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实验三 马杜霉素经口急性毒性试验. 【 目的 】 通过实验学习测定药物 LD 50 的方法、步骤和计算过程,了解药物急性毒性试验的常规方法。 【 动物 】 小鼠 30 只(体重 18 ~ 22g ,雌雄均可,应注明性别)。 【 药品与试剂 】 马杜霉素溶液。 【 器材 】 注射器及灌胃器、鼠笼、天平。. 【 方法 】( 采用改良寇氏法 )
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实验三 马杜霉素经口急性毒性试验 【目的】通过实验学习测定药物LD50的方法、步骤和计算过程,了解药物急性毒性试验的常规方法。 【动物】小鼠30只(体重18~22g,雌雄均可,应注明性别)。 【药品与试剂】马杜霉素溶液。 【器材】注射器及灌胃器、鼠笼、天平。
【方法】(采用改良寇氏法) 1.预试验:探索剂量范围及组间距:取小鼠8~10只,以2只为一组分成4~5组,选择组距较大的一系列剂量,分别以马杜霉素溶液灌胃,观察出现的症状并记录死亡数,找出引起0%及100%死亡率剂量的所在范围。各组剂量按等比级数排列 r:相邻两组剂量的比值;a: 最高致死量;b:最低致死量;n:设计的组数 2.预试及剂量分组情况: a= 240mg/kg b= 46mg/kg ; n=5 药物浓度:最高剂量组为1.2%,最低剂量组为0.23%;给药量:0.20ml/10g r =1.511 Xm=2.38
3:随机分组: • 随机区组设计 如将25只雌性小鼠随机分为5组。步骤为: a、小鼠编号、称重、按体重重新顺序。 b、随机区组设计。
原则:一般余数即为组别,0余数属最后一组。当同一区组内余数相同时,非0余数按顺序分配至未分配动物的首位组,0余数按顺序分配至未分配动物的末尾组,这样可以使每组动物的体重大致相近,减少实验误差。
4、正式试验 (1)按剂量缓慢灌胃!!!!! (2)记录结果。(全班共享)
5.LD50测定中应观察记录的项目: (1)实验各要素:动物性别、体重、给药剂量、药物浓度。 (2)给药后各种反应:潜伏期(从给药到开始出现毒性反应的时间);中毒现象及出现的先后顺序,开始出现死亡的时间;死亡集中时间;末只死亡时间;死前现象。
6.结果计算: • (1)按公式LD50=lg-1[Xm-i(Σp-0.5)]计算,求LD50。 • LD50=lg-1{Xm-i[Σp-(3-Pm-Pn)/4]} • 注:Xm为最大剂量组剂量对数值;i为相邻两组剂量比值的对数(相邻两组对数剂量的差值,lgr);p为各组动物死亡率(用小数表示,如果死亡率为80%应写成0.80);∑P:各组动物死亡率之总和
【注意事项】 • 药物称量、配制及给药的准确程度是本实验成功与否的关键。 • 实验过程中给药剂量一定要准确。 • 注意观察中毒症状及其发生时间、死亡时间。
【讨论题】 1、什么叫LD50?测定LD50的意义是什么?