1 / 24

实 验 四

实 验 四. 蛙心灌流. (perfusion of frog’s heart). 【 复习理论内容 】. 1. 心脏的生理特性 ? 2. 心肌收缩的特点？ 3. 心脏的神经支配及作用？. 【 实验原理 】. 心脏的自动节律性活动，需要有一个合适的理化环境。. 蟾蜍心脏离体后，用任氏液灌流，心脏在一定时间内可保持节律性收缩与舒张。改变灌流液的成分，心脏跳动的 频率 和 幅度 会随之发生改变。. 【 实验目的 】. 用离体蛙心灌流的方法观察：. ① Na + 、 K + 、 Ca 2+ ② 酸、碱度 ③ E 、 Ach. 对心脏活动的影响.

axel-stanley
Download Presentation

实 验 四

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. 实 验 四 蛙心灌流 (perfusion of frog’s heart)

  2. 【复习理论内容】 1. 心脏的生理特性? 2. 心肌收缩的特点？ 3. 心脏的神经支配及作用？

  3. 【实验原理】 心脏的自动节律性活动，需要有一个合适的理化环境。 蟾蜍心脏离体后，用任氏液灌流，心脏在一定时间内可保持节律性收缩与舒张。改变灌流液的成分，心脏跳动的频率和幅度会随之发生改变。

  4. 【实验目的】 用离体蛙心灌流的方法观察： ① Na+、K+、Ca2+ ② 酸、碱度 ③ E、Ach 对心脏活动的影响

  5. 【实验对象】 【实验器材和药品】 BL-420E+生物机能实验系统 张力换能器、蛙心夹 蛙心插管、试管夹 缝合线、双凹夹 万能支台 蛙类手术器械 滴管两只 任氏液 0.65％NaCl l％KCl 3％CaC12 l：10,000 E l：10,000 ACh 3％乳酸 2.5％NaHCO3

  6. 【实验步骤】 一、离体蟾蜍心脏制备 1.取蟾蜍一只，破坏脑和脊髓。 2.打开胸腔，暴露心脏。

  7. 【实验步骤】 一、离体蟾蜍心脏制备 1.取蟾蜍一只，破坏脑和脊髓 2.打开胸腔，暴露心脏。 （腹面） （背面）

  8. 【实验步骤】 一、离体蟾蜍心脏制备 3.蛙心插管 ♦ 在主A干下穿一线打 一松结；在左主A下再穿一线结扎。 ♦ 在A圆锥、左主A根部剪 口，将蛙心插管插入心室内。 插管插入心室标志 见血液涌入插管内，并随心跳上下波动。

  9. 【实验步骤】 一、离体蟾蜍心脏的制备 4.将松结线扎紧，并固定在插管的侧管上。 5.摘出心脏 任氏液冲洗数次 （避免损伤静脉窦）

  10. 【实验步骤】 一、离体蟾蜍心脏的制备 二、连接实验装置 1.用试管夹将蛙心插管固 定在万能支台上 2.把张力换能器固定在万 能支台上，在心室舒张 期将与换能器相连的蛙 心夹夹在心尖上。 换能器 *换能器的连线应与插管中轴在同一直线上，即与地面垂直

  11. 注意事项 ① 固定换能器时，应稍向下倾斜，以免从心脏滴下的水流入换能器内 ② 随时滴加任氏液于心脏表面使之保持湿润 换能器

  12. 启动 BL-420E+生物机能实验系统 “实验项目” “循环实验” “蛙心灌流” 描记蛙心收缩曲线

  13. 三、观察项目 调整增益、走纸速度，使蛙心收缩曲线至最好观察形态。 （一）描记正常心搏曲线 曲线幅度 —— 收缩的强弱 曲线疏密 —— 心率 曲线规律性 —— 心跳的节律性 曲线基线 —— 舒张的程度

  14. （二）离子和药物的影响 顺序 观察项目 药量 心肌(率、力)变化 12345678 灌流 任氏液 灌流 0.65%NaCl 1～2滴 3%CaCl2 1～2滴 1%KCl 1:10000 E 1～2滴 1:10000 Ach 1 滴 3% 乳酸 1 滴 2.5% NaHCO3 2～4 滴

  15. *【注意事项】 ♦ 当每种化学药物作用已明显时，应立即 将蛙心插管内液体吸出而换上任氏液数 次，以免心肌受损。 ♦ 须待心跳恢复正常后，才能进行下一实 验项目。 ♦ 每次换液时，蛙心插管内液面应保持相 同高度。 ♦ 吸管使用要分开，不可混淆。

  16. 【实验结果】 顺序 观察项目 药量 心肌(率、力)变化 12345678 灌流 任氏液 正常 灌流 0.65%NaCl 力↓ 1～2滴 3%CaCl2 力↑，舒张不完全 1～2滴 1%KCl 力↓ 1:10000 E 1～2滴 力↑，心率↑ 1:10000 Ach 1 滴 力↓，心率↓ 3% 乳酸 1 滴 力↓ 2.5% NaHCO3 2～4滴 恢复正常

  17. 【实验结果】

  18. 【结果分析】 • 任氏液：正常对照 • 2. 0.65%NaCl灌流 0.65%NaCl灌流 → Ca2+内流↓ [Ca2+]i↓ 兴奋-收缩耦联↓ 收缩力↓

  19. 【结果分析】 • 任氏液：正常对照 • 3. 3%CaCl2（1～2滴） [Ca2+ ]o↑ *舒张期Ca2+与肌钙蛋白不完全解离，产生Ca2+强直，基线上移。 Ca2+内流↑ [Ca2+]i↑ 兴奋-收缩耦联↑ 收缩力↑

  20. 【结果分析】 • 任氏液：正常对照 • 4. 1%KCl（1滴） AP平台期缩短Ca2+内流↓ 兴奋-收缩耦联↓ 收缩力↓

  21. 【结果分析】 • 任氏液：正常对照 • 5. 1:10000E（1～2滴） 与心肌β1受体结合 4期 If 、I CaT通道↑ cAMP 4期自动去极速度↑ Ca2+内流↑ 肌浆网释放Ca2+↑ 自律性↑ E-C耦联↑ 心率↑ 收缩力↑

  22. 【结果分析】 • 任氏液：正常对照 • 6. 1:10000Ach（1滴） 与心肌M受体结合 最大复极电位↑ 4期K+外流↑ K+外流↑, Ca2+内流↓ [Ca 2+ ]i↓ 自律性↓ E-C耦联↓ 心率 ↓ 收缩力↓

  23. 【结果分析】 • 任氏液：正常对照 • 7. 3%乳酸（1滴） 乳酸 碳酸氢钠 H+与Ca 2+竞争肌钙蛋白，Ca2+不能与 肌钙蛋白结合，收缩力↓。 8. 2.5％NaHCO3 （2-4滴） 中和H+，Ca2+与肌钙蛋白结合， 收缩力恢复。

  24. 【结论】 1.心肌的生理功能依靠内环境稳态 2.各种因素对心肌收缩力的影响主要 通过Ca2+实现

More Related