1 / 22

分析化学

第 21 章 高效液相色谱法 High-Performance Liquid Chromatography，HPLC. 分析化学. 70年代迅速发展 不挥发有机物约占70% 80年代以来 HPLC 文献量 21%（89年） 仪器销售量 25%（12 亿）（89年） 应用领域 拓展（化工、环保、临床、药品、生命） 超过 GC. 第 21 章 高效液相色谱 法 High-Performance Liquid Chromatography，HPLC.

cheryl-vazquez
Download Presentation

分析化学

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. 第21章 高效液相色谱法 High-Performance Liquid Chromatography，HPLC 分析化学

  2. 70年代迅速发展 不挥发有机物约占70% 80年代以来HPLC 文献量 21%（89年） 仪器销售量 25%（12 亿）（89年） 应用领域拓展（化工、环保、临床、药品、生命） 超过 GC

  3. 第21章 高效液相色谱 法High-Performance Liquid Chromatography，HPLC 21－1 高效液相仪 21－2 固定相和流动相 21－3 色谱峰扩展及其影响因素 21－4 高效液相色谱法和主要分离类型 21－5 超临界流色谱

  4. 第21章 高效液相色谱 法High-Performance Liquid Chromatography，HPLC 1 高效液相色仪 2 固定相和流动相 3 高效液相色谱法和主要分离类型 4 超临界流体色谱

  5. 第21章 高效液相色谱 法21-1 高效液相色谱仪 1、仪器结构

  6. 第21章 高效液相色谱 法 21-1 高效液相色谱仪1、仪器结构 单柱塞泵结构示意图

  7. HPLC与GC比较 a. 柱长:10—50cm 内径:2—5mm 微柱 ◎填充柱 微 HPLC 柱0.5~1.0 m m 毛细管 HPLC 柱100~500 μm 纳级 HPLC 柱10~100 μm ◎拉制 HPLC 柱 50~200μm ◎开管 HPLC 柱 5~10μm 第21章 高效液相色谱 法 21-1 高效液相色谱仪2、掌握要点

  8. 微柱的优越性： 1、消耗少（样、流动相、固定相） 2、灵敏（溶质在柱上稀释比下降） 3、分离效率高（可装长柱） 4、操作条件易选择 5、其它分离联用易 第21章 高效液相色谱 法 21-1 高效液相色谱仪2、掌握要点

  9. b、检测系统 常用UV光度检测（包括它的现代方法） 引人注目：荧光检测 选择性 10-9~10-11g/ml 质谱检测 通用性 10-8g/ml 蛋白质分析 生物质谱 第21章 高效液相色谱 法 21-1 高效液相色谱仪2、掌握要点

  10. C、梯度林洗装置 作用： 让流动相的组成随时间而改变，以调节流动相的极性、离子强度或pH，使样品组分的相对保留值得以改变，从而提高分离效率。 与GC的程序升温技术比较 第21章 高效液相色谱 法 21-1 高效液相色谱仪2、掌握要点

  11. 1、固定相分类 材料的刚性 ( 刚性固体、硬质凝胶） 固相填料的疏松（薄壳型微珠载体，全多孔型载体） 形状（球形、无定形） 2、流动相 选择溶剂要求 第21章 高效液相色谱 法21－2 固定相和流动相

  12. 1 分配色谱（LLC） 2 吸附色谱 （LSC） 3 键合相色谱 4 离子交换色谱 5 离子对色谱 6 凝胶渗透色谱 分离原理 分离类型选择 正相色谱与反相色谱的概念 第21章 高效液相色谱 法21－3 高效液相色谱法的主要分离类型

  13. 阴离子交换色谱 ： X－＋R＋Y－ Y－ + R＋X－ 第21章 高效液相色谱 法 21－3 高效液相色谱法的主要分离类型 4 离子交换色谱 阳离子交换色谱中 ： X＋＋ R－Y＋ Y＋+ R－X＋

  14. 离子交换的平衡式可用下式表达： R－Br + A  R－Ar + B 第21章 高效液相色谱 法 21－3 高效液相色谱法的主要分离类型 4.离子交换色谱 B为流动相-洗脱离子 和离子交换剂相结合的洗脱离子B 溶液中的试样组分离子 平衡常数或分离系数： Kd = { [B][Ar]} / {[A][Br]} A为溶液中的试样组分离子

  15. A+水相＋B－水相 ＝（A＋B－）有机相 第21章 高效液相色谱 法 21－3 高效液相色谱法的主要分离类型 5 离子对色谱 配对阴离子 溶质组分 萃取平衡常数 KAB=[A+B-]有机相/ {[A+]水相[B-]水相} k=[A+B-]有机相/ [A+]水相=KAB [B-]水相 溶质的分配系数

  16. 正相离子对分配色谱： 水溶液作为固定 液，对离子存在于含水固定相中， 有机溶剂为流动相. 第21章 高效液相色谱 法 21－3 高效液相色谱法的主要分离类型 5.离子对色谱 反相离子对分配色谱： 有机溶剂作为固定液，对离子存在于含水流动相中.

  17. 1、超临界流体 指物质在高于临界点，即高于其临界压力和临界温度时的一种物态。 相图 S L G 第21章 高效液相色谱 法21－4 超临界流体色谱

  18. 第21章 高效液相色谱 法 21－4 超临界流体色谱 2、超临界流体色谱（SFC）特点 超临界流体的特点超临界流体的密度、扩散系数和粘度等性质刚好介于气体和液体之间 物态 密度ρ粘度η扩散系数D (g﹒ml-1) (Pa﹒S) (cm2﹒s-1) 气体， (0.6-2.0)×10-3 (1-3)×10－5 0.1－0.4 0.1MPa, 15-30℃ 超临界流体，0.2-0.5 (1-3)×10－5 0.7×10－3 Tc, Pc 液体， 0.6-1.6 (0.2-3)×10－3 (0.2-2)×10－5 15-30℃

  19. 超临界流体色谱（SFC）特点 ※比HPLC具有更高的分离效率。 ※SFC使用温度较低，可以分离热稳定性差、高分子量的化学物。 ※SFC还可以与GC和HPLC的大多数的通用型或选择型的检测器相匹配。 第21章 高效液相色谱 法 21－4 超临界流体色谱

  20. 3、仪器 第21章 高效液相色谱法 21－4 超临界流体色谱

  21. 3、应用 超临界流体的特殊性，使得它有自己特点，是GC和HPLC 的重要补充，它可以分离分析气相色谱和高效液相色谱难以分离检测组分，或使分离分析更为方便和有效。 超临界流体色谱法被广泛地应用于聚合物、油脂类物质、环境样品、天然产物、药物等物质的分离分析。 第21章 高效液相色谱 法 21－4 超临界流体色谱

  22. 《高效液相色谱法》结束

More Related