1.1 DNA 重组技术的基本工具

1.1 DNA重组技术的基本工具

问题引领 1、基因工程的定义 2、基因工程的三种工具名称 3、限制酶的来源、种类、作用、结果 4、DNA连接酶的种类、作用 5、质粒的特点、标记基因的作用 6、载体必备的5个条件、种类

基因工程的概念 基因工程概念的分析 DNA重组技术生物体外基因 DNA分子水平基因重组人类需要的生物类型和生物产品

DNA重组技术的基本工具 限制性核酸内切酶 DNA连接酶载体 “分子手术刀”-- “分子缝合针”-- “分子运输车”--

黏性末端 平末端一、限制性核酸内切酶——“分子手术刀” 1、来源：主要是原核生物（约300种） 2、种类：约4000种 3、作用：识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。 4、结果：形成两种末端

练习： 1、EcoRI只能识别GAATTC的核苷酸序列且只能从G和A之间切开，画出切割结果： GAATTC CTTAAG EcoRI 2、SmaI只能识别CCCGGG的核苷酸序列且只能从C和G之间切开,画出切割后的结果： CCCGGG GGGCCC SmaI 3、课本P6的“模拟制作” 4、P7“思考与探究”第1题

E·coli DNA连接酶 T4 DNA连接酶二、 DNA连接酶——“分子缝合针” （黏性末端） 1、种类： 2、作用部位：（黏性末端和平末端）磷酸二酯键

练习： GAATTC CTTAAG EcoRI ( ) GAATTC CTTAAG EcoRI

三、载体——“分子运输车” 1、载体的作用将转移到受体细胞中去。目的基因 2、常用的载体质粒、λ噬菌体的衍生物、动植物病毒 3、作为载体必须具备的5个条件练习：1、画出一个载体模式图 2、P7“思考与探究”的第2-4题

课堂巩固 C 1、关于限制酶的说法中，正确的是 A、限制酶是一种酶，只识别GAATTC碱基序列 B、EcoRI切割的是G—A之间的氢键 C．限制酶一般不切割自身的DNA分子，只切割外源DNA D．限制酶只存在于原核生物中

2、基因工程的载体，必须具备的条件及 理由是( ) A、能够在宿主细胞中稳定地保存下来并大量复制，以便提供大量的目的基因 B、具有多个限制酶切点，以便于目的基因的表达 C．具有某些标记基因，以便为目的基因的表达提供条件 D、能够在宿主细胞中复制并稳定保存，以便于进行筛选 A

3、质粒是基因工程最常见的载体，它的 主要特点是( ) ①能自主复制 ②不能自主复制 ③大小合适 ④是蛋白质 ⑤是环状RNA ⑥是环状DNA ⑦能“友好”地“借居” A、①③⑤⑦ B、②④⑥ C、①③⑥⑦ D、②③⑥⑦ C

1.1 DNA 重组技术 的基本工具