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实验前：

实验前：. 资料准备 多查文献，查足文献 国外为主，掌握动态 国内为辅，词汇学习 成竹在胸. 实验前：. 实验技术准备 勤学好问，不耻上问 —— 多向已 掌握该技术的人学习和请教 书山有路勤为径 —— 多认真阅读 经典的实验技术指南，如 《 分子 克隆实验指南 》. 实验前：. 实验技术准备 前人栽树，后人乘凉 —— 查找相 关文献 查找 PCR 引物（注意核对序列） 查找核酸探针序列（ AP-1 ） 查找实验步骤（ EMSA ）. 实验前：.

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Presentation Transcript

  1. 实验前： • 资料准备 • 多查文献，查足文献 • 国外为主，掌握动态 • 国内为辅，词汇学习 成竹在胸

  2. 实验前： • 实验技术准备 • 勤学好问，不耻上问——多向已 掌握该技术的人学习和请教 • 书山有路勤为径——多认真阅读 经典的实验技术指南，如《分子 克隆实验指南》

  3. 实验前： • 实验技术准备 • 前人栽树，后人乘凉——查找相 关文献 • 查找PCR引物（注意核对序列） • 查找核酸探针序列（AP-1） • 查找实验步骤（EMSA）

  4. 实验前： • 实验设计：磨刀不误砍柴功 • 实验组、对照组设置完整合理

  5. 实验前： • 实验设计 • 绘出实验加样草图，具体到每 个孔加什么、何时加、加多少

  6. 实验中: • 预实验 • 同一批次小鼠，先每组选择 2-3只摸索致死剂量 • 不同批次的试剂 • 随机化原则 • 实验结果稳定的保证 • 不等于随便和随手抓

  7. 实验中： • 该繁则繁 • 抽提RNA时戴手套 • 该简则简 • 无须无菌操作的步骤 • 无需防止RNA酶污染的步骤

  8. 实验中： • 该快则快 • 开始调节pH值 • 该慢则慢 • 细胞培养时的无菌操作 • RT-PCR时的加样

  9. 实验中： • 出现加样错误时 • 及时弥补（如调换加样孔 ） • 做好记录 • 充分利用好时间 • 实验间隙写实验记录

  10. 实验中： • 注意自我防护 • 细菌 • 致癌物质：EB、DEPC • 辐射：γ-32P • 具有腐蚀作用的试剂：强酸 • 有毒物质：丙烯酰胺

  11. 实验后： • 及时记录，防止遗忘 （好记性不如烂笔头） • 及时总结，不要盲目向下进行 （欲速则不达） • 调整实验思路 • 更换细胞（THP-1、U937、PBMC） • 重新配试剂 （EMSA溶液A、乙酸铵）

  12. 实验后： • 向高手请教和复习文献资料 （三人行，必有我师 ） • 相信自己的实验结果 • 鼠CpG-N ODN→人CpG-S ODN • 抗TLR9抗体并不减少CpG-S ODN 诱导的TNF-a 释放

  13. 谢谢！

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