Sémiologie : hématologie biologique 1- hémogramme normal

1. Sémiologie : hématologie biologique1- hémogramme normal Pr Philippe NGUYEN Dr Sylvie DALIPHARD Dr Baptiste GAILLARD Année 2009-10

2. Définition de l’hémogramme • Numération des cellules sanguines circulantes • Blood cell count • Méthode automatisée • Valeurs de référence : distinguer le normal du pathologique • L’un des examens biologiques les plus prescrits en médecine.

3. HEMOGRAMME • Nécessité d’un Anticoagulant utilisé : • Les cellules doivent rester en suspension • L’anticoagulant : l’EDTA, chélateur calcique • Rigidifie les membranes, favorise l’agglutination des plaquettes • Prélèvement à jeun (optimal) : • Mais réalisable chez le sujet non à jeun (opacité) : • Le bébé, • L’urgence, • Le patient en réanimation (alimentation parentérale par lipides)

4. HEMOGRAMME • Méthode automatisée : • A partir du sang total EDTA • Quantitatif +++ • Fiabilité de la mesure, reproductibilité (coefficients de variation des mesures) • Contrôles de qualité • Méthode « manuelle » : • Sang total EDTA : étalement du sang sur lame (frottis) • Coloration standard • Lecture au microscope • Contrôles de qualité • Qualitatif +++

5. Exemple : Intrument Beckmann-Coulter : mesure d’impédance Mono PNE PNN GR Plq GB Ly

6. EDTA/ Coloration MGG Bord du frottis GR Agrégat plaquettaire

7. Beckman Coulter

8. Prélèvement sur citrate même patient Beckman Coulter

9. Paramètres érythrocytaires • La numération érythrocytaire a peu de valeur diagnostique (1012/L ou Téra/L) • L’hémoglobine (g/L) reflète la capacité d’oxygénation et définit la notion d’anémie • L’hématocrite (L/L) est le rapport du volume érythrocytaire sur le volume sanguin total

10. Paramètres érythrocytaires • Le volume globulaire moyen (VGM) est un paramètre constant chez l’individu (hors pathologie) : érythropoïèse physiologique (« normale ») • VGM = 90 fL (femto = 10-15) Morphologie : hématies normocytaires

11. Paramètres érythrocytaires • TCMH : teneur corpusculaire en hémoglobine : 29 ± 2 pg (pico = 10-12) • CCMH : concentration corpusculaire moyenne en hémoglobine : 31 à 36 % • Ne peut être supérieur à 36 % Morphologie : hématies normochromes

12. VALEURS NORMALES DE L’HEMOGRAMME CHEZ L’ADULTE (1) Numération (réalisée sur automate Coulter*) : GR/Hématocrite/variations selon l’âge : se reporter aux recommandations de l’ANAES

13. Paramètres de renouvellement érythrocytaire • Réticulocytes : ARN (coloration spécifique) • 20 à 120 Giga/L • « normorégénération » hémolyse physiologique • Erythroblastes circulants • Absents physiologiquement

14. HEMOGRAMME ANAES 1998 0-1 mois 1 mois 2 mois 4 mois 6 mois 9 mois 12 mois Hb (g/dL) 16,6+0,11 13,9 11,2 12,2 12,6 12,7 12,7 Limite inf. 13,4 10,7 9,4 10,3 11,1 11,4 11,3 VGM (µ3)105,3+0,6 101,3 94,8 86,7 76,3+0,6 77,7 77,5 Limite inf. 88 91 84 76 68 70 71 Valeurs usuelles de l’hémogramme chez les enfants de –1 an (1) :

15. VALEURS NORMALES DE L’HEMOGRAMME CHEZ L’ADULTE (2) Formule leucocytaire (réalisée sur automate Coulter*) : Pas de valeur diagnostique de l’expression en %

16. HEMOGRAMME ANAES 1998 Valeurs usuelles de l’hémogramme chez les enfants de –1 an (2) : 0-1 mois 6 mois 12 mois Neutrophiles 4 500 3 800 3 500 (106/L ou Cellules/µL) 1 000-9 500 1 000-8 500 1 500-8 500 Lymphocytes 5 500 7 300 7 000 (106/L ou Cellules/µL) 2 000-17 000 4 000-13 500 4 000-10 500

17. VARIATIONS DES VALEURS DE L’HEMOGRAMME Exercice physique : -  des leucocytes (repos 20 minutes) - démargination des PNN Altitude : - 3 000 / 4 000 m - en permanence -  polyglobulie Exceptionnel en France métropolitaine

18. VARIATIONS DES VALEURS DE L’HEMOGRAMME 1.En fonction de l’ethnie : - Sujet Noir . diminution modérée de l’hémoglobine - 1 g/dL ou 10 g/L sans modifications des constantes érythrocytaires ou du taux de réticulocytes . neutropénie peu importante isolée (> 0.5 109/L) 2. Femme enceinte : - Diminution du taux d’hémoglobine/hémodilution - Hyperleucocytose : PN (7.109/L) - Diminution modérée du taux de plaquettes 3. Consommation d’alcool « buveurs sociaux » - VGM reste dans les valeurs de référence 4. Tabac - Augmentation du taux de polynucléaires neutrophiles

19. Difficultés d’interprétation de l’hémogramme • Difficultés d’interprétation de la numération érythrocytaire, de la concentration d’hémoglobine et de l’hématocrite en cas d’hémodilution • Fausse anémie (hémodilution) • Thrombo-agglutination sur EDTA • Citrate

20. Satellitisme plaquettes aux PNN

21. HEMOGRAMME Facteurs de variations pré-analytiques : • Liés au prélèvement • Garrot • Matériel de prélèvement • Liés à l’échantillon • Conservation : température ambiante, 6 h (optimal < 3 h) • Transport • Anticoagulant thromboagglutination EDTA • Hémolyse Hémoglobine (sous réserve) • Micro-caillots plaquettes • Liés au patient • Hyperlipémie Hb CCMH TGMH • Erythroblastes leucocytes NB :constance du VGM/identité patient sur un délai court