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生物科技與生命倫理 ~DNA 的真相 ~

生物科技與生命倫理 ~DNA 的真相 ~. 6/5 科學實作練習活動. DNA 萃取原理. 將複雜的細胞分子混合物加入有機溶媒，除去蛋白質及其他成分，就可以純化 DNA 。 一般常用酚及氯仿 (phenol/chloroform) 可使蛋白質變性 (denaturaion) 的特性來進行萃取的步驟， DNA 和 RNA 不溶於有機溶媒中，而溶於水層。 另外，分子選殖 (molecular cloning) 常利用洋菜膠 (agarose) 來分離不同大小的 DNA 片段或用以純化 DNA 。. 口腔黏膜細胞. DNA 萃取溶液. ＊ 口腔細胞 DNA 萃取步驟.

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Presentation Transcript

  1. 生物科技與生命倫理~DNA的真相~ 6/5科學實作練習活動

  2. DNA萃取原理 • 將複雜的細胞分子混合物加入有機溶媒，除去蛋白質及其他成分，就可以純化DNA。 • 一般常用酚及氯仿(phenol/chloroform)可使蛋白質變性(denaturaion)的特性來進行萃取的步驟，DNA和RNA不溶於有機溶媒中，而溶於水層。 • 另外，分子選殖(molecular cloning)常利用洋菜膠(agarose)來分離不同大小的DNA片段或用以純化DNA。

  3. 口腔黏膜細胞 DNA萃取溶液 ＊口腔細胞DNA萃取步驟 放置恆溫水槽65℃for 6 minutes 放置恆溫水槽98℃for 2 minutes

  4. DNA水平電泳槽 ＊組裝水平電泳膠片等膠片凝 固約15分鐘

  5. Agarose(膠片) (三分一的高度)

  6. 1.拿Loding dye+自己口腔萃取DNA溶液 染色1:5 2.電壓100V：電流由負極往正極流 3.加好SAMPLE 等待25分鐘左右

  7. Etbr染色原理 • EtBr會嵌入核酸配對(雙股DNA或單股DNA、RNA的自我配對二級結構)之間。 • EtBr受到紫外線照射時會發出橘紅色的螢光，與核酸結合時的螢光強度約是游離態時的20倍。藉此可偵測核酸。

  8. (1)溴化乙啶(ETBR)染色 (2)在使用UV照射 (3)最後使用電泳膠片顯像儀， 看自己DNA序列 (跑好電泳膠片) 1.注意事項:(1)ETBR是一個致癌化學物質 ，使用前請戴手 套，使用請小心，觸碰到ETBR請別亂摸周遭環境 2.ETBR廢棄物要在陽光下，照射N禮拜才會分解掉

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