Y’a-t-il une unité du vivant? - Est-ce qu’il y a une division des cellules chez l’ensemble des êtres vivants ? -Ces div

1. Y’a-t-il une unité du vivant? - Est-ce qu’il y a une division des cellules chez l’ensemble des êtres vivants ? -Ces divisions ont-elles un point commun ?

2. Est-ce qu’ il y a une division des cellules chez l’ensemble des êtres vivants ?

3. On pense qu’il y a une division chez tous les êtres vivants responsable de l’unité du vivant : Pour cela on a compté le nombre de cellules animales,végétales et bactériennes avant et après mise en culture .

4. Matériel et méthodes -Microscope optique et cellule de Malassez (permet l’observation et le comptage des cellules animales unicellulaires : levures et cellules végétales ) -Spectrophotomètre et absorbance (cellules bactériennes trop petites au microscope=> utilisation technique indirecte) -Test de colorimétrie par le MTT sur lecteur de plaques (utilisation sur cellules animales pluricellulaires : lymphocytes autre technique d’étude)

5. Préparation du nutriment nécessaire aux levures L’amidon est le nutriment nécessaire au développement des levures. On veut savoir quelle concentration d’amidon permettra une croissance optimale des levures On le dilue au 10ème en cascade dans des tubes de culture

6. Mise en culture des levures • Injection des levures dans les tubes de culture précédents • Les tubes sont ensuite laissés dans l’incubateur durant 24 h puis les contenus des différents tubes sont observés au microscope sur lame de Malassez

7. Incubateur L’incubateur permet de maintenir les cellules en mouvement et à leur température de survie

8. Microscope optique et comptage des cellules sur lame de Malassez

9. Résultats Les cellules se multiplient d’autant plus que le milieu est riche

10. Les bactéries • Comparaison de la croissance des bactéries en milieu riche et milieu pauvre • Analyse au spectrophotomètre à cause de leur taille trop peu visible au microscope optique

11. Le spectrophotomètre et absorbance L’absorbance de la solution est mesurée grâce à un faisceau laser qui traverse la cuve. Cette absorbance est proportionnelle à la concentration en cellules de l’échantillon

12. Résultats • Absorbance 60 fois supérieure en milieu riche Conclusion: pour se diviser, les cellules ont besoin d’un milieu riche en nutriments

13. Analyse de la multiplication des cellules animales pluricellulaires par test de colorimétrie Principe : On veut étudier l’influence de la richesse du milieu sur la multiplication des cellules Pour cela, on teste 2 milieux, l’un riche en nutriments (sérum de veau fœtal) et l’autre pauvre en nutriments Test de colorimétrie : les cellules animales poussent stérilement dans des plaques 96 puits où elles adhèrent La croissance cellulaire est mesurée grâce à l’activité enzymatique d’une protéine présente dans les mitochondries. Cette enzyme dégrade son substrat (MTT) qui passe alors du jaune au bleu violacé L’analyse se fait par colorimétrie à 620 nm (orange) : plus l’absorbance sera forte dans le bleu, plus la concentration en cellules sera élevée 1/Tracé de la courbe d’étalonnage 2/Mesure des absorbances des divers puits à partir de la courbe d’étalonnage Puits servant pourl’étalonnage 6 Puits contenant le milieu riche 6 Puits contenant le milieu pauvre Plaque 96 puits pour le test de colorimétrie

14. Courbe d’étalonnage des cellules animales pluricellulaires obtenue par test de colorimétrie

15. Les cellules animales(lymphocytes) *Sérum de Veau Fœtal Nombre de cellules + faible en milieu pauvre

16. Conclusion 1/Présence d’une division chez tous les êtres vivants. 2/Point commun entre toutes les divisions : Elles nécessitent des nutriments.

17. Avec la participation du groupe mouvement et division cellulaire