第八章红细胞血型

第八章红细胞血型 ( Red blood group ) 武红艳 Tel：3831716 Email: why@xxmu.edu.cn 法医物证学教研室

Contents 第一节概论第二节 ABO血型第三节 H抗原与分泌型第五节 MNSs血型第六节 Rh血型

教学要求 • 掌握 1.红细胞血型检测的基本原理和促进因素； 2.ABO血型及分泌状态的抗原特征，表型，亚型、变异型、群体遗传学特点及分型方法。 • 熟悉 MNSs、Rh血型抗原与抗体的概念、种类、结构特点、群体遗传学特点，亚型及稀有型的基本情况。 • 了解红细胞血型发现的历史及命名规律；Lewis等变异血型。

红细胞血型(red blood group) : 是指红细胞表面抗原由遗传所决定的个体差异,是血液的遗传标记。特征：个体特异性、终身不变、遵循孟德尔遗传定律。第一节概论

国际输血协会(ISBT)规定了血型抗原必须是用相应抗体检测到的红细胞表面抗原，属于遗传性状，并于1995年颁布了分类和命名方法。至今已将所发现的人类共有近270个红细胞血型抗原的29个血型系统。一、命名

红细胞血型系统ISBT命名

红细胞血型系统的抗原命名及代号

红细胞膜由蛋白质、多糖和脂类组成，呈‘脂质双层、液态镶嵌’；红细胞膜由蛋白质、多糖和脂类组成，呈‘脂质双层、液态镶嵌’；红细胞膜构成：50% 的蛋白质、 40% 的脂质、不足 10%的糖侧链；抗原决定簇---糖链; 实质：红细胞膜抗原二、红细胞血型抗原

红细胞血型抗原根据化学结构可分为3类型

三、抗体分类 （一）根据抗体的合成方式天然抗体：没有经过确切的抗原刺激而存在于人血清中的抗体，也称作 “规则” 抗体。如抗A抗体、抗B抗体。免疫抗体：有明确抗原刺激或经过人工免疫而产生的抗体，也称作“不规则” 抗体。如抗M抗体等。

（二）根据抗体血清学反应特点 “寒冷”抗体：最适反应温度为 4~20℃，可在盐水介质中与红细胞发生凝集反应，故又称盐水抗体或完全抗体。多为IgM 类。 “温暖”抗体：最适反应温度为37℃，需要加入其他试剂才可出现可见的凝集反应，因而又称为不完全抗体。

四、红细胞血型的检测 凝集反应（agglutination），即在颗粒性抗原悬液中加入对应的抗体，抗体与抗原决定簇特异结合，使颗粒性抗原集聚成团块的现象。红细胞凝集反应：红细胞与对应的抗体发生的凝集反应。正常红细胞凝集的红细胞

红细胞的凝集反应过程可以分为两个步骤 1. 致敏：红细胞抗原与抗体的特异性结合; 此种结合是可逆的。 2. 凝集：结合了抗体的红细胞形成网状团块。（一）红细胞凝集反应过程致敏的红细胞是否产生凝集，取决于抗体的性质、抗原决定簇的部位与数目及红细胞之间的物理距离等。

RBC表面的负电荷及动电位 动电位：红细胞表面的负电荷与正离子团外自由正离子间形成的电位差称为红细胞的动电位。动电位越大，两红细胞间距越大动电位越小，两红细胞间距越小

1.缩小红细胞的间距 通过降低红细胞的动电位和物理加压的方法。 2.在抗体间搭桥应用抗球蛋白实验法，在含有红细胞和抗体的反应溶液中加入与抗体对应的第二抗体（抗球蛋白抗体），连接已致敏红细胞上的抗体，间接使红细胞凝集。抗人球蛋白试验又称Coombs Test，是检测不完全抗体的抗原抗体反应的经典方法。促凝集因素

1900 年，Landsteiner，奥地利，人类第一个血型系统（ABO血型系统）。在输血、器官移植、人类遗传学及法医学研究中具有重要意义。 1924年，Bernstein ABO血型的遗传学说—三复等位基因学说。第二节 ABO 血型系统 ( ABO red blood group)

按照 Bernstein 三复等位基因学说，ABO血型系统抗原的合成定位于9号染色体长臂(9q34)上的IA，IB，Io三个等位基因控制。 IA和IB为共显性、 Io为隐性基因，由此构成6种基因型和四种表型。

一、ABO抗原结构 以H物质为前提，故又称 “ABH血型”； ABO抗原是由各基因表达不同的糖基转移酶，催化不同糖链的生成而形成的； O型红细胞没有糖基转移酶，没有AB抗原生成，只有H抗原（孟买型除外）。在ABO血型物质合成过程中：控制控制基因酶合成抗原

L-岩藻糖 D-半乳糖 N-乙酰半乳糖胺 N-乙酰葡萄糖胺

9q34，全长约 18Kb， 7 个外显子 二、 ABO 等位基因结构与命名

4个错义突变 ABO 等位基因的序列差异 796/803 α3-N-乙酰-D-氨基半乳糖转移酶 7个单碱基替换 α3-D-半乳糖转移酶 258G 单碱基缺失

三、 ABO 血型的分型方法 1）凝集反应分型原理：抗原与特异性抗体的反应来分型。正定型试验 (direct grouping)：用抗体来判定抗原。反定型试验(reverse grouping)：用抗原来判定抗体。 B AB O A

2) DNA分型方法 ① PCR- RFLP分型方法； ② PCR-SSCP分型方法； ③ 质谱分析分型方法； ④测序分型方法等。

A、B、O基因PCR- RFLP分型 B基因可以切开，A、O基因不能切开 O基因可以切开，A、B基因不能切开

PCR-RFLP法判定ABO基因型 ABO基因分型凝胶电泳图 M AA AO BB BO OO AB

四、ABO血型的亚型 • 邓格恩及希尔斯费尔德于1911年发现A血型的亚型； • A型中存在A1及A2亚型； • A型人中，A1型约占80%，A2型约占20%，其他A亚型不多见；B亚型一般比A亚型更少。 A 亚型的遗传以 A 1 、A 2 为等位基因，A 1 对 A 2 为显性，A 2 对 O 为显性，A 1 与B，A 2 与B是共显性.

A1与A2亚型的区分 C467T突变 1059C 缺失

五、ABO血型的遗传分析

案例 2006.11，深圳龙岗区一对夫妇在龙岗中心医院生下一婴儿。医护人员惊奇地发现该婴儿血型竟为AB型, 而父母分别是O型血和AB型血。为什么？

B ( A ) 803 G 三代家族成员血液标本 A和B双功能活性的糖基转移酶 Cis- AB型血液中心新的等位基因血型基因序列分析

1. 异常的ABO血型----Cis-AB型 六、异常的ABO血型 Cis-AB型（cis是顺反子cistron的缩写）（1）A抗原多为A2；（2）B抗原几乎为弱B；（3）细胞上H抗原的量高于正常的A2B型；（4）血清中含有弱抗B抗体，可识别自身缺乏的B抗原。

Cis-AB产生的原因： （1）染色体不等交换；（2）单碱基错义突变。 A＆B A B

AB ------A基因 A Cis-AB 正常AB O ------B基因 AB ------O基因 AB A O O 三代家系谱

2. 获得性B抗原 A型个体检测出B型活性的现象。（1）A型个体，血清中有正常的抗B抗体；（2）红细胞被抗B抗体弱凝集，但不被自身血清中的抗B凝集；（3）常发生于患癌症或感染性疾病患者，特别是多见于结肠癌与直肠癌患者；（4）获得性B是一过性的，程度随病情变化而变化。

3. 孟买型 1952年在印度孟买发现一种特殊的血型。这种红细胞既无A抗原和B抗原，也无H抗原，他们的基因型为hh，不能产生H物质，即使有IA和(或)IB基因，也不能形成A抗原或(和)B抗原．但IA IB基因可向后代遗传，这种特殊的型,称为孟买型(Bombay) 。除稀有的孟买(Bombay)型红细胞Oh外，所有人红细胞表面都有H抗原 : O＞A2＞B＞A2B＞A1＞A1B。

七、群体遗传学

美国科学家皮特·达达莫博士认为，人类的血型是由进化决定的。我们的4种血型（O型、A型、B型和AB型）并不是在所有的人身上同时出现，而是由于不断进化和人们在不同气候地区定居下来后逐渐形成。在寒冷的年代，由于草原上可供吃用的东西匮乏，游牧部落不得不去适应新地形所能提供的新食物。由于新的饮食结构出现，人的消化系统和免疫系统也会随之有所变化，紧接着血型也会有所变化。

公元前6万至4万年 O血型果实杂食非洲欧洲亚洲野草、昆虫、果实、野兽公元前2.5万-1.5万年 A血型热带草原寒冷喜马拉雅山西欧和日本公元前1.5万-新纪元 B血型蒙古人东欧人 A型血印欧民族 B型血蒙古人混杂 1000年的时间 AB血型耐病、抵抗细菌 C型？

一、分泌型的发现 1910年，Moss 发现不仅血清中有ABH物质，精液和唾液中也有ABH物质; 1930年，Lehrs 根据唾液中是否有ABH物质将个体分为分泌型和非分泌型; 1932年，Sehiff 和Sasaki 指出符合孟德尔遗传定律。第三节 H抗原与分泌型

二、H抗原与分泌型抗原 分泌型（secretors, Sec）: 80％的人唾液中可由中和试验检出H抗原; 非分泌型（nonsecretors,non-Sec）: 20％的人唾液H抗原中和试验为阴性; 分泌型人唾液中与H抗原同时存在的还有A和B抗原，在各种体液中均可检测到ABH抗原; 唾液及精液为最多，其他组织液含量较少。

主要是 分泌液 Ⅰ型红细胞只产生 Ⅱ型

三、抗原结构和双结构基因 1980年以前，调节基因(Se基因)控制分泌组织的H基因的表达。目前已明确控制分泌表达的双结构基因概念(two structural genes concept)。 FUT1（H基因）和FUT2（Se基因）

FUT1 (H) 岩藻糖转移酶岩藻糖转移酶 19号 Ⅰ型红细胞只产生 FUT2 (Se) 332AA sese 365AA SeSe Sese 非分泌型分泌型 Hh HH 红细胞有H抗原 Ⅱ型红细胞无H抗原 Ⅰ型 Ⅱ型 hh

第八章 红细胞血型