Unveiling 25 Years of MYC: Insights into Oncogene Regulation

1. Reflecting on 25 years with MYCNatalie Meyer and Linda Z. Penn • v-gag-myc há 25 anos • Temos hoje 19 mil papers sobre myc

3. Oncogene? • Boa pergunta, nunca estava mutado em tumores... • Mutações insercionais • V-gag-myc criado pelo MC29 (mielocitomatose aviária) • Provirus de leucemia murina tb! • Fica portanto dependente do promotor viral • Translocações cromossômicas • Imunoglobulina, cromossomos 14, 2 (H) ou 22 (L) com 8 (Myc) • T cell receptor + Myc • Amplificação gênica (> 50 cópias) • double-minutes  HSR em cancer de cólon e leucemias • MYCN (desenvolvimento)  neuroblastomas • MUCL1 (desenvolvimento)  cancer de pulmão, ovário e tumores sólidos • c-Myc N-Myc, L-Myc • Logo, desregulaçãosem mutação tb é do maaaaaaal

4. Desregulando c-myc • The c-Myc protein or the c-myc gene is overexpressed in a wide variety of human cancers with 80% of breast cancers, 70% of colon cancer, 90% of gynecological cancers, 50% of hepatocellular carcinomas and a variety of hematological tumors possessing abnormal myc.

5. Desregulando o controle de c-myc

6. Caracterização de c-Myc • Padrão de expressão: PDGF  sobe e desce em duas horas • Logo o mRNA tem rápido turnover • Cauda poliA pouco durável por causa de AU em 3’UTR  perda!?zxw* • Padrão de fosforilações conhecido • Estabilidade da proteína • S62  T58  ubiquitililação • Ras estabiliza • Primeiro gene controlado por controle de elongação de transcrição (paradinha!) • AUG (p64) fica no exon2! Outros 2 promotores: p67 e MycS • Bob Weinberg = cooperação oncogênica = myc + ras • Que que ele faz? • Acharam um zíper de leucina nele (além de um HLH domain) • Fos tinha zíper de leucina (e era um fator de transcrição!) • Daí fundiram um domínio de Myc em Gal4  tchan!

7. Myc/Max • Dimerização com Max explicou tudo • Saci pererê • Ligação a E-box • Myc (ligado a Max) recruta TRRAP, que recruta HAT (GCN5) e SWI-SNF (remodelador) • Mas funciona como repressor tb! • De si próprio! E de tantos quantos ele ativa... • Mecanismo que interfere com promotor basal • Genes ativados famosos: • Protimosina, Ornitina descarboxilase, H19, miRNA • ChIP chip  rede completa = 15% do genoma! • Database MYC CANCER GENE http://www.myc-cancer-gene.org/

8. Regiões de MYC e MAX (5’-CA[C/T]GTG-3’) The c-Myc RNA and protein have short half lives (30 min and 20 min, respectively) as compared to those of Max (3 hrs and >24 hrs, respectively), and in most systems Myc appears to be the limiting, regulated component of the heterodimer. Mad levels, as opposed to Myc, increase during differentiation.

10. Max/Max | Myc/Max | Mad/Max Sin3 HADAC

12. Como Myc transforma? • Go/G1  fase S • Inibe inibidores de CDK • Repressão de p21 • Seqüestro • Degradação de p27 (pois induz Cul1) • Induz ciclinas D1, D2, E1, A2, cdk4, E2F1, E2F2, cdc25A • Promove crescimento celular (dobrar tamanho) • Promove instabilidade cromossômica!!! • ROS • Anti-p53 • Promove angiogênese ativando cluster miR17-92 • N-Myc induz hTERT (=telomerase!) em neuroblastoma

14. Apoptose • Desregulação promove proliferação e sensibilidade a apoptose • Myc  p19ARF  p53 • Perda de sensibilidade a apoptose  clone tumoral • Famoso experimento de controle por tetraciclina • Bloqueio fazia tumores regredirem • Desbloqueio  apoptose tumoral