犬瘟热的实验室诊断

1. 犬瘟热的实验室诊断

2. 一、实训目标 会犬瘟热的实验室常用的诊断技术

3. 二、仪器、材料 • 器材 • 显微镜、姬姆萨染色剂、CDV诊断试剂盒等

4. 三、实训内容与步骤 • 实训内容 • 临床症状检查 • 包涵体检查 • CDV诊断试剂盒诊断法

5. （一）临床症状检查 当出现以下情况时，应怀疑犬感染了CDV。 • 发热（双相热型） • 结膜炎,眼与鼻有分泌物，鼻干（裂）有咳嗽、呼吸急促等支气管肺炎症状。 • 眼、鼻有分泌物，厌食，呕吐，尿黄，腹泻。 • 出现神经症状，如局部抽搐，后躯痳痹，转圈运动等。 • 患犬腹部皮下有脓性皮疹、足垫角化增厚。

6. （二）包涵体检查 • 偶尔在急性感染中可以从血涂片(特别是淋巴细胞，偶尔中性粒细胞)的细胞内发现包涵体。 • 制备血涂片 • 吉姆萨染色 • 镜检

7. 包涵体嗜酸性染色，主要在细胞浆中，大小为1~2μm，呈圆形或椭圆形，偶见细胞核中。１个细胞中可有1~10个（平均2~3个）包涵体。包涵体嗜酸性染色，主要在细胞浆中，大小为1~2μm，呈圆形或椭圆形，偶见细胞核中。１个细胞中可有1~10个（平均2~3个）包涵体。

8. （三）CDV诊断试剂盒诊断法 • CDV诊断试剂盒组成 • CDV Ag 试纸卡 • 一次性吸管 • 样品稀释液 • 单只包装消毒样品收集棉签

9. 原理

10. 操作步骤 用生理盐水沾湿棉签收集狗眼部及结膜分泌物，鼻液，唾液，尿液。如是血清/血浆则直接用滴管（滴加1滴血清，再加3滴稀释液）。 将棉签侵入装有样品稀释液的试管，充分搅拌混匀后，静置1min，用一次性滴管取上清液。 取出试纸，开封后平放在桌面，逐滴（间隔2秒）滴加样品液，2~3滴，直到显示窗处有红色液体流出。

11. 检测结果 滴加样品液后，待样品在反应板上完全扩散，在10分钟内进行判断，10分钟之后的反应视为阴性。 阳性 阴性 无效 无效 • 阴性:当位置C显示出红色线条，而位置T不显色时，判为阴性。 • 阳性:当位置C显示出红色线条，而位置T同时显示出红色线条时，判为阳性。 • 无效:C线不显红色线条，无论位置T显示出红色线条与否，该试剂盒判为无效。

12. 注意事项 • 1. 注意检测卡的质量：如果发现过期、封口有破损、污染等，试纸可能已经失效。 • 2. 保存：室温避光保存，不可冷冻。注意有效期（18个月） • 3. 所有检测卡一旦启封，须在1h内使用。 • 4. 检测卡及配套用品都是一次性，不可交叉及重复使用。 • 5. 本检测卡用于现场快速检测分析，仅提供定性检测结果，应结合临床症状或其它检测方法进行确诊，不作为确诊的唯一证据。

13. 四、考核标准 • 优秀 • 操作熟练，步骤方法正确，结果判定准确。 • 合格 • 能独立完成操作，操作较熟练，结果判定较准确。 • 不合格 • 操作错误较多或有严重错误。