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实验九 水质的微生物检测(综合实验)

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实验九 水质的微生物检测(综合实验) - PowerPoint PPT Presentation


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实验九 水质的微生物检测(综合实验). 实验目的 了解水质微生物检验的原理 学习测定水中大肠菌群数量的多管发酵法. 水中细菌总数的测定 —— 平板菌落计数法 水中大肠菌群数量的测定. 水中大肠菌群数量的测定. 大肠菌群 —— 能在 37 ℃24-48h 内发酵乳糖产酸与产气、需氧或兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌。 主要包括埃希氏菌属、柠檬酸杆菌属、肠杆菌属、克雷伯氏菌属的细菌。 粪便中存在大量的大肠菌群细菌,在水体中存活的时间和对氯的抵抗力与肠道致病菌,如沙门氏菌、志贺氏菌相似。易于培养和观察。. 乳糖蛋白胨培养基. 乳糖蛋白胨培养基. 典型菌落. 产气.

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实验九 水质的微生物检测(综合实验)

实验目的

了解水质微生物检验的原理

学习测定水中大肠菌群数量的多管发酵法

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水中大肠菌群数量的测定
  • 大肠菌群——能在37 ℃24-48h内发酵乳糖产酸与产气、需氧或兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌。
  • 主要包括埃希氏菌属、柠檬酸杆菌属、肠杆菌属、克雷伯氏菌属的细菌。
  • 粪便中存在大量的大肠菌群细菌,在水体中存活的时间和对氯的抵抗力与肠道致病菌,如沙门氏菌、志贺氏菌相似。易于培养和观察。
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乳糖蛋白胨培养基

乳糖蛋白胨培养基

典型菌落

产气

不产气

报告为大肠菌群阳性

报告为大肠菌群阴性

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乳糖起选择作用;溴甲酚紫起产酸指示,还有抑制其他细菌作用乳糖起选择作用;溴甲酚紫起产酸指示,还有抑制其他细菌作用

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实验方法和步骤
  • 1.水样的采取
    • 自来水:先将自来水龙头用火焰烧灼3min灭菌,再开放水龙头使水流5 min后,以灭菌三角烧瓶接取水样,以待分析。
    • 池水、河水或湖水:应取距水面10- 15 cm的深层水样,先将灭菌的带塞玻璃瓶,瓶口向下浸人水中,然后翻转过来,除去玻璃塞,水即流人瓶中,盛满后,将瓶塞盖好,再从水中取出,最好立即检查,否则需放人冰箱中保存。
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多管发酵法检测水样中大肠菌群
  • 自来水检查
    • 初发酵试验接种水样总量为300ml:在2个含有50 ml三倍浓缩的乳糖蛋白脉发酵烧瓶中,各加入100 ml水样。在10支含有5 ml三倍浓缩乳糖蛋白陈发酵管中,各加入10 ml水样。混匀后,37℃培养24h,24 h未产气的继续培养至48 h。通过平板分离、涂片、染色、镜检和复发酵试验检查各发酵管(瓶)中是否有大肠菌群存在。
    • 证实有大肠菌群存在后,再根据初发酵试验的阳性管(瓶)数查阅接种水样总量为300ml检数表,即得大肠菌群数。MPN 法(Most Probable Number)最大可能數法
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池水、河水或湖水等的检查
  • (1)将水样稀释成10-1与10-2.
  • (2)分别吸取lml 10-1与10-2的稀释水样和l ml原水样,各注入装有10 ml普通浓度乳糖蛋白胨发酵管中。另取10 ml和100 ml原水样,分别注人装有5 ml和50 ml三倍浓缩乳糖蛋白胨发酵液的试管(瓶)中。
  • (3)初发酵实验、平板分离和复发酵实验
  • (4)发酵结果查阅接种水样总量为111.11ml检索表。
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实验内容及安排

实验安排

  • 水样采取
  • 初发酵试验(第10周完成)
  • 平板分离 (第10周完成)
  • 涂片,革兰氏染色,镜检 (第11周完成)
  • 复发酵试验 (第11周完成)
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综合实验论文
  • 说明多管发酵法检测水样中大肠菌群的原理和操作过程。
  • 记录并报告实验结果。
  • 结果分析与讨论,经检查,水样是否合乎饮用标准?