Лабораторная диагностика туберкулеза

1. Лабораторная диагностика туберкулеза Н.В. Свечникова Врач бактериолог БУЗ Орловской области ОПТД

2. Род Mycobacterium включает в настоящее время около 100 видов, как патогенных, так и непатогенных. Большинство из представителей этого рода относятся к сапрофитным микроорганизмам, и лишь незначительное их число имеет клиническое значение.

3. К патогенным видам относятся возбудители туберкулеза у человека и животных, а также возбудитель проказы. Остальные представители рода Mycobacterium относятся либо к так называемым атипичным микобактериям, либо являются сапрофитами, которые широко распространены в природе. Атипичные микобактерии, классифицируемые как нетуберкулезные, вызывают в организме людей и животных те или иные патологические изменения, и по биологическим качествам и клинической значимости занимают среднее место между типичными микобактериями туберкулеза и сапрофитными микобактериями.

4. Разделение клинически значимых микобактерий на комплексы: • комплекс M. tuberculosis - комплекс бактерий, вызывающих туберкулез (M. tuberculosis, M. bovis, M. bovis BCG, M. africanum, M. microti, M. canetti) • комплекс M. avium (M. avium, M. intracellulare) • комплекс M. Fortuitum • комплекс M. terrae

5. Микобактерии туберкулеза относятся к роду Mycobacterium. Характерной особенностью микроорганизмов, относящихся к этому роду, является наличие чрезвычайно устойчивой к внешним воздействиям гидрофобной клеточной стенки. Ее высокая гидрофобность в значительной степени обусловлена наличием остатков миколовых кислот в ее пептидогликолипидном слое.

6. Характерными особенностями микобактерий туберкулеза являются: • Способность к кислотоустойчивому окрашиванию (используется при специфической окраске диагностического материала при микроскопии) • Устойчивость к кислотам и щелочам (используется при селективной обработке диагностического материала с целью элиминации нетуберкулезной микрофлоры перед посевом) • Длительный цикл развития

7. Микобактерии туберкулеза обладают значительной устойчивостью к воздействию факторов окружающей среды - холоду, теплу, влаге, свету.Однако некоторые виды физического и химического воздействия приводят к гибели микобактерий.

8. Образование аэрозоля при кашле, разговоре, пении.

9. На сегодняшний день микробиологические методы исследования являются основными в диагностике туберкулеза. Основными методами выявления возбудителя туберкулеза являются традиционные микробиологические методы - микроскопия мазка и культуральные исследования (посев).

10. Бактериологическая диагностика ТБ у впервые выявленных больных(Орловская обл., 2011 г.)

11. Характеристика микроскопического метода исследования

12. Микроскопические методы исследования играют очень важную роль в выявлении и диагностике туберкулеза: • Диагностика туберкулеза легких бактериоскопическим методом проста, достаточно эффективна, экономически выгодна, так как не требует особого оборудования и химических реактивов. • Преимуществом бактериоскопического метода исследования является также быстрота получения результата. • Данный метод позволяет в короткие сроки выявить наиболее эпидемически опасных больных туберкулезом.

13. Основная масса впервые заболевших туберкулезом выявляется по обращаемости, т. е. среди лиц, обратившихся за медицинской помощью из-за появившихся различных клинических симптомов. В связи с этим при наличии у больного кашля, выделения мокроты и лихорадочного состояния в течение 3-х и более недель необходимо проведение микроскопического исследования мазка мокроты, окрашенного по методу Циля-Нильсена в клинико-диагностических лабораториях и больницах общего профиля. Первичное выявление больных туберкулезом в РФ методом Циля-Нильсена осуществляется как в клинико-диагностических лабораториях общей лечебной сети, так и в учреждениях противотуберкулезной службы.

14. Микроскопия КУМ Важно исследовать 3 образца!

15. Цельдиагностики туберкулеза – своевременное выявление очага инфекции К основным задачам учреждений ОЛС относятся: • заподозрить туберкулез • качественно организовать сбор диагностического материала до начала лечения • организовать трехкратное исследование мокроты методом микроскопии в КДЛ • своевременно направить материал для культуральной диагностики в специализированное противотуберкулезное учреждение

16. Причины низкой чувствительности методов микроскопического исследования • 1. необоснованность назначения • 2. низкое качество диагностического материала • 3. плохая подготовка мазков мокроты • 4. ошибки в их окрашивании • 5. неисправный или плохого качества микроскоп

17. Качество диагностического материала • Результативность бактериоскопического исследования непосредственно зависит от качества диагностического материала, поэтому необходимо строго следить за тем, чтобы в лабораторию на исследование была доставлена мокрота, а не слюна • Материал в виде слюны следует выбраковывать на этапе сбора мокроты, слюна не должна поступать в лабораторию и подвергаться микроскопическому исследованию

18. ЗАВИСИМОСТЬ ПОЛОЖИТЕЛЬНОГО РЕЗУЛЬТАТА МИКРОСКОПИИ МАЗКА ОТ КАЧЕСТВА ИССЛЕДУЕМОГО ОБРАЗЦААмбулаторная служба * L.POLLAK & R.URBANCZIK, Bol Inform Inst Nac Tuberc (Caracas) 2:1969,5 - 8

19. Сбор диагностического материала. Сбор мокроты для исследования на кислотоустойчивые микобактерии - весьма ответственный этап диагностической процедуры, от четкости проведения которого во многом зависит результат исследования.

20. Контейнеры для сбора мокроты

22. Режимы обследования • Существует несколько схем организации обследования пациента методом микроскопии при выявлении туберкулезной инфекции • Желательно собирать утреннюю порцию мокроты в течение трех дней последовательно

23. Подбор пациентов для обследования. Целесообразный подбор пациентов для обследования (при наличии у них симптомов, подозрительных в отношении туберкулезной инфекции) позволяет значительно повысить эффективность микроскопического исследования При правильном подборе групп подозреваемых на туберкулез для обследования методом микроскопии эффективность выявления в лаборатории составляет 5-20%, то есть из 100 обследованных выявляется 5-20 положительных по мазку пациентов

24. Группы пациентов, подлежащих обследованию в первую очередь: • С симптомами кашля более 3-х недель • С субфебрильной температурой • В состоянии пониженного питания • Дети и подростки из групп риска по заболеванию туберкулезом (IV и VI группы диспансерного учета) • С рентгенологическими изменениями в легких ТОЛЬКО ПРИ НАЛИЧИЕ КАШЛЯ С МОКРОТОЙ!!! Это крайне важно с эпидемической точки зрения, так как больной с неустановленным диагнозом “туберкулез” наиболее контагиозен

25. Наличие туберкулеза легких с положительным мазком в зависимости от длительности кашля пациентаД.Р. НАГПОЛи другие, ВОЗ/TБ/Информация для лаборантов / 68.63

26. Эффективность работы ОЛС в выявлении больных туберкулезом с бактериовыделением.

27. Из микробиологических методов диагностики основным остается диагностика туберкулеза с использованием стандартных питательных сред:1. Ливеншнейна-Йенсена2. Финн - 2

28. Учет результатов посева. Интенсивность ростаобозначают по 3-х балльной системе (1+) — 1 – 20 КОЕ (“скудное” бактериовыделение); (2+) — 21 – 100 КОЕ (“умеренное” бактериовыделение); (3+) — > 100 КОЕ (“обильное” бактериовыделение).

29. Непременным условием для бактериологической лаборатории является определения ЛЧ к стандартизированным препаратампервого ряда: H,R,E,Sивторого ряда:K,Cap,OFL

30. Ускоренные методы лабораторной диагностики туберкулеза и лекарственной устойчивости • Автоматическая система BACTEC MGIT 960 • Анализатор GeneXpert • ПЦР диагностика

31. Автоматизированная система BACTEC MGIT 960.

32. Анализатор GeneXpert

33. Анализатор GeneXpert

34. Благодарю за внимание!