1 / 25

Ester Hans Sunanto 0 9 1071 407 1

Efek Ekstrak Daun Dewandaru ( Eugenia uniflora ) sebagai Penghambat Pembentukan Biofilm Staphylococcus aureus In Vitro. Ester Hans Sunanto 0 9 1071 407 1. Latar Belakang.

china
Download Presentation

Ester Hans Sunanto 0 9 1071 407 1

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. Efek Ekstrak DaunDewandaru (Eugenia uniflora) sebagai Penghambat Pembentukan Biofilm Staphylococcus aureusIn Vitro Ester Hans Sunanto 0910714071

  2. Latar Belakang Angka kejadian infeksi S.aureus meningkat pesat  penyebab utama infeksi nosokomial & infeksi yang terkait dengan indwelling medical devices Kemampuan S.aureus membentuk biofilm  permukaan bakteri lebih tahan terhadap antibiotik Perkembangan yang pesat dari bakteri-bakteripembentuk biofilm

  3. Penggunaan ekstrak daundewandaru (Eugenia uniflora) sebagaipenghambat pembentukan biofilm diduga mampu menghambat pembentukan biofilm. Mempunyai kandungan tannin,flavonoid, saponin

  4. Rumusan Masalah Apakah ekstrak ethanol daundewandaru(Eugenia uniflora) dapat menghambat pembentukan biofilm pada bakteri S.aureus secara in vitro?

  5. Tujuan Penelitian • Umum : • Mengetahui efek dari ekstrak ethanol daundewandaru sebagai penghambat pembentukan biofilm pada bakteri S.aureus secara in vitro • Khusus : • Efek dari masing-masing konsentrasi ekstrak daundewandaru sebagai penghambat pembentukan biofilm pada bakteri Staphylococcus aureus • Kadar Hambat Minimal yang dapatmenghambatpembentukanbiofilmdari ekstrak daundewandarupada S.aureus secara in vitro.

  6. TinjauanPustaka • Staphylococcus aureus : bakteri Gram positif, berbentuk kokus, bergerombol seperti buah anggur, tes katalase positif dan tes koagulase positif (membedakandenganstrain lain) dan membentuk koloni berwarna kuning emas pada Nutrient Agar Plate • Biofilm : sekumpulanmikroorganisme(bakteri) yang membentuk lapisan padat pada permukaan suatu substrat/media • DaunDewandaru : tanaman yang banyakditemukandi Sumatera danJawa. Disebutjugaceremeasamataubelimbinglondo.

  7. Kerangka Konsep S. Aureus Tanin + Flavonoid Early adhesion ~ reversible (BAP) Tanin Cell to cell adhesion ~ ’quorum sensing’ (PIA) EPS

  8. Saponin Perlekatan reversible Perlekatan irreversible Maturasidanagregasi Biofilm

  9. Hipotesis Ekstrak daundewandaru(Eugenia uniflora) dapat menghambat pembentukan biofilm pada S.aureus

  10. Definisi Operasional • Staphylococcus aureus :populasipenelitiandiperolehdaristock culture Lab Mikrobiologi FKUB • Biofilm : dibiakkandaribakteriS.aureusdi Lab Mikrobiologi FKUB • EkstrakDaunDewandaru : hasilekstraksicairdenganpelarut ethanol. Dianggapmemilikikonsentrasi 100%. TanamandanpembuatanekstrakdilakukandiBalaiMateriaMedika.

  11. Definisi Operasional • Microtitter Plate Method : metodedeteksibiofilmsecarakuantitatifdenganmenggunakan 96-well-plate • Elisa Reader : alat yang digunakanuntukmenghitungOptical Density biofilm yang terbentuk. Alat yang digunakanmilik FKUB. • Optical Density : satuan yang digunakanuntukmengukurbiomass, cell count, dll. Menggunakanprinsiprefraction of light.

  12. Skema Penelitian S.aureus Ekstraksi DaunDewandaru Pewarnaan gram EkstrakDaunDewandaru Tes Katalase Konsentrasi ekstrak 0 %; 0.015% ; 0,03%; 0.06% ; 0.125 %; 0.25% ; 0.5% ; 1% ; 2% Tes Koagulase Congo Red Agar Dimasukkan ke dalam 96well flat bottomed plastic culture plate yang steril

  13. Microtiterdiaspirasidandicuci 3x menggunakan 0,2 mLphosphate-buffered saline (pH 7,2) Inkubasi selama 24 jam pada suhu 37º C pembilasandenganmenggunakanaquades dandikeringkan prosespewarnaandenganmenggunakan200 μl2% crystal violet DiukurdenganELISA readerdandilihatOptical Densitynya. ditambahkan 200 μlHCl isopropanol disetiap well utk pengukuran Analisis Data

  14. Hasil Identifikasi Bakteri

  15. Hasil Penghitungan OD Biofilm

  16. Analisis Data UjiNormalitasdanHomogenitas

  17. Anova

  18. Post Hoc Comparison Test

  19. Pembahasan • Ekstrak daundewandarudapat menghambat pembentukan biofilm • Kandungan : tannin,flavonoid, dansaponin

  20. Tannin : menghambatsenyawaadhesin; membentukkompleksdengan protein polipeptidadindingsel cell to cell adhesion • Flavonoid: menghambatsenyawaadhesin + fungsimembransitoplasmabakteri tidak dapat melekat pada media • Saponin: menurunkansurface tension  menghambatperlekatanirreversible/ reversible  detachment biofilm

  21. Kendala Penilitian • Kekentalan ekstrak daundewandaru • Mengganggupembacaanpada ELISA reader • Solusi • Metode MTT & XTT • MTT (3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide) mitokondria dan sistem transport elektron mereduksiMTT  membentuk suatu kristal keunguan • XTT (2,3-bis-(2-methoxy-4-nitro-5-sulfophenyl)-2H-tetrazolium-5-carboxanilide)  beda pewarna dan lebihsensitif

  22. Kesimpulan • Pemberianekstrakdaundewandaru(Eugenia uniflora)memberikanpengaruh yang signifikandalampenghambatanpembentukanbiofilm yang dihasilkanolehbakteriS.aureus • Kadar hambat minimal adalahpadakonsentrasi 0,0075% • Kadar hambatmaksimaladalahpadakonsentrasi 1% • Konsentrasi yang tidakmemberikanperbedaansignifikanadalah 0,03% ; 0,06% ; 0,125%

  23. Saran • Menelitiefektivitasekstrakdaundewandaru(Eugenia uniflora)terhadappenghambatanpembentukanbiofilm yang dihasilkanbakteriS.aureusdenganmenggunakanmetode MTT ataumetode XTT yang manaprosedurnyatidakdipengaruhiolehkarakterekstrak yang keruhdansukarlarut. • Menelitiefektivitasekstrakekstrakdaundewandaru(Eugenia uniflora)terhadappenghambatanpembentukanbiofilm yang dihasilkanbakteripenghasilbiofilmlainnyadenganmetode MTT ataumetode XTT.

  24. TerimaKasih

More Related