alkoholdehydrogenas adh labb n.
Download
Skip this Video
Loading SlideShow in 5 Seconds..
Alkoholdehydrogenas – ADH labb PowerPoint Presentation
Download Presentation
Alkoholdehydrogenas – ADH labb

Loading in 2 Seconds...

play fullscreen
1 / 15

Alkoholdehydrogenas – ADH labb - PowerPoint PPT Presentation


  • 279 Views
  • Uploaded on

Alkoholdehydrogenas – ADH labb. Biokemi 1 – HT-11. Linda Helmfors liand@ifm.liu.se ( linda.helmfors@liu.se ). Dehydrogenaser. Enzymer som katalyserar överföring av väte kallas med ett samlingsnamn för dehydrogenaser

loader
I am the owner, or an agent authorized to act on behalf of the owner, of the copyrighted work described.
capcha
Download Presentation

PowerPoint Slideshow about 'Alkoholdehydrogenas – ADH labb' - belden


An Image/Link below is provided (as is) to download presentation

Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author.While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server.


- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - E N D - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -
Presentation Transcript
alkoholdehydrogenas adh labb

Alkoholdehydrogenas – ADH labb

Biokemi 1 – HT-11

Linda Helmfors

liand@ifm.liu.se

(linda.helmfors@liu.se)

dehydrogenaser
Dehydrogenaser
  • Enzymersomkatalyseraröverföringavvätekallas med ettsamlingsnamnfördehydrogenaser
  • Alkoholdehydrogenas (ADH) katalyserar oxidation avalkoholer -> aldehyder
  • ADH krävernärvaroavkoenzymet NAD+föraktivitet
  • ADH ärettgruppspecifiktenzym. Snabbastreaktion med etanol men ävenandraalkoholerfungerar

ADH

NAD+

labben
Labben
  • Blandaolikaalkoholer med ADH och NAD+
  • Mätaabsorbansändringen
  • Beräknareaktionshastigheten
reaktionen vi studerar
Reaktionen vi studerar

ADH-NAD+ + R-CH2OH ⇌ ADH-NADH + R-CHO + H+

hur kan vi m ta reaktionshastigheten
Hurkan vi mätareaktionshastigheten?
  • Vi kanmätareaktionshastighetengenomattmätaspektrofotometriskt vid 340nm
  • NADH absorberarljus till skillnadfrån NAD+
  • 1 mol NADH  1 molalkohol
  • Absorbansökningen per tidsenhetärettmåttpåreaktionshastigheten
reaktionshastighet
Reaktionshastighet
  • E mättatpå [S]
  • Allt E förekommersom [ES]
  • [E]Tot = [ES]
  • VMaxberorav [E]

Under dessabetingmäter vi

absorbans j mf rt med reaktionshastighet
Absorbansjämfört med reaktionshastighet

Överskottetsubstratär slut => Reaktionenharnåttjämvikt

Konstanthastighet

Gerosshastigheteni min-1 men vi vill ha µmol/min

ber kningar
Beräkningar
  • Lambert-Beers lag:
  • A absorbansenhet
  • εämnesspecifikkonstant, härför NADH 6,22 ∙ 103M-1 cm-1
  • l strålensväggenomkyvetteni cm
  • c koncentrationav NADH ikyvetteni M
  • Kanskrivasom:
ber kningar forts
Beräkningar forts.

M/min

Dettavill vi göraom till mol/min

Skriv sedan i µmol/min itabellen

laborationsredog relse
Laborationsredogörelse:
  • Rubrik: Laborationens namn
  • Resultat:
    • Rådata (invägda mängder, spädningar, direkta mätresultat ) tydligt redovisade, gärna i tabellform:
    • Redovisade uträknade resultat baserade på mätdata – Tydligt!
    • Graf över reaktionshastigheten som funktion av enzymmängden
laborationsredog relse forts
Laborationsredogörelse forts:
    • Ifylld tabell över resultat
  • Resultattolkning/Diskussion: Värdering av resultat och egna slutsatser samt svar på eventuella frågor ställda i laborationshandledningen.
  • Lathund över vanliga returer kommer att sitta uppe på labb
kommentarer till returer adh
Kommentarer till returer - ADH
  • Beräkningarnabehöverjusteras
  • Grafensaknarenheter/felenhet
  • Uppdateratabellenochgrafen
  • Utveckadiskussionenöverresultatet
  • Redovisaberäkningarna med exempelfrånegnavärden
  • Graf saknas
  • Tabellöverrådatasaknas
  • Diskussionsaknas
f rberedelser
Förberedelser
  • Läslabbhandledningeninnanlabben
  • Funderaöver:
    • Vilka data behöver vi samla in förattberäkna V?
    • Vadförväntar vi ossförresultat?
labben i korthet
Labbenikorthet
  • Reaktionenutanenzym: NAD+ + EtOH, blanda -> mät
  • Reaktionen med enzym: NAD+ + EtOH + ADH, blandasnabbt -> mät
  • Upprepaförreproducerbarhet
  • Upprepa (2) med olikavolym ADH
  • Upprepa med olikaalkoholer