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免疫学实验四. 辽宁医学院 免疫与病原生物学教研室. 实验内容. 一、 中性粒细胞吞噬功能测定 二、 小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能测定. 小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能测定. 实验原理 实验材料 实验方法 观察结果. 【 原理 】 利用注入腹腔的淀粉肉汤液作为刺激物,使 Mφ 向腹腔移行,再将 CRBC 注入小鼠腹腔 而被 Mφ 吞噬。. 【 材料 】 1. 健康小鼠、 2% 淀粉肉汤液、生理盐水、 5%CRBC 。 2. 注射器、载玻片。.
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免疫学实验四 辽宁医学院 免疫与病原生物学教研室
实验内容 • 一、中性粒细胞吞噬功能测定 • 二、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能测定
小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能测定 实验原理 实验材料 实验方法 观察结果
【原理】 利用注入腹腔的淀粉肉汤液作为刺激物,使 Mφ向腹腔移行,再将CRBC注入小鼠腹腔 而被Mφ吞噬。
【材料】 1.健康小鼠、2%淀粉肉汤液、生理盐水、 5%CRBC。 2.注射器、载玻片。
【方法】 • 1.实验前两天,给小鼠腹腔注射灭菌的2%淀粉肉汤液1ml。 • 2. 5% CRBC 1ml腹腔注射,轻揉腹部,使CRBC散开,30min后脱颈处死小鼠,剖开腹腔,用毛细吸管吸出腹腔渗出液后滴加在载玻片 ,涂片,自然干燥。 • 3.用G-W染色液,初染1min,蒸馏水复染5min,水洗,吸干后镜检。
【结果观察】 胞浆呈淡紫色,胞核呈紫蓝色,一个Mφ可吞噬多个CRBC,有的Mφ胞内遗留CRBC被消化的痕迹。
中性粒细胞吞噬功能测定 实验原理 实验材料 实验方法 观察结果
【原理】 中性粒细胞具有非特异性吞噬功能,将细菌与中性粒细胞混合孵育,可促使中性粒细胞吞噬细菌,清除外来异物。
【材料】 1.金黄色葡萄球菌菌液。 2.载玻片、采血针、接种环、G-W染液。
【方法】 1.取洁净载玻片加一滴金黄色葡萄球菌菌液。 2.用采血针采耳血一大滴,用载玻片一角取下与菌液混合(载玻片要先用酒精消毒)。 3.将载玻片放入湿盒37℃孵育25—30min。 4.用接种环取表层菌血混合液涂片,干燥,用G-W染色液,初染1min,蒸馏水复染5min,水洗,吸干后镜检。
【结果观察】 胞浆呈淡紫色, 胞核与细菌呈紫 蓝色。
注意事项 • 用后的玻片一定要放到玻片缸内!! • 接种环使用前后要烧灼灭菌 • 采血量不能太少 • 小鼠、酒精棉和采血针仍到撮子里 • 托盘要刷净