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第 2 章复习

第 2 章复习. 1. 如何理解细菌的基本形态? 2. 可采用哪些方式对细菌进行形态学检查 ? 3. 细菌的基本结构有哪些? 4. 细菌细胞壁有几种类型?革兰阳性菌细胞壁与革兰阴性细胞壁有何区别?在染色性、抗原性、致病性、药物敏感性等方面有哪些差异性? 5. 细菌的特殊结构各有何医学意义 ?. 第三章 细菌的生理. 学习提纲.  第一节 细菌的理化性状  第二节 细菌的营养与生长繁殖  第三节 细菌的新陈代谢和能量转换  第四节 细菌的人工培养  第五节 细菌的分类. 学习要求. 1 ) 掌握 细菌生长繁殖的条件 ;

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第 2 章复习

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  1. 第2章复习 1.如何理解细菌的基本形态? 2.可采用哪些方式对细菌进行形态学检查? 3.细菌的基本结构有哪些? 4.细菌细胞壁有几种类型?革兰阳性菌细胞壁与革兰阴性细胞壁有何区别?在染色性、抗原性、致病性、药物敏感性等方面有哪些差异性? 5.细菌的特殊结构各有何医学意义?

  2. 第三章 细菌的生理

  3. 学习提纲 •  第一节 细菌的理化性状 •  第二节 细菌的营养与生长繁殖 •  第三节 细菌的新陈代谢和能量转换 •  第四节 细菌的人工培养 •  第五节 细菌的分类

  4. 学习要求 • 1)掌握细菌生长繁殖的条件; • 2)掌握细菌与医学相关的合成代谢产物及意义; • 3)熟悉细菌常见的生化反应、生长繁殖的规律和人工培养、细菌的分类和命名。 • 4)了解细菌的理化性状、营养和营养类型。

  5. 第一节 细菌的理化性状(了解) 一、细菌的化学组成 水: 占细胞总重量75%-90% 钾、钠、铁、镁、钙等 无机离子: 碳、氢、氮、氧、磷、硫等 有机物: 特有成分: 肽聚糖、胞壁酸、磷壁酸等

  6. 二、物理性状 光学性质 半透明 体积小、表面积大 体表面积 带电现象 革兰阳性菌 pI 2-3 革兰阴性菌 pI 4-5 中性环境带负电荷 半透性 细胞壁、膜有半透性 渗透压 革兰阳性菌 20-25大气压 革兰阴性菌 5-6大气压

  7. 第二节 细菌的营养与生长繁殖 一、细菌的营养类型 以简单的无机物为原料,合成菌体成分 自养菌 以多种有机物为原料,合成菌体成分并获能量 异养菌 病原菌属于何种营养类型?

  8. 二、 细菌需要的营养物质 1 水分:水是良好的溶剂,整个分解代谢、合成代谢均需有水才能进行; 2 碳源:用于合成菌体的糖类、脂类、蛋白质、核酸等成分,是细菌获得能量的主要来源;病原菌主要从糖类获得碳。 3 氮源:利用氨基酸、蛋白胨等合成菌体的蛋白质、酶、核酸等; 4 无机盐类:钾、钠、钙、镁、磷、铁、硫、氯、锰、锌等无机盐,是构成菌体成分,调节细胞渗透压和酸碱平衡,构成细菌的酶类; 5 生长因子:主要是B族维生素族、某些氨基酸、嘌呤和嘧啶、X、V生长因子等 。

  9. 三、细菌摄取营养物质的机制 • 被动扩散:营养物质从浓度高向浓度低的一侧扩散,其驱动力是浓度梯度,不需要提供能量。 • 主动转运系统:是细菌吸收营养物质的主要方式,其特点是营养物质从浓度低向浓度高的一侧转运,并需要提供能量。 • 依赖于周浆间隙结合蛋白的转运系统 • 化学渗透驱使转运系统 • 基团转移

  10. 大多数细菌最适酸碱度为中性或弱碱性,即PH7.2 – 7.6 四、细菌生长的条件 ①水 ②碳源 ③氮源 ④无机盐 ⑤生长因子 有些细菌需要 1、充足的营养物质 2、适宜的温度:37℃ ①多数等渗或低渗 ②少数高渗 4、渗透压 3、合适的PH ①对氧气要求:专性需氧菌 微需氧菌 兼性厌氧菌 专性厌氧菌 ②对CO2要求: 5% CO2 5、必要的气体环境

  11. 有氧的条件下厌氧菌不能生存的原因 • (1)缺乏氧化还原电势(Eh)高的呼吸酶:各种物质均有其固有的Eh。在氧化还原过程中,Eh高的物质可氧化Eh低的物质,反之不能。普通培养基在有氧环境中Eh可达300mV左右,因此细菌必须具有Eh比它们更高的呼吸酶,如细胞色素和细胞色素氧化酶,才能氧化环境中的营养物质。 • 一般好氧性细菌Eh在+100mV以上均可生长,以Eh 值为+300mV~+400mV时为适;兼性厌氧菌在+ 100mV以上时进行好氧呼吸,在+ 100mV以下时进行发酵。 • 而厌氧性细菌因缺少细胞色素和细胞色素氧化酶,只能在Eh值低于+ 100mV 以下生长。

  12. 有氧的条件下厌氧菌不能生存的原因 (2)缺乏分解有毒氧基团的酶:细菌在有氧环境中代谢时,常产生具有强烈杀菌作用的超氧阴离子(O2-)和过氧化氢(H2O2)。在有铁离子存在条件下,这两种物质还可产生对生物大分子有损害作用的羟基( .OH)。 Fe3+/Fe2+ O2-+ H2O2 —————→ O2 +OH- + .OH SOD 2O 2- + 2H+—————→ H2O2 +O2 触酶 2H2O2 —————→ 2H2O+O2 过氧化物酶 无触酶菌:H2O2 + AH2———→ 2H2O+A(某种有机物)

  13. 五、 细菌的生长繁殖 • (一)细菌个体的生长繁殖 • 细菌以简单的二分裂方式进行繁殖。 • 繁殖一代所需时间约20-30min。 • 但少数细菌代时较长,如结核分枝杆菌代时为18小时。 • (二)细菌群体的生长繁殖 迟缓期 (lag phase) 对数期 (logarithmic phase) 稳定期 (stationary phase) 衰亡期 (decline phase)

  14. 细菌群体的生长繁殖规律 总菌数 9.0 8.5 细菌数的对数次 稳定期 8.0 衰退期 7.5 活菌数 对数期 7.0 6.5 6.0 迟缓期 5.5 0 30 10 15 25 5 20 小时 分为四期:迟缓期 、对数期、稳定期、衰退期

  15. 第三节 细菌的新陈代谢与能量转换 一、细菌的能量代谢 1、发酵:指微生物细胞将有机物氧化释放的电子直接交给未完全氧化的中间产物(有机物),同时释放能量并产生各种不同的代谢产物。 在发酵的条件下有机化合物只是部分的被氧化,释放了小部分能量。发酵的种类有很多,如生物体内葡萄糖被降解成丙酮酸的过程称为糖酵解。在无氧条件下,不同的微生物分解丙酮酸后会积累不同的代谢产物,如甘油、乙醇、乙酸、乳酸等等。

  16. 分子氧为受氢体: 有氧呼吸 以其它无机物为受氢体:厌氧呼吸,如专性厌氧菌 2.呼吸:微生物在降解底物的过程中,将释放出的电子交给NAD(P)+、FAD或FMN等电子载体,再经电子传递系统传给外源电子受体,从而生成水或其它还原型产物并释放出能量的过程,称为呼吸作用。 呼吸作用与发酵作用的根本区别在于:电子载体不是将电子直接传递给底物降解的中间产物,而是交给电子传递系统,逐步释放出能量后再交给最终电子受体。

  17. 二、细菌的物质代谢 (一)细菌的分解代谢 各种细菌所具有的酶不完全相同,对营养物质的分解能力亦不一致,因而具有不同的代谢产物。因此,在培养基中加入指示剂,指示剂可以和被测终产物反应,产生肉眼可见的变化,如颜色的改变等,这种利用生物化学方法来鉴别细菌的方法。 称:细菌的生化反应

  18. 常见的生化反应 对 蛋白质和氨基酸的分解 糖发酵试验 对 糖 的 分解 吲哚试验(I) 甲基红试验(M) 硫化氢试验 VP试验(V) 其他试验 尿素酶试验 枸橼酸盐利用试验(C)

  19. 1.糖的分解代谢 HCOOH 脱氢酶 CO2+H2 • (1)糖发酵试验 葡萄糖 如大肠杆菌有甲酸脱氢酶 伤寒沙门菌缺少此酶,产酸不产气。 溴甲酚紫指标剂显色范围: 中性环境:PH6.8以上紫色 酸性环境:PH5.2以下黄色

  20. (2)VP试验 • 产气杆菌使丙酮酸脱羧 生成乙酰甲基甲醇,在碱性溶液中氧化成二乙酰与培养基中含有胍基的化合物反应生成红色化合物。 VP(+) 红色 VP(-) 不变色 产气杆菌 大肠埃希菌

  21. 对照 阳性 阴性 (3)甲基红试验(M) • 产气杆菌分解葡萄糖产生丙酮酸后使丙酮酸脱羧 生成中性的乙酰甲基甲醇,故培养液PH﹥5.4; • 大肠杆菌分解葡萄糖产生丙酮酸,不脱羧,PH﹤4.5。 甲基红: PH﹥5.4,黄色,M(-);PH﹤4.5,红色,M(+)。

  22. 2.蛋白质的分解代谢 (1)吲哚试验(I) 大肠杆菌含色氨酸酶,分解培养基中色氨酸产生靛基质(吲哚无色)+ 指示剂对二甲基氨基苯甲醛生成玫瑰色吲哚。 - 不变色 + 玫瑰色(吲哚)

  23. (2)枸橼酸盐利用试验(C) 产气杆菌分解枸橼酸盐生成碳酸盐,并分解铵盐生成氨,培养基变成碱性,指示剂溴麝香草酚蓝成蓝色,为阳性。 指示剂:溴麝香草酚蓝 (绿色-蓝色) 大肠杆菌:— 产气杆菌:+ 阳性 对照 阴性

  24. (4)尿素酶试验 (3)硫化氢试验 变形杆菌有尿素酶,分解尿素产氨,酚红指示剂显红色;可供鉴别。 • - 不变色 • + 红色 变形杆菌能分解胱氨酸,产生硫化氢,可供鉴别。 • - 不变色 • + 黑色(醋酸铅或硫酸亚铁)

  25. (二)细菌的合成代谢产物及其医学意义 利用分解代谢的产物和能量,合成新的物质 合成 产物 热原质 抗生素 毒素和侵袭性酶 维生素 色素 细菌素

  26. 细菌的合成代谢产物按医学意义不同分为: (1)对人体有致病作用的合成代谢产物: • 热原质 • 毒素 • 侵袭性酶类 (2)对人体对治疗作用的细菌合成代谢产物: • 抗生素 • 维生素 (3)对细菌有鉴别作用的合成代谢产物有: • 色素 • 细菌素

  27. 热原质 (1)概念:许多革兰阴性菌和革兰阳性菌,在代谢过程中能合成一种物质,用极微量注入人体或动物体内即可引起发热反应,故名热原质。 (2)作用:注入人体或动物体内可引起发热反应。革兰阴性菌的热原质是细菌细胞壁中的脂多糖即内毒素。少数革兰阳性菌能合成致热性多糖。

  28. 我国医院输液治疗的现状与风险 据中国卫生部药品不良反应监测中心推算,我国每年因药品不良反应而住院的病人有250万,在住院病人中,每年约有19.2万人死于药品不良反应。 安全合理用药与和谐社会:共同的责任 摘自2005年第七届中国药师周大会文件 2009年一年,中国医疗输液用了104亿瓶,相当于13亿人口每人每年输了8瓶液,远远高于国际上2.5―3.3瓶的水平。

  29. 流感爆发时,某医院门诊输液大厅里人满为患、流感爆发时,某医院门诊输液大厅里人满为患、 空气污浊、交叉感染的现象十分严重。

  30. 如何除去热原质? 热原质耐高温,不被高压蒸气灭菌所破坏。药液、器皿等被细菌污染,即可能有热原质存在。 除去方法(1)临床上用的药液必须无热原质存在,可用吸附剂或过滤等方法除去;(2)玻璃器皿和用具要经250℃30分钟或者180℃4小时高温处理,才能破坏热原质。

  31. 微生物在代谢过程中产生的,能抑制或杀死某些病原微生物的物质。微生物在代谢过程中产生的,能抑制或杀死某些病原微生物的物质。 抗生素 维生素 细菌合成某些维生素可分泌到周围环境中,可供人体利用

  32. 色 素 水溶性色素 脂溶性色素 细菌素 细菌产生,具有杀菌作用的蛋白质。其作用范围窄,仅对有亲缘关系的细菌有杀伤作用。可用于分型。

  33. 第四节 细菌的人工培养 一、培养细菌的方法 • 根据不同标本及不同培养目的,可选用不同的接种和培养方法。常用的有分离培养和纯培养两种方法。 • 病原菌的人工培养一般采用35-37℃,培养时间多数为18-24h,但有时需根据菌种及培养目的作最佳选择。

  34. 二、培养基 1、概念:用人工方法配制而成的,专供微生物生长繁殖使用的混合营养物制品。

  35. 2、培养基的种类 • 按物理性状分: 1.液体培养基(肉汤培养基): 牛肉浸膏(3~5g)、蛋白胨(10g) 氯化钠(5g)、1000mldH20等。 2.半固体培养基:在肉汤中加入0.2%-0.5%的琼脂即成。 3.固体培养基:在肉汤中加入2%-3%的琼脂即成。

  36. 按用途将常用培养基分为 选择培养基 厌氧培养基 鉴别培养基 增菌培养基 基础培养基

  37. 三、细菌在培养基中的生长现象 菌落(R型) 1.固体培养基中 菌落(S型) 菌苔

  38. 菌落的形态特征有助于细菌的鉴别

  39. 2.液体培养基中的生长现象 表面生长 混浊生长 沉淀生长

  40. 3.半固体培养基中的生长现象 无鞭毛 细菌 有鞭毛 细菌 混浊生长 沿穿刺线生长生长

  41. 四、人工培养细菌的意义 感染性疾病的诊断 医学中的应用 细菌学研究 生物制品的制备 制造各种产品 工农业 生产中的应用 处理垃圾 制造菌肥农药等 基 因 工程中的应用 表达重组DAN制备产品

  42. 第五节 细菌的分类和命名原则 • 分类方法 • 传统分类:形态和生理特性 • 数值分类:细菌组分、代谢产物组成 • 分子生物学分类::(G+C )mol%等 • 分类层次:界、门、纲、目、科、属、种 • 细菌的命名方法:拉丁双命名法,即属名+种名 • 属名表示细菌的形态或发现者或有贡献者;种名表示细菌的性状特性、寄生部位或所致疾病等。如大肠埃希菌的学名为Escherichia(属名)、coli(种名),简写为E.coli; Escherichia是Escherich在1885年发现的,coli是结肠的意思。 • 中文名称则与拉丁双命名法相反:种名在前,属名在后,如大肠埃希菌。

  43. 小 结 1. 细菌的理化性状 2. 细菌的营养与生长繁殖 3. 细菌的新陈代谢和能量转换 4. 细菌的人工培养 5. 细菌的分类

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