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Contr le de qualit de l antibiogramme

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Contr le de qualit de l antibiogramme

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Presentation Transcript

    1. Contrle de qualit de lantibiogramme F. OHMANI INSTITUT NATIONAL D HYGIENE

    2. Principe: Evaluer le lot de milieu prpar Evaluer Le lot des antibiotiques utiliss Evaluer la mthode choisie au laboratoire Travailler dans des rgles de conformit strictes Obtenir les meilleurs rsultats.

    3. Matriel ncessaire : Un rfrigrateur Une tuve Un conglateur 80C pour les souches Des boites de ptri striles 90 mm Des tubes essai vis striles Papier millimtr ou rgle gradue Souches de rfrence Disques dantibiotiques Eau physiologique Ecouvillons striles Un distributeur de disques dantibiotiques ou pince Milieux dshydrats Gamme de Mac Farland

    4. Mthode: Prparer le milieu Muller Hinton Prparer le milieu trypticase soya agar Sortir les souches de rfrence du conglateur, les repiquer sur milieux appropris, faire des copies sur la glose TSA en pente Les garder 4C.

    5. METHODE (suite 1): Prparer les suspensions bactriennes (turbidit 0,5 Mac Farlan) Les souches utilises sont : E. coli ATCC 25922 (dilue au 1/100) S.aureus ATCC 25923 (dilue au 1/10) P.aeruginosa ATCC 27853 (dilue au 1/100)

    6. METHODE (suite 2): Tromper un couvillon strile Ensemencer les boites de MH en stries sur toute la surface du milieu trois reprises en faisant tourner la boite de 60 aprs chaque application. Mthode de diffusion sur glose.

    7. METHODE (suite 3): Laisser scher les boites 5 mn Dposer les disques dantibiotiques Respecter la distance entre les disques ou utiliser un distributeur automatique Pas plus de 7 disques par boite. Incuber 37C pendant 18 24 h.

    8. LECTURE Mesurer les diamtres dinhibition du germe Utiliser une rgle gradue Les zones dinhibition comprises dans les limites publies Tableau N1

    12. Enregistrer les rsultats La date de ralisation du test Fiches spciales de contrle de qualit

    14. la fiche de contrle de qualit des antibiotiques Reporter les rsultats sur la fiche millimtre Sur cette fiche figureront les donnes relatives chaque association disque-souche. Comporte une indication de lintervalle de dimensions des zones acceptables.

    15. Fiche du contrle de qualit des tests de sensibilit lAmikacine pour E.coli

    16. Les rsultats en dehors des limites acceptables Prendre des mesures pour amliorer la qualit du test.