80 likes | 176 Views
低离子聚凝胺技术. 原理 聚凝胺( Polybrene ),一种高价离子季胺盐多聚物,溶解后能产生很多正电荷,可以中和红细胞表面的负电荷,使红细胞之间距离减小,能引起 正常 红细胞 可逆性 的 非特异性 凝集。如果是 抗体致敏 的红细胞被聚凝胺凝集,则凝集 不可逆 。. 当溶液中缺少离子时,抗原抗体之间的静电作用力较强. 当溶液中离子增多时,抗原抗体之间的静电作用力减弱. 抗体. 抗原. 静电作用力. 非离子. 抗原. 抗体. 静电作用力. 离子. LISS( 低离子强度溶液 ) 的原理. 基本操作方法 1 、试管中加入待检血清或血浆 1 滴
E N D
低离子聚凝胺技术 原理 聚凝胺(Polybrene),一种高价离子季胺盐多聚物,溶解后能产生很多正电荷,可以中和红细胞表面的负电荷,使红细胞之间距离减小,能引起正常红细胞可逆性的非特异性凝集。如果是抗体致敏的红细胞被聚凝胺凝集,则凝集不可逆。
当溶液中缺少离子时,抗原抗体之间的静电作用力较强当溶液中缺少离子时,抗原抗体之间的静电作用力较强 当溶液中离子增多时,抗原抗体之间的静电作用力减弱 抗体 抗原 静电作用力 非离子 抗原 抗体 静电作用力 离子 LISS(低离子强度溶液)的原理
基本操作方法 1、试管中加入待检血清或血浆1滴 2、加入用LIM溶液配置的2~3的红细胞悬液2~3滴 3、摇匀,室温放置1分钟(时间长,效果好) 4、加Polybrene试剂1滴,混匀后3400rpm离心15秒 5、轻摇观察由Polybrene引起的红细胞非特异性凝 集,若未见红细胞凝集则需重做试验 6、加入1滴重悬液,轻摇观察结果 由Polybrene引起的非特异性凝集应在1分钟内完全散开,若是由免疫抗体引起的凝集反应则不会散开
患者 Polybrene 主侧 上海市血液中心血 次侧 献血者 聚凝胺(Polybrene)配血方法 室温放置 1 分钟 主次侧均 加聚凝胺
阳性 重悬液 上海市血液中心血 阴性 聚凝胺(Polybrene)配血方法 主次侧均 加重悬液 看结果 离心 聚凝胺引起红细胞非特异性凝集
经典操作方法 1、试管中加2滴待检血清或血浆,加1滴试剂红细胞 2、 加LIM溶液0.6毫升(或12滴)混匀,室温放置1 分钟 3、加Polybrene试剂2滴,混匀后3400rpm离心15秒 4、倒去上清液,轻摇观察由Polybrene引起的红细胞 非特异性凝集,若未见红细胞凝集则需重做试验 4、 加入1滴重悬液,轻摇观察结果 由Polybrene引起的非特异性凝集应在1分钟内完全散开,若是由免疫抗体引起的凝集反应则不会散开
结果判定 阴性结果:红细胞迅速散开,并在1分钟内完全散开 阳性结果:红细胞不完全散开,弱凝集可能在30分钟 内明显减弱或消失,因此,以立刻观察结 果为准 质控试验:可以用阳性对照液代替待检血清,按同样 步骤进行质控试验,结果应为“1+”的弱凝 集
说明及注意事项 1、配置LIM红细胞悬液: 取抗凝或不抗凝血样标本的压积红细胞可直接加LIM溶液配置悬液,若红细胞中含有较多血清或血浆,则需要用LIM溶液洗涤红细胞一次,红细胞 悬液为2~3%,该悬液可替代盐水红细胞悬液使用 2、加入血清量应严格按照操作方法,多加血清会提 高离子强度,降低致敏效果。 3、使用肝素抗凝的血浆配血需多加1滴Polybrene, 以中和肝素