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第七章 细菌的遗传分析. 一、细菌细胞 拟核,体型小,世代短,分裂快,分布广 二、细菌染色体 双链、环状 DNA 分子,裸露. 第一节 细菌的细胞和染色体. 第二节 大肠杆菌的突变型筛选. 一、大肠杆菌的突变类型 ( 一 ) 合成代谢功能的突变型( anabolic functional mutants ) ( 二 ) 分解代谢功能的突变型( catabolic functional mutants ) ( 三 ) 抗性突变型( resistant mutants ). 二、突变型筛选. 对于不同的突变型具有相应的筛选手段. 第三节 大肠杆菌的性别.
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第七章 细菌的遗传分析 一、细菌细胞 拟核,体型小,世代短,分裂快,分布广 二、细菌染色体 双链、环状DNA分子,裸露 第一节 细菌的细胞和染色体
第二节 大肠杆菌的突变型筛选 一、大肠杆菌的突变类型 (一)合成代谢功能的突变型(anabolic functional mutants) (二)分解代谢功能的突变型(catabolic functional mutants) (三)抗性突变型(resistant mutants)
二、突变型筛选 对于不同的突变型具有相应的筛选手段
第三节 大肠杆菌的性别 一、大肠杆菌性别的发现 含链霉素的培养基: Astrsmet+×B strrmet-→原养型菌落 Astrrmet-×B strsmet+→无原养型菌落 说明: A为雄性,是供体(donor) B为雌性,是受体(receptor) 遗传物质单向转移
二、F 因子与高频重组 F因子(F factor 或 F element): 又称为性因子(sex factor )或致育因子(fertility factor), 封闭环状DNA分子,分子量约3.5×106,长6 × 104bp,为大肠杆菌染色体全长的2%.
F因子的结构包含3个区域: • 原点——转移的起点 • 致育基因——与细菌的接合有关 • 配对区——与染色体上同源序列配对 环状F因子的模式图
三、细菌重组的特点 • 只有偶数次交换才能产生平衡的重组子 • 不出现相反的重组子,所以在选择培养基上只出现一种重组子
第四节 中断杂交与重组作图 一、中断杂交实验原理 把接合中的细菌在不同时间取样,并把样品猛烈搅拌以中断接合中的细菌,然后分析受体细菌的基因型。
基本步骤: • 接合 • 中断杂交 • 杀死Hfr • 检查F-细菌所含基因 • 作图
二、中断杂交作图 根据供体基因进入受体细胞的顺序和时间绘制连锁图。
三.重组作图 • 中断杂交作图是根据基因转移的先后次序,以时间为单位进行定位的,而重组作图是根据基因间重组率进行定位的. • 基因距离较远用中断杂交作图是有效的;基因距离较近,基因间转移时间在2分钟之内,用重组作图
第五节 F´因子与性导 • F´因子 是F 因子携带一段相邻的细菌染色体.
二.性导(sexduction或F´ -duction) • 利用 F´ 因子将供体细胞的基因导入受体形成部分二倍体的过程叫性导. • 性导在遗传分析中的意义
第六节 转化与转导作图 一.细菌的转化与作图 • 转化频率低的原因 1.受体细胞表面受体部位有限; 2.外源DNA进入除受体部位外还必须有酶或蛋白质分子以及能量等的协同作用. • 转化过程 1.双链DNA分子和细胞表面受体部位进行可逆性结合; 2.供体DNA片段被吸入受体细胞; 3.双链DNA转变为单链DNA; 4插入受体细胞的DNA链中; 5.形成一个受体亲代类型的DNA和一个杂种双链DNA
二、转导与作图 转导就是以病毒作为载体把遗传信息从一个细菌细胞传到另一个细菌细胞. • 普遍性转导与作图 宿主DNA随机地被携带在病毒中而导致的转导即~。
两个基因同时转导的现象称为共转导或并发转导(co-tranduction)。两个基因同时转导的现象称为共转导或并发转导(co-tranduction)。 • 双因子转导(two-factor transdution): 每次观察两个基因,通过两个基因之间的共转导频率确定其在染色体上的排列顺序。
同时观察三因子转导(three-factor tranduction)分析: 通过3因子转导可以得到不同类型的转导子及其频率, 频率最低的一类是最难于转导的。
凡是没有得到供体某一基因的细胞不能合成相应的酶,但仍含有母细胞残留的酶,可供这些细胞继续分裂一两次,所有的这些细胞将形成小菌落,称为流产转导型(abortive transductant)。
局限性转导与作图 噬菌体只能转导供体基因组中的特定基因的转导即~。 例如:λ噬菌体整合于宿主染色体特定的附着位点attB处.