1 / 21

Vplyv vybraných génových polymorfizmov receptoru vitamínu D na priebeh sclerosis multiplex

UNIVERZITA KOMENSKÉHO V BRATISLAVE Jesseniova lekárska fakulta v Martine 1 Ústav lekárskej biochémie JLF UK, Martin 2 Neurologická klinika, Univerzitná nemocnica Martin. Vplyv vybraných génových polymorfizmov receptoru vitamínu D na priebeh sclerosis multiplex.

chill
Download Presentation

Vplyv vybraných génových polymorfizmov receptoru vitamínu D na priebeh sclerosis multiplex

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript


  1. UNIVERZITA KOMENSKÉHO V BRATISLAVE Jesseniova lekárska fakulta v Martine 1 Ústav lekárskej biochémie JLF UK, Martin 2 Neurologická klinika, Univerzitná nemocnica Martin Vplyv vybraných génových polymorfizmov receptoru vitamínu D na priebeh sclerosismultiplex Čierny Daniel 1, Michalik, J. 2, Dobrota, D. 1, Lehotský, J. 1 14. vědecko-pedagogická konference učitelů biochemických oborů lékařských fakult v ČR a SR Plzeň, 30. 5. 2013

  2. Etiopatogenéza sclerosis multiplex • demyelinizačné zápalové autoimunitné ochorenie CNS • autoreaktívny klon T-lymfocytov → zápal → poškodenie myelínu → • axonálna degenerácia → remyelinizácia → neurologický deficit Environmentálne faktory • vitamín D • infekcie – EBV, HSV • fajčenie Genetické faktory • HLA gény • non-HLA gény Epigenetické zmeny

  3. Rýchlosť progresie sclerosismultiplex Skóre EDSS (Expanded Disability Status Scale, Kurtzke) : 0 – 10 • rozšírená Kurtzkeho škála funkčnej nespôsobilosti • posudzuje hybnosť rúk, schopnosť chôdze, výkon denných aktivít, sebestačnosť, schopnosť komunikácie, prehĺtania, poruchy funkčných systémov Zneschopnenie pacienta KURTZKE, J.F. 1983.

  4. Vitamín D • príjem – v potrave, tvorba v koži (UV žiarenie) • odporúčaná denná dávka – cca 1000 IU • regulácia kostného metabolizmu • imunomodulačné účinky (karcinogenéza, autoimunita)

  5. Imunomodulačné účinky vitamínu D • T-lymfocyty - inhibíciasekrécie INF-γTH1-ly, zlepšenie funkcie TREG-ly, ↑ tvorby IL-10, posun v smere TH2 • B-lymfocyty – ↓ expresie MHC II molekúl, ↓ tvorby Ig, ↓ diferenciácie plazmatických buniek • makrofágy a dendritické bunky - ↓ sekrécie IL-12 a TNF-ɑ, ↓sekrécie stimulačných molekúl, ↓ zrenia a chemotaxie DC (Bikle, 2011)

  6. Vitamín D a sclerosis multiplex • vplyv na oligodendrocyty už počas vývinu jedinca • protektívny efekt voči vzniku SM (Munger et al., 2004) • hypovitaminóza D – rizikový faktor vzniku SM • denná dávka 400 IU redukuje riziko vzniku SM o 80 %(Simon et al., 2010) • plazmatická hladina negatívne koreluje s výskytom relapsov SM (Soilu- Hanninen et al., 2005) • v oblastiach mierneho klimatického pásma, tehotné ženy, deti s anamnézou SM – preventívna suplementácia vit. D (Pierrot-Deseilligny a Souberbielle, 2011, Chaudhuri, 2005) • potenciálne liečebné účinky u pacientov s SM (Cadden et al.., 2011)

  7. Mechanizmus účinku vitamínu D KALCITRIOL v plazme Cieľové tkanivá VDR - receptor vitamínu D vitamín D viažúci proteín (DBP) hydroxylácia Antibakteriálne účinky Kostný metabolizmus Imunomodulačné účinky

  8. Génové polymorfizmy VDR Ovplyvnenie: • VDR mRNA – hladina, stabilita, zostrih • VDR proteín – stabilita, izoformy, interakcie

  9. Génové polymorfizmyVDR a SM

  10. Fok I polymorfizmus VDR • zámena C / T resp. F / f (SNP rs10735810) • spôsobuje posun iniciačného kodónu VDR génu • alelová varianta f (resp. T) - vznik VDR proteínu dlhšieho o 3 aminokyseliny v porovnaní s alelou F • alela F (resp. C) – kratší VDR proteín divého typu – vyššia transkripčná aktivita (účinnejšia interakcia s TFIIB)

  11. Fok I polymorfizmus VDR • protektívny efekt vitamínu D z exogénnych zdrojov – iba u jedincov s genotypom ff (Simon et al., 2010) • zníženie rizika vzniku SM – genotyp ff (Partridge et al.,2004) • nižšia frekvencia genotypu ff u pacientov s vyšším EDSS skóre (Mamutse et al., 2008) • u jedincov s genotypom obsahujúcim alelu F nižšia plazmatická hladina kalcidiolu (Orton et al., 2008) FF Ff ff

  12. ApaI a TaqI polymorfizmus VDR ApaI polymorfizmus • zámena G / T resp. A / a (SNP rs7975232) • bez zmeny aminokyseliny, ale mení stabilitu mRNA • alelaA – vyššie riziko vzniku SM (Tajouriet al., 2005) • alela A – ↑ frekvencia u SM pacientov, ↑ riziko SM v kombinácii s alelou b a HLA-DRB1*1501 (Niino et al., 2000) TaqI polymorfizmus • zámena T / C resp. T / t (SNP rs731236) • alelat– ↑ frekvencia u SM pacientov, 2-krát ↑ riziko vzniku SM, 3-krát ↑ riziko vzniku progresívnej SM (Tajouri et al., 2005)

  13. Súbor vyšetrovaných jedincov Doteraz nazbierané vzorky DNA: 160 dobrovoľných darcov krvi 205 pacientov s SM Vyšetrení jedinci:

  14. Metodika práce • odber 5 ml vzorky periférnej krvi • izolácia DNA • amplifikácia DNA pomocou polymerázovej reťazovej reakcie (PCR) • štiepenie produktu PCR restrikčnými endonukleázami (FokI , ApaI, TaqI) • elektroforéza (2% agarózový gél, etídiumbromid) • vyhodnotenie (UV lampa)

  15. Predbežné výsledky • 39 pacientov s SM (18 RP SM, 21 PP SM) a 58 zdravých jedincov S rýchlejšou progresiou SM je asociovaná: • alela f FokI polymorfizmu (OR = 2,48, 95% CI = 1,14 – 5,35, p = 0,016, vs. CTL) • alela a ApaI polymorfizmu (OR = 2,5, .95% CI = 0,99 – 6,26, p = 0,04, vs. PP SM) FokI polymorfizmus – alelové frekvencie ApaI polymorfizmus – alelové frekvencie

  16. Výsledky – ApaIpolymorfizmus VDR

  17. Výsledky – TaqI polymorfizmus VDR

  18. Výsledky – Fok I polymorfizmus VDR * * * • V skupine s rýchlou progresiou SM: • signifikantne vyššia frekvencia alely f • (vs. CTL: p = 0.02; OR = 2.12; .95 CI = 1.08 – 4.18) • (vs. konv. SM: p = 0.02; OR = 2.17; .95 CI = 1.09 – 4.34)

  19. Záver • alelové frekvencie polymorfizmov FokI, ApaI a TaqI sa nelíšia medzi kontrolnou skupinou a SM • alelové varianty polymorfizmov ApaI a TaqI nesúvisia s rýchlosťou progresie SM • alela f polymorfizmu FokI je spojená s rýchlejšou progresiou SM • predpoklad - efekt je spôsobený znížením aktivity VDR a následnou nedostatočnou imunomodulačnou a protizápalovou funkciou vitamínu D

  20. Ďalšie ciele • overiť zistené súvislosti vo väčšej skupine jedincov • analyzovať imunologické a biochemické parametre • vyšetriť ďalšie génové polymorfizmy metabolizmu vitamínu D

  21. Spolupráca • Ústav lekárskej biochémie JLF UK • Neurologická klinika UNM • Národná transfúzna služba v Martine Ďakujem za pozornosť!

More Related