1 / 13

第五章 核酸类药物

第五章 核酸类药物. 第一节 概述. 核酸 是以核苷酸为基本组成单位的生物大分子，携带和传递遗传信息。. 98% 分布于细胞核，其余分布于核外 如线粒体，叶绿体。. 脱氧核糖核酸. (deoxyribonucleic acid, DNA). 携带遗传信息，决定细胞和个体的基因型 (genotype) 。. 主要 分布于 细胞质（ 90% ），剩余 10% 位于细胞核 。. 核糖核酸. (ribonucleic acid, RNA). 参与细胞内 DNA 遗传信息的表达。某些病毒 RNA 也可作为遗传信息的载体。. 磷酸. 核苷酸. 核酸. 戊糖. 核苷.

charissa-boone
Download Presentation

第五章 核酸类药物

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. 第五章 核酸类药物

  2. 第一节 概述 核酸是以核苷酸为基本组成单位的生物大分子，携带和传递遗传信息。

  3. 98%分布于细胞核，其余分布于核外如线粒体，叶绿体。 98%分布于细胞核，其余分布于核外如线粒体，叶绿体。 脱氧核糖核酸 (deoxyribonucleic acid, DNA) 携带遗传信息，决定细胞和个体的基因型(genotype)。 主要分布于细胞质（90%），剩余10%位于细胞核。 核糖核酸 (ribonucleic acid, RNA) 参与细胞内DNA遗传信息的表达。某些病毒RNA也可作为遗传信息的载体。 磷酸 核苷酸 核酸 戊糖 核苷 碱基

  4. 核酸类药物是具有药用价值的核酸、核苷酸、核苷以及碱基的统称。除了天然存在的碱基、核苷、核苷酸外，它们的类似物、衍生物或这些类似物、衍生物的聚合物也属于核酸药物。核酸类药物是具有药用价值的核酸、核苷酸、核苷以及碱基的统称。除了天然存在的碱基、核苷、核苷酸外，它们的类似物、衍生物或这些类似物、衍生物的聚合物也属于核酸药物。

  5. 第二节 核酸类药物的一般制备方法 一、RNA的制备 （一）材料的选择与预处理 制备RNA的材料要选择含核酸量丰富的组织。 RNA的含量和细胞的活跃程度有关，在蛋白质合成旺盛的细胞中，其核酸的含量也相应地较高。 酸溶性小分子 冷酸处理 脂溶性物质 组织匀浆 酸提取液（RNA） 有机溶剂处理 酸处理 残留物 残留物（DNA等） 残留物 上清液（RNA等） 碱处理 沉淀物（DNA、蛋白质等）

  6. 1. 酸处理法 将经酸和有机溶剂处理后的残留物用1mol/L的过氯酸液于4℃下处理18 h，从中抽提出RNA，沉淀部分再用0.5mol/L的过氯酸液70 ℃下处理20 min提取DNA。 此法的缺点是有些材料的DNA在冷过氯酸抽提时被少量提取，从而使RNA部分中混有少量的DNA。 2. 碱处理法 将残留物用1mol/L的NaOH溶液于37 ℃处理过夜，则RNA被碱解为碱溶性核苷酸，DNA不溶解。加入过氯酸或三氯乙酸使溶液酸化，至酸浓度为5%-10%,此时，RNA的分解产物溶解在上清液中，DNA等则被沉淀下来。此法的优点是RNA和DNA分开得较为彻底，缺点是RNA中还含有其他含磷化合物，如磷肽，磷酸肌醇等。

  7. （二）提取与纯化 1. 提取 （1）乙醇沉淀法 （2）去污剂处理法 （3）酚法

  8. 2. 纯化 （1）密度梯度离心法 （2）柱色谱法 （3）凝胶电泳法

  9. （三）含量测定 • 定磷法 • （1）核酸样品用硫酸消化，将有机磷转化成无机磷； • （2）制定定磷标准曲线； • （3）测定回收率和样品总磷量。 • (NH4)MoO4+H2SO4 H2MoO4+(NH4) 2SO4 • H3PO4+12H2MoO4 H3P(Mo3O10) 4+12H2O • H3P(Mo3O10) 4 Mo2O3 • MoO3（钼蓝） • 定糖法 Vit • C RNA中的戊核糖可在盐酸的水解作用下游离出来，进一步形成糠醛，然后与地衣酚反应，反应物程鲜绿色，在670nm有最大吸收峰。

  10. 二、DNA的制备 • 材料的选择与处理 • 2. 提取与纯化 • 3. 含量测定 • （1）定磷法 同RNA • （2）定糖法 • 又称二苯胺法，在酸性溶液中，将DNA与二苯胺共热，形成蓝色化合物，该化合物在595nm有最大吸收。当DNA浓度在20-200ug/mL时，光吸收度与DNA浓度呈正比。

  11. 三、核苷酸、核苷及碱基的制备 （一）制备方法 1. 直接提取法 2. 水解法 （1）酶水解法 （2）碱水解法 （3）酸水解法 3. 化学合成法 4. 酶合成法 5. 微生物发酵法

  12. 光合磷酸化法制备ATP的工艺流程 [ 溶解，混合 ] Na2HPO4，Tris，PMS 肌激酶，ATP（引子） [ 光合 ] 叶绿体 pH3,1-1.5h [ 沉淀 ] 三氯乙酸 10℃以下 [ 提取 ] 乙醇 10℃ 4-5h 混合液 5′-AMP 反应液 上清液 ATP粗制品 [ 洗脱 ] NaCl溶液 pH3.8 [ 吸附 ] NaOH，717树脂 pH6.5-7 [ 去阳离子 ] 732树脂 pH6→1→2 [ 去杂质 ] 蒸馏水、硅藻土 吸附物 流出液 滤液 [ 干燥 ] 乙醇，乙醚 减压 [ 除热源、沉淀 ] 硅藻土、乙醇 洗脱液（含ATP） ATP沉淀 ATP成品

  13. ATP的药理作用与临床应用 在生物体内，ATP广泛参与各种生化过程，除参与核酸形成外，主要起着供应能量和磷酸基团的作用。 ATP除了作为危重病人抢救的辅助药物外，还可对慢性肝炎、肝硬化、肾炎、心肌炎、冠状动脉硬化、进行性肌肉萎缩、再生障碍性贫血、脑血管意外后遗症、中心性血管痉挛性视网膜脉络膜炎、风湿性关节炎、耳聋、耳鸣等有一定疗效。

More Related