1 / 11

TRANSLACIJA

TRANSLACIJA. ZADACI.

basil
Download Presentation

TRANSLACIJA

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. TRANSLACIJA

  2. ZADACI • Da bi se istražio mehanizam aktivacije triptofana, provode se eksperimenti izmjene (izmjena se odnosi na izmjenu radioaktivnih atoma između dva spoja tijekom biokemijske reakcije) s pročišćenom triptofanil-tRNA-sintetazom iz E. coli i različitim kombinacijama reakcijskih komponenata prikazanim u tablici. Predvidite koji od ovih eksperimenata će dati reakcije izmjene (drugi stupac). reakcijske smjese mjerena izmjena (ugradnja) • enzim + ATP + 32PPi32P u ATP • enzim + tRNATrp + ATP + 14C-AMP 14C u ATP • enzim + tRNATrp + ATP + 32PPi32P u ATP • enzim + Trp + ATP + 32PPi 32P u ATP • enzim + Trp + ATP + 14C-AMP 14C u ATP • tRNATrp + ATP + 14C-AMP 14C u ATP • tRNATrp + ATP + 32PPi32P u ATP

  3. LAKTOZNI OPERON

  4. ZADACI • Kad je glukoza prisutna, lac geni nisu potpuno eksprimirani, čak niti u prisutnosti induktora. Ta pojava naziva se represija katabolitom. • Objasnite zašto je u biološkom smislu važno da je laktozni operon pod negativnom kontrolom lac represora? • Koji je biološki smisao kontrole laktoznog operona pomoću represije katabolitom? Uobičajeno je da se kaže da laktoza inducira lac operon. No, prava molekula induktora je alolaktoza, produkt povremene transglikozilacijske aktivnosti -galaktozidaze na laktozu. • Smislite eksperiment kojim bi to dokazali.

  5. ZADACI • Uzgajate stanice pod sljedećim uvjetima: Mjerite razinu aktivnosti -galaktozidaze (lacZ) i dobivate sljedeće vrijednosti: • Što možete zaključiti o ulozi pozitivne kontrole (putem CAP-a) u reprimiranom stanju obzirom da su isti rezultati dobiveni u uvjetima (2) i (4)? Predložite molekulsku interpretaciju ovog rezultata.

  6. ZADACI • CAP je potreban za uključivanje nekoliko šećernih operona (uključujući arabinozni, laktozni, maltozni i galaktozni operon). Stanice s mutacijom u CAP-u ne mogu učinkovito razgrađivati niti jedan od ovih šećera. Na podlogama koje sadrže odgovarajući šećer i tetrazolijum (indikatorska boja), kolonije su bijele ako je šećer metaboliziran, a crvene ako nije. Ova vrst hranjivih podloga vrlo se često koristi u potrazi za stanicama koje ne mogu metabolizirati određeni šećer. • Kako biste mogli iskoristiti ove podloge za izolaciju CAP-mutanata? • Pretragom dobivate dvije klase mutanata. Prva klasa su CAP-mutanti. Što bi mogla biti druga klasa?

  7. PRIJENOS GENETIČKE INFORMACIJE KOD EUKARIOTA

  8. STRUKTURA EUKARIOTSKOG KROMATINA elektronska fotografija kromatina građa nukleosoma

  9. ZADACI • Bavite se proučavanjem strukture kromatina u jezgrama stanica iz jetre miša. Kada na jezgre stanica kratko djelujete sa mikrokoknom nukleazom, izolirate DNA i razdvojite na agaroznom gelu, dobijete niz širokih pruga razmaknutih za otprilike 200 nukleotida (tzv. "ljestve"). Ako umjesto mikrokokne nukleaze upotrijebite DNazu I, na agaroznom gelu nastaje kontinuirana razmazana pruga sa blijedim maksimumima svakih 200 nukleotida. Na poliakrilamidnom gelu, koji posjeduje manje pore od agaroznog gela, uz odgovarajuće elektroforetske uvjete, DNA tretirana DNazom I daje niz pruga, tj. "ljestve" sa razmakom od 10 nukleotida.

  10. ZADACI • (nastavak) Zbunjeni dobivenim razlikama u rezultatima opisali ste svoje eksperimente ostatku vaše istraživačke grupe. Jedan od kolega vam sugerira da je razlika uzrokovana različitim steričkim svojstvima veznih mjesta za ta dva enzima: mikrokokna nukleaza može se vezati i cijepati samo slobodnu DNA, dok DNaza I veže i cijepa DNA vezanu na površini nukleosoma. Vaš kolega predviđa da će DNA vezana na bilo koju površinu i pocjepana DNazom I dati "ljestve" od 10 nukleotida. Pretpostavku ste provjerili vezanjem DNA na umjetnu površinu presvučenu lizinom i razgradnjom pomoću oba enzima: mikrokokna nukleaza uzrokuje minimalnu razgradnju, dok DNaza I stvara "ljestve" od 10 nukleotida u skladu sa predviđanjem vašeg kolege.

  11. ZADACI • (nastavak) • Zašto kratka inkubacija mikrokoknom nukleazom daje "ljestve" sa udaljenošću od oko 200 nukleotida? • Kako će izgledati gel nakon elektroforeze ako umjesto kratkog tretmana mikrokoknom nukleazom jezgre stanica dugo inkubirate sa mikrokoknom endonukleazom? • Objasnite kako pretpostavka vašeg kolege objašnjava nastanak "ljestvi" od 10 nukleotida pri tretmanu jezgri sa DNazom I Slika desno: agarozna elektroforeza DNA izolirane nakon djelomične razgradnje kromatina mikrokoknom nukleazom

More Related