh 혈액형 검사 가. Rh(D)형 검사 ◇ tube 법 * 환자의 2-5% 혈구부유액 + anti-D ⇒ 3,400rpm 15초 또는 1,000rpm 1분 원심 ⇒응집유무 * 검사술식과 결과판정

  14. 나. 약 D형(weak-D) 검사 : 간접쿰스검사(indirect Coombs test) 1) 검사방법 가) 1단계 ① test 시험관 : 환자의 2-5% 혈구부유액 + anti-D + 22% bovine albumin ② control 시험관 : 환자의 2-5% 혈구부유액 + 22% bovinealbumin 나) 2단계 * 각각의 시험관을 water bath (37℃/15-30분)에서 감작 다) 3단계 * 생리식염수로 3-4회 세척 후 혈구층만 남김+ 쿰스혈청 ⇒ 3,400rpm 15초 또는 1,000rpm 1분 원심 ⇒응집유무

  15. 2) 검사순서 도해 및 결과 판정

  16. Thank You !

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